Moxi GO II 快速流式細胞儀為單細胞測序的樣本質控建立新標準
Moxi GO II：為單細胞測序的樣本質控建立新標準
——基于庫爾特-熒光雙模技術的快速流式解決方案
——基于庫爾特-熒光雙模技術的快速流式解決方案
在單細胞測序技術爆發式發展的今天，研究者們正以前所未有的分辨率探索細胞異質性，解密生命的微觀奧秘。然而，這項被譽為“生命科學顯微鏡”的技術，卻長期受困于樣本制備的“第一道關卡”——如何精準把控細胞濃度、活率、純度等關鍵參數。美國Orflo Technologies的快速流式細胞儀Moxi GO II（圖1），以庫爾特-熒光雙模技術重構單細胞測序質控標準，成為科研路上的“可靠同行者”。
圖1 Moxi GO II
單細胞測序的“隱形門檻”，Moxi GO II輕松跨越
單細胞測序的魅力在于捕捉單個細胞的獨特基因表達圖譜，但樣本的微小性（單個細胞RNA易降解）、復雜性（細胞異質性）和敏感性（批次效應影響大），讓樣本制備成為決定實驗成敗的“生死線”。傳統檢測方法或依賴成像計數（僅測幾百個細胞，統計偏差大），或受激光散射影響（粒徑測量失真），難以滿足單細胞測序對“高精度”的嚴苛要求。
Moxi GO II的出現，為這一困境帶來了突破性解決方案。它創新性融合庫爾特原理與熒光流式檢測技術，從根本上革新了細胞分析邏輯：
- 庫爾特原理的“三維透視眼”（圖2）：通過測量細胞通過小孔時的電阻變化，實現對細胞的逐個三維測量，不僅精準計數（幾秒鐘內計數4萬個細胞，遠多于成像類的幾百個），更能捕捉真實粒徑分布，不受樣本顏色、濃度干擾，數據可靠性較傳統方法提升數倍。
圖2 庫爾特原理圖解
- 熒光檢測的“火眼金睛”（圖3）：配備488nm激光與雙PMT熒光通道，基于PI染料的活率檢測靈敏度與大型流式細胞儀相當，CV值（變異系數）極低，準確性遠高于成像系統，讓“活細胞比例”這一關鍵指標無可爭議。
圖3 熒光檢測圖解
從樣本到數據，Moxi GO II的“全鏈條守護”
單細胞測序的樣本制備涉及細胞分離、純化、質控等多個環節，Moxi GO II以“多面手”能力覆蓋全程，成為科研人員的“質控管家”：
- 1. 細胞計數與活率：讓“數量”與“質量”一目了然
在單細胞測序中，細胞濃度過高易導致油滴包裹多個細胞，過低則浪費試劑——Moxi GO II幾秒鐘內即可完成精準計數，CV值低于傳統系統（如圖4所示，計數CV值極低，準確性遠高于成像系統和血球計數板），確保每個油滴只捕獲一個細胞。同時，其活率檢測能精準區分死活細胞，避免死細胞釋放的游離核酸干擾測序結果。
圖4 不同檢測系統的計數和活率檢測CV值
- 2. 粒徑分析：揪出“隱藏的干擾者”
細胞聚集、碎片污染是單細胞測序的常見隱患。Moxi GO II的超高分辨率粒徑分析（可區分4.1μm、6μm、7.9μm等不同微珠），能清晰識別聚集細胞（如圖5中HEK-293細胞聚集狀態）和小顆粒碎片（如圖6中“不健康”細胞的小顆粒增加），幫助研究者在實驗早期剔除不合格樣本。
圖5 聚集和非聚集樣本結果疊加比較
圖6 健康和不健康樣本結果疊加比較
- 3. 樣本純度與表型：讓“目標細胞”無處可藏
無論是PBMC樣本中的紅細胞污染（圖7中通過粒徑門控計算RBC“污染”程度），還是磁珠純化后的細胞純度驗證（圖8中單核細胞與PBMC的粒徑差異），Moxi GO II都能通過粒徑+熒光雙維度分析輕松完成。更支持細胞表型分析（如CD3/CD8雙標記檢測，圖9），為分選后純度驗證提供直接證據。
圖7 PBMC純度，RBC污染
圖8磁珠純化
圖9 細胞表型分析
- 4. 細胞核計數：挑戰“微小樣本”的精準測量
當樣本為細胞核（直徑僅4-9μm）時，傳統成像計數儀常因分辨率不足誤判，而Moxi GO II可分辨低至3μm的顆粒，結合PI染色輕松實現細胞核精準計數（圖10中裂解前后細胞核計數一致），為核測序提供可靠數據。
圖10 細胞核計數
科研力證：從耳蝸到皮膚，Moxi GO II的單細胞測序“多領域信任”
Moxi GO II的準確性、可靠性等已被眾多頂級科研團隊驗證，成為單細胞測序研究的有力工具：
- 在小鼠耳蝸衰老研究中（Protein & Cell, 2023，https://doi.org/10.1093/procel/pwac058），中國科學院動物研究所的研究團隊用其精確測量耳蝸細胞濃度，為單細胞轉錄組分析提供穩定起始樣本；
- 探索槲皮素促進毛發生長機制時（Protein & Cell, 2023，https://doi.org/10.1093/procel/pwac062），首都醫科大學宣武醫院的研究人員通過Moxi GO II監測毛囊細胞活率與增殖狀態，為“血管-毛囊”互作研究奠定基礎；
- 解析急性腎損傷中的淋巴內皮細胞異質性（bioRxiv, 2024，https://doi.org/10.1101/2023.06.09.544380），其高分辨率粒徑分析幫助德克薩斯A&M大學醫學院的研究人員區分不同亞型淋巴內皮細胞，確保測序數據的特異性；
- 在人類皮膚衰老的單細胞圖譜構建中（Developmental Cell, 2021，https://doi.org/10.1016/j.devcel.2020.11.002），Moxi GO II的快速檢測能力加速了樣本周轉，助力中國科學院動物研究所團隊捕捉皮膚細胞的動態變化。
不止于“精準”，更在于“易用”：讓每個實驗室都能輕松駕馭
對于忙碌的科研人員而言，儀器的“友好度”同樣關鍵。Moxi GO II設計之初便以“化繁為簡”為目標：
- 開機即用：無需預熱，觸屏操作，預設程序覆蓋常見檢測需求，新手也能秒上手；
- 快速輸出：10秒內給出結果，大幅縮短樣本等待時間；
- 維護省心：無需復雜清潔，小巧機身節省實驗室空間；
- 靈活兼容：支持Annexin V-FITC、PE、PI等多種染料（見表），適配活率、凋亡、轉染效率等多種檢測場景。
總結：
單細胞測序技術獨特復雜，成本昂貴，因此樣本處理制備就顯得尤為重要，是下游實驗成敗的基礎。Orflo Technologies的Moxi GO II系統非常適用于細胞樣本的全程監測。 Moxi GO II采用庫爾特原理進行細胞計數和粒徑測量，同時采用488nm激光光源，結合兩個PMT通道，525/45nm通道和561nm/LP（或者646nm/LP，可根據需要更換），進行細胞活率、細胞凋亡、轉染效率、活性氧簇、線粒體膜電位等常規流式檢測。
儀器設計小巧輕便，無需預熱，開機即用，預設程序，觸屏操控，運行后10秒即可給出測試結果，使用后也無需清潔維護。Moxi GO II功能多樣，簡單易用，為廣大研究者提供了一個非常實用的檢測工具。通過Moxi GO II，無論是經驗豐富的流式專家，還是初試身手的實驗小白，都可以輕松完成實驗。
美國Orflo Technologies公司是一家非常專業的細胞分析儀器研發和制造企業，擁有多項專利技術，產品以庫爾特原理的高精細胞計數儀和超快流式細胞儀為主。作為中國地區獨家代理，環亞生物科技有限公司全權負責Orflo Technologies產品在中國地區的推廣、銷售，為廣大用戶提供專業的技術咨詢和產品服務。
環亞生物，生命科學產品全國性代理商，不斷把國外頂級的創新產品引入中國。環亞生物具備完善的公司運營、產品管理、營銷、售前技術支持和售后維修體系。
文中所用文獻全文鏈接：
1.https://doi.org/10.1093/procel/pwac058
2.https://doi.org/10.1093/procel/pwac062
3.https://doi.org/10.1101/2023.06.09.544380
4.https://doi.org/10.1016/j.devcel.2020.11.002
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環亞生物科技有限公司
地址：上海市松江區莘磚公路518號9幢502室
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郵箱：info@apgbio.com
網址：www.apgbio.com
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2.https://doi.org/10.1093/procel/pwac062
3.https://doi.org/10.1101/2023.06.09.544380
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