PCR實驗分區-基因擴增實驗室通風環境的設計

幸福的人都是一樣的，不幸福的人各有各的不同，隔壁師兄做出來的定量PCR曲線不僅完美，重復性也好，而我的實驗卻一言難盡，該出峰的曲線不理想，不該出峰的卻都是峰，我能怎么辦，我也很絕望啊，核酸氣溶膠的污染悄無聲息，防不勝防，假陽性的結果讓做PCR的我崩潰抓狂……

是否有好的方法來進行應對呢？我苦思冥想……

那我們先來了解一下什么是氣溶膠？

氣溶膠是由固體或液體小質點分散并懸浮在氣體介質中形成的膠體分散體系，在氣體與液體面摩擦時，操作時比較劇烈地搖動反應管，離心機離心，擴增后PCR產物開蓋時、吸樣時及移液器槍反復吹吸樣品時都可形成氣溶膠而污染。

綜上所述，為了得到好的實驗結果，PCR反應需要進行嚴格的實驗分區：

☑   常規需要設置3個獨立的分區：試劑耗材儲存與準備區、樣品處理和樣品制備區，擴增檢測區，各區域空間完全獨立；實驗室實施空氣流向控制，擴增前和擴增后區域應具有獨立的通風系統，擴增后區域保持負壓狀態，其他區域保持常壓，防止擴增產物進入擴增前的區域。

理想情況下需要四個獨立分區：嚴格按照單一流向進行實驗，即試劑準備區（1區）—樣本制備區（2區）—擴增分析區（3區），嚴禁逆流，實驗室內溫度為15°C-30°C為合格范圍等。

☑   除此之外，還要物品專用：各區域只用于特定操作，不得從事其他工作，例如試劑，工作服，儀器，手套，標記筆等等均為該區專用，不得交叉使用。

☑     使用完的槍頭，廢液等，需要在專區進行處理。

小編今天就總結到這了，還要繼續我的PCR實驗去了！