Beacon單細胞光導平臺助力自身免疫性疾病MOGAD研究中的應用
在自身免疫性疾病研究領域，如何精準捕捉罕見的自身反應性B細胞并解析其分泌的抗體特征，一直是科學家面臨的重大挑戰。近期，耶魯大學醫學院與布魯克細胞分析團隊合作，借助 Beacon® 單細胞光導平臺，在髓鞘少突膠質細胞糖蛋白抗體相關疾病（Myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG) antibody-associated disease, MOGAD）的研究中取得突破性進展，為自身抗體發現開辟了高效、精準的新路徑。
MOGAD近年被確定為一種獨立的自身免疫性中樞神經脫髓鞘病，其核心特征是機體產生針對髓鞘少突膠質細胞糖蛋白（Myelin oligodendrocyte glycoprotein, MOG）的自身抗體。這些抗體被視為 MOGAD 的臨床標志物，但它們如何介導中樞神經系統病變的分子機制至今仍不明確。
研究這類疾病的關鍵在于獲取患者來源的單克隆抗體，然而傳統抗體發現方法在此面臨兩大難題：
靶標特殊性：MOG 是一種跨膜蛋白，其生物活性依賴于完整的構象。傳統方法難以實現抗體與天然構象 hMOG的特異性結合檢測。
細胞稀缺性：分泌 MOG 特異性 IgG 抗體的記憶 B 細胞在患者外周血單個核細胞（PBMCs）中占比極低，如同 “大海撈針”，常規篩選手段效率低下。
來自耶魯大學醫學院的研究團隊選擇 Beacon®單細胞光導平臺作為篩選平臺，正是看中其在單B細胞篩選的獨特優勢。該平臺通過光導技術實現單個 B 細胞的精準捕獲與培養，結合細胞水平的功能檢測，構建了一套高通量自身抗體發現流程。
圖1：Beacon®平臺篩選MOGAD自身抗體的實驗流程。
研究人員從MOGAD患者的PBMC中分離記憶B 細胞，然后利用布魯克公司專門的人記憶B細胞激活培養基將記憶B細胞激活成抗體分泌細胞，接著用Beacon®平臺篩選了61,960個激活的記憶B細胞，從中識別出19,000個分泌IgG的B細胞。通過細胞結合試驗，最終發現18對獨特的MOG結合抗體序列。經過驗證，12個候選序列中成功獲得1株具有高特異性的單克隆抗體（來自Pen2497，命名為mAb2497），其重鏈CDR3序列在篩選中重復出現4次，提示該序列在MOG識別中的重要性。
在獨立重復實驗中，mAb2497 表現出濃度依賴性的 hMOG 結合活性。即便在低至 0.1 ng/mL 的濃度下，仍能穩定結合靶標，顯示出極高的親和力。
圖2：基于Beacon®平臺開展細胞結合實驗識別抗MOG自身抗體。
圖3：來自Pen 2497的單抗被驗證能夠結合MOG。
圖4：關于mAb2497的更多信息和驗證結果。A. 對 mAb2497 進行了獨立的重新表達，以確認其在活的人源 MOG 細胞結合試驗中的結合能力。B. mAb2497在CRO公司生產，并在該公司進行了活的人源 MOG 細胞結合試驗，以檢測其濃度特異性結合能力。mAb2497 在低至 0.1 ng/mL 的濃度下仍能檢測到結合信號。
