MiR-142-3p表達升高與單核細胞來源的樹突狀細胞在紅斑狼瘡病中的促炎作用相關

樹突細胞來源miRNA在紅斑狼瘡疾病中的重要作用

研究背景

系統性紅斑狼瘡（SLE）是一種復雜的自身免疫性疾病，其發病機制目前還不是很清晰。樹突細胞（DCs）在免疫系統中扮演著重要的角色，與SLE的發生關系密切。來自復旦大學附屬華山醫院的研究人員，以樹突細胞為研究對象，深入探究了miRNA在SLE疾病中的重要作用。

研究思路

研究結果

1、moDCs在SLE中的促炎癥功能鑒定

產生細胞因子是DC細胞的重要功能之一，我們首先分析了SLE病人和正常人來源的單核細胞源DCs(moDCs)分泌的細胞因子和趨化因子。結果顯示，在病人的moDCs中，IL-6，CCL2和CCL5表達顯著升高。同時，Transwell assay也顯示，moDCs培養細胞上清中富含更多的CD4+T細胞。因此，通過第一部分的實驗，我們發現了SLE病人DC細胞中異常表達的炎癥因子表達。

2、moDCs中的miRNA表達模式分析

由于miRNAs在DCs功能發揮中的重要作用。因此，我們通過miRNA表達譜芯片，分析了SLE病人和正常人的培養moDCs的miRNA表達模式。結果顯示，一共有18個miRNAs在SLE中異常表達，其中，有8個上調，10個下調。

通過對miRNA預測靶基因的功能和通路分析，我們對富集到重要功能的7個miRNA (miR-142-3p, miR-630, miR-671-5p, miR-15b-5p, miR-181b-5p, miR-125a-5p和 miR-5703)進行了進一步的分析。針對15個病人和15個健康人樣本的qRT-PCR驗證，我們發現miR-142-3p, miR-630, miR-15b-5p, miR-181b-5p, miR-125a-5p, and miR-5703的表達與芯片結果一致。

在這些miRNA中，我們對miR-142-3p格外關注，因為有研究發現它是血液干細胞和造血干細胞的形成中有重要作用，且對CD8+ T細胞增殖和巨噬細胞組成由重要作用。對miR-142-3p的靶基因功能富集也顯示，主要參與細胞因子和趨化因子調控。因此，miR-142-3p很有可能在SLE中有重要的免疫調控作用，我們把miR-142-3p作為后期功能驗證的重點。

3、miR-142-3p生物學功能研究

那么，miR-142-3p在moDCs中扮演了什么樣的角色呢？我們運用慢病毒轉染，構建了miR-142-3p過表達細胞系。對細胞因子和趨化因子檢測，我們發現，過表達細胞中的IL-6，TNF-α，CXCL8，CCL5的表達都顯著增加。因此，細胞中的過表達模擬了SLE病人的免疫因子變化。

DC細胞誘導的T細胞啟動對SLE的發生有重要的作用。因此，我們對moDCs上清中的CD4+ T細胞進行了鑒定，發現miR-142-3p過表達細胞系中有更多的CD4+ T細胞遷移。深入的實驗表明，CD4+CD25+Foxp3+ T細胞在過表達的CD4+ T細胞中比例降低，IL-17表達顯著增加。因此，miR-142-3p影響了 moDCs和CD4+ T細胞的交互作用。

研究結論

我們的研究通過對SLE病人的moDCs的miRNA表達模式分析，發現了特異性高表達的miRNA: miR-142-3p。后期的功能驗證實驗表明，miR-142-3p促進細胞因子和趨化因子的產生，吸引更多的CD4+T細胞，減少Treg擴散。本研究表明，miR-142-3p可能是一個SLE的新的治療靶點。
本研究miRNA表達譜芯片由上海伯豪生物技術有限公司提供。

原文出處： Wang Y, Liang J, Qin H, et al.Elevated expression of miR-142-3p is related to the pro-inflammatory function of monocyte-derived dendritic cells in SLE . Arthritis Res Ther. 2016.