塑料切片類骨質（osteoid）戈德納-馬森（GOLDNER-MASSON）染色試劑盒使用說明書

塑料切片類骨質（osteoid）戈德納-馬森（GOLDNER-MASSON）染色試劑盒
 
主要用途
 
塑料切片類骨質（osteoid）戈德納-馬森（GOLDNER-MASSON）染色試劑是一種旨在使用三色染料（trichrome），分析和區分存檔中的塑料包埋組織切片中的類骨質膠原纖維的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良傳統方法、成功實驗證明的。主要適用于環氧樹脂類、聚甲基丙烯酸甲酯（methacrylate）、鄰苯二甲酸乙二醇（BMA）等包埋的骨組織切片類骨質的鑒別分析。產品即到即用，操作簡捷，性能穩定，顯色清晰。
 
技術背景
 
類骨質（osteoid）是骨基質中未礦物化（unmineralized）的有機部分，一旦礦物化，將產生新生骨組織。90%的類骨質由I型膠原纖維組成。基于戈德納-馬森（GOLDNER-MASSON）三色系統的方法，提供了鮮明的對比，即呈現綠色的礦物化骨質成分和呈現紅色的未礦物化的致密的膠原纖維（類骨質）。 
 
產品內容
 
清理液（Reagent A）  200毫升
韋格液A（Reagent B）    5毫升
韋格液B（Reagent C）    5毫升
酸性液（Reagent D）   30毫升
染色液A（Reagent E）   10毫升
修正液（Reagent F）   50毫升
染色液B（Reagent G）        10毫升
染色液C（Reagent H）   10毫升
產品說明書    1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里，避免光照；試劑具有腐蝕性，注意安全；有效保證3月
 
用戶自備
 
小型玻璃染色缸：用于組織或切片處理的容器
控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈：用于樣品反應孵育
中性樹脂：用于切片封片
光學顯微鏡：用于切片染色后觀察分析
 
 
 
實驗步驟
 
樣本染色開始前，將試劑盒里的試劑置于室溫下預熱，并避光。然后分別移取100微升韋格液A（Reagent B）和韋格液B（Reagent C）到1.5毫升離心管里，充分混勻后，標記為韋格工作液，即刻使用。
 

• 準備好1至2微米厚的塑料包埋的切片
• 小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育，直至液體干化
• 小心加入200微升韋格工作液在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去韋格工作液
• 室溫下，小心將切片置入50毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
• 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
• 小心加入200微升酸性液（Reagent D）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育30秒（注意：避免液體干化）
• 小心移去酸性液（Reagent D）
• 室溫下，小心將切片置入50毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
• 小心加入200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
• 小心加入200微升染色液A（Reagent E）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的染色液A（Reagent E）
• 小心加上200微升 修正液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的修正液（Reagent F）
• 小心加上200微升 染色液B（Reagent G）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的染色液B（Reagent G）
• 小心加上200微升 修正液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的修正液（Reagent F）
• 小心加上200微升 染色液C（Reagent H）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的染色液C（Reagent H）
• 小心加上200微升 修正液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
• 置于60℃控溫熱板上（干式恒溫儀或加熱攪拌儀等）或60瓦白枳燈下孵育2分鐘（注意：避免液體干化）
• 小心移去切片上的修正液（Reagent F）
• 放上蓋玻片或封片（中性樹脂）
• 即刻在一般光學顯微鏡下觀察：

細胞核――呈現藍灰色
類骨質――呈現橘紅色
礦物化骨組織――呈現綠色
軟骨組織——呈現紫色
 
注意事項
 
本產品為50次操作

• 操作時，須戴手套
• 試劑具有腐蝕性，注意操作安全 
• 試劑溶液在切片表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿切片表面
• 整個操作，在避光狀態下進行
• 孵育時間可以根據樣品的不同、染色深淺的不同而延長或縮短
• 染色完成后，即刻進行光學顯微鏡觀察 
• 樣品染色后保存，避免光照
• 本公司提供系列特定組織染色試劑產品

 
質量標準
 

• 本產品經鑒定性能穩定
• 本產品經鑒定顯色清晰