重組片段抗體定制服務|重組片段抗體生產

抗體/抗體片段抗原產生特異性和高效結合性，在生化、治療和診斷等領域發揮不可替代的作用。傳統生產單克隆抗體的雜交瘤技術，由于其自身研發周期比較長，生產的成本相對較高，已經成為大規模、快速生產抗體/抗體片段的瓶頸。近年來，隨著基因重組和生物工程技術的不斷進步，高通量篩選和大規模生產抗體/抗體片段成為現實。

抗原結合片段 （Fab） 是抗體上與抗原結合的區域。 它包含每條重鏈和輕鏈的一個恒定區和一個可變區。 只有重鏈和輕鏈的可變區融合在一起形成單鏈可變片段（scFv），其大小只有Fab片段的一半，但保留了原有的特異性。另一種小抗體片段，單域抗體，又稱域抗體、VHH、VNAR或sdAb，是一種由單個單體可變抗體結構域組成的抗體片段，缺少常規的輕鏈和重鏈的CH結構域。

泰克生物是一家專業的CRO服務提供商，能為我們的客戶提供高質量的重組抗體表達服務，如scfv抗體片段、fab抗體片段、sdAb單域抗體、重鏈抗體等重組抗體構建和表達服務。另外，泰克生物目前在建的5000平米的GMP研究中心，能夠為各類工業客戶提供批量的重組抗體生產服務。

 

█ 抗體片段特性

 

抗體類型	組分	分子量（kDa）	化合價	半衰期（h）
Fab	VH+CH1+VL+CL （輕重鏈利用二硫鍵連接）	50-55	單體	12-20
scFv	VH+VL	30	單體	2-4
sdAb	VHH	15	單體	0.5
Fc融合抗體	（抗體+CH2+CH3）*2	/	二聚體	/
di-scFv	scFv*2	60	二聚體	4-8

 

█ 抗體片段表達系統常用宿主

  

 

 

表達系統	菌株/細胞	特點
E.coli	BL21（DE3）	Ion-ompT，有效防止重組蛋白在胞內被水解 Rosetta（DE3）菌株含有pRARE質粒，能夠提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA稀有密碼子的tRNA，能夠提供更加“通用”的蛋白質表達，從而提升目的蛋白表達水平，該質粒具有氯霉素抗性。
	Rosetta
哺乳動物細胞	CHO-S	是實驗室常用的細胞系，作為貼壁和懸浮培養生長良好，生產率高，是大規模培養和GMP程序的理想選擇；可進行許多翻譯后修飾以獲得生物仿制藥，顯示出卓越的生物相容性和藥物活性；適用于無蛋白、無動物生產、無血清培養條件，并具有更好的穩定性和安全性。
	CHO-K1
	Freestyle 293F	是一類能夠在無血清中高表達蛋白的野生型293細胞系，可以高效表達蛋白。
	Expi 293F	具有高度可轉染行，展示出較高的蛋白表達水平，相比標準的懸浮適應293細胞，表現出更快速的細胞生長和更高的培養存活率。

 

█ 抗體片段高表達策略

 

優化方式	特性
融合抗體	Fab 基因表達時，5'端帶上細菌蛋白信號肽基因的Fd基因和L鏈基因，可在大腸桿菌細胞壁的周質腔內分泌型表達，形成完整的立體折疊。Fab片段保持了親本抗體的抗原結合特異性和生物學活性。Fd基因片段和L鏈基因可以分別構建在兩個載體上，然后共轉染細胞，也可以構建在一個載體上轉染細胞進行表達。
抗體序列本身的修飾	經定點突變可以改變抗體在某些關鍵位點的氨基酸，從而優化其穩定性，增強與抗原的親和性，提高表達產量。
表達系統的選擇	應考慮的因素有：實驗設備、需表達抗體毒性、所需營養物、是否需要抗體高產率、抗體純化工藝、生產成本、調控元件、生物安全方面等。
密碼子優化	天然抗體/scFv來源于真核生物,其密碼子很可能不為E.coli所偏好，使用偏好密碼子能提高細胞對環境及抗體的適應性,減少重組抗體的錯誤折疊率。
條件優化	需要考慮的因素包括溫度、培養基配比、pH、培養時間及誘導條件等。

 

█ 抗體表達服務內容

 

實驗內容	交付	周期
基因合成＆載體構建	1. 重組抗體 2. 表達載體 3. 克隆菌株 4. 實驗報告	6-8周
質粒抽提
細胞轉染＆表達抗體
抗體純化（SDS-PAGE）

 

█ 泰克可提供的服務

 

片段抗體構建和生產服務

 

片段抗體包括Fab抗體、scFv和VHH抗體（駝源納米抗體）等。客戶可直接提供Fab、scFv或VHH序列，交由泰克生物進行重組表達并獲得高純度產品。如客戶僅有靶抗原信息，則可委托泰克生物進行動物免疫并篩選scFv、VHH等抗體。

 

重組抗體293F/CHO細胞表達服務

 

全套Gibco無血清哺乳細胞培養，適用于科學家對天然構象蛋白的體外重組表達需求，如糖基化修飾，磷酸化修飾等。為客戶提供的全套服務滿足GMP-like體系，包括細胞種子庫來源文件記錄體系、細胞種子批檢定，動物源成分的質控，標準化細胞培養與轉化操作流程，全套GE提供的純化填料和設備等準則進行生產的重組蛋白。

 

█ 服務優勢

 

✔ 詳細的實驗設計和論證：包含稀有密碼子分析，抗體序列分析，表達系統的選擇，表達載體構建方案，抗體修飾等

✔ 多種標記抗體表達：His標簽融合表達，同位素標記表達、生物素標記表達

✔ 多個種屬的重組抗體制備：包括人源，鼠源，兔源，羊源，犬源，駱駝源，羊駝源，牛源等

✔ 抗體修飾控制：糖基化修飾和磷酸化修飾多寡控制

✔ 多重表達模式：穩定表達和瞬時表達

✔ 配套的哺乳體系高表達載體和各種規格的放大體系

✔ 低內毒素水平：LAL檢測法<0.1EU/ug

✔ 完整的文件追溯體系，保證您的產品所有材料、試劑和制備信息可追溯

泰克生物科技（天津）有限公司致力于為全球客戶提供基于噬菌體展示和納米抗體研發平臺的定制服務，泰克生物的研發團隊在抗體發現、重組抗體開發和噬菌體文庫構建和篩選方面擁有豐富的經驗。我們的服務包括使用各種抗體庫技術（包括噬菌體展示、細菌展示和酵母展示）生產人、猴、兔、牛、羊、羊駝和駱駝單克隆抗體。此外，泰克生物擁有的抗體發現和噬菌體平臺可以提供：抗體偶聯藥物發現服務、CAR候選分子發現服務以及相關的抗體測序和親和力測定服務；納米抗體文庫構建與篩選服務，噬菌體文庫構建和篩選服務以及抗體親和力成熟等相關服務。

泰克生物的科學家致力于為戰勝癌癥以及各種疾病提供生物學研究方法和服務。泰克生物的科學家認為，建立以客戶服務為中心的運營模式對于優化藥物開發流程，同時組建不同研究領域背景的團隊進行未來的藥物發現和癌癥研究具有重要意義。泰克生物的這一長期發展目標激勵著我們為客戶提供優質的技術服務和研究成果。