OCT包埋劑的作用原理、使用方法及應用
實驗臺上，那塊小小的組織如何在冷凍后能被切成薄如蟬翼的切片？答案就藏在一種名為OCT包埋劑的水溶性混合物中。
在免疫組化實驗室中，研究人員通常會將組織樣本平放于包埋盒內，加入適量OCT包埋劑浸沒組織，隨后將包埋盒緩慢平放入盛有液氮的容器內。
當包埋盒底部接觸液氮開始氣化沸騰，保持原位大約10-20秒鐘，組織即迅速凍結，隨后便可用于冰凍切片。這一過程依賴于OCT包埋劑的支撐，使柔軟的組織能夠變成適合切片的堅硬塊狀結構。
定義：什么是OCT包埋劑？OCT包埋劑，英文全稱為Optimal Cutting Temperature compound（最優切割溫度化合物），是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物。又稱為OCT冰凍切片包埋劑。
它已在免疫組化實驗室中廣泛應用，主要作用是在冰凍切片時支撐組織，以增加組織的連續性，減少皺折及碎裂。
OCT包埋劑為水溶性，在漂片時可溶于水，因此在后續的染色中不會增加背景染色。利用OCT混合物預先浸潤組織，然后再進行恒冷箱切片，能夠顯著改善切片質量。從物理特性來看，OCT包埋劑具有適當的粘稠度，使組織與樣品托有很強的黏附性。它在溶劑還未凍結時，仍為液體的情況下，可以適當移動標本，調整組織的固定方向。
核心功能：OCT包埋劑的作用原理OCT包埋劑的核心功能是在冰凍切片時支撐組織。通過增加組織的連續性，它能有效減少皺折和碎裂，提高切片質量。
在切片過程中，OCT包埋劑使組織柔軟易切，保持組織原有的形態和結構，這對于后續的觀察和分析至關重要。由于其水溶性特性，在漂片時可完全溶于水，不會在樣品和載玻片上留下殘留物。這一特性避免了在后續染色實驗中增加背景染色，確保了實驗結果的準確性。
OCT包埋劑還能快速冷凍組織樣本，使晶體形成的傷害最小化，從而保持樣本的原始形態和結構，便于直接觀察細胞和組織的形態學特征。
實踐應用：OCT包埋劑的使用方法1）標準包埋流程
根據上海交通大學醫學院的實驗動物飼養與管理指南，OCT包埋劑的標準包埋流程包括三個主要步驟。
1. 將放在蔗糖溶液中的組織塊取出，放入20g L-1蔗糖與OCT包埋劑1：1體積比例混合液中，室溫浸泡2小時。
2. 移入OCT包埋劑中室溫浸泡4小時，更換新的OCT包埋劑，再室溫浸泡6小時。
3. 將標本置于托物臺，用恒冷箱切片機切片（一般-22℃），片厚10μm，貼于預處理的載玻片上，-20℃冰箱保存。
2）快速包埋方法
Absin則提供了更為快捷的包埋方法：
1. 將組織塊平放于包埋盒內，加入適量包埋劑浸沒組織。
2. 將包埋盒緩慢平放入盛有液氮的容器內，當包埋盒底部接觸液氮開始氣化沸騰時，即保持原位切勿浸入液氮中。
3. 大約10-20秒鐘組織即迅速凍結，在組織凍結后，即可使用冰凍切片機進行切片。
3）使用注意事項
· 使用OCT包埋劑時，需注意滴加OCT包埋劑時要均勻，盡量避免氣泡。
· 包埋時需注意切面的位置和樣本的包埋方向。剩余OCT包埋塊可做好標記于凍存管內-80度冷凍儲存備用。
· 新鮮組織應在切除組織后的30分鐘內進行OCT包埋制作冰凍切片。
· 對于不能及時處理的組織，可液氮速凍后-80度保存或經固定液固定后蔗糖脫水再進行OCT包埋。
廣泛應用：OCT包埋劑的實驗場景
OCT包埋劑最初是為冰凍切片而開發的，但它現在的應用范圍已大大擴展。
1、免疫組化實驗與漿膜腔積液細胞學檢查
在免疫組化實驗中，OCT包埋劑是必不可少的材料，因為它能保持抗原性，不影響抗體結合。漿膜腔積液（胸水、腹水、心包積液等）脫落細胞學檢查是病理科診斷惡性腫瘤的最重要方法之一。近年來，巧用OCT包埋劑可溶于水的性能，嘗試將其作為漿膜腔積液離心沉淀后細胞的支架，再經過脫水、透明、浸蠟形成細胞塊。這種方法操作簡便，既富集了細胞，提高了惡性瘤細胞陽性檢出率，同時也有利于惡性腫瘤類型的鑒別。
2、囊壁樣組織處理
在囊壁樣組織的處理中，利用OCT包埋劑進行冰凍切片能夠較好解決此類組織的切片問題。研究表明，使用OCT包埋劑對囊壁樣組織包埋后進行冰凍切片，能夠快速完成切片，保持組織結構完整，染色清晰，診斷準確。
3、皮膚活檢標本診斷
皮膚活檢標本診斷中，使用冰凍切片直接免疫熒光法觀察切片標本上熒光抗體染色結果作為抗原的鑒定和定位，OCT包埋劑也發揮了重要作用。
OCT包埋劑的更多潛力仍在發掘中。除了傳統的組織切片，研究人員已開始將其巧用于漿膜腔積液細胞塊制作，通過其水溶性作為細胞支架，再經脫水、透明、浸蠟形成細胞塊，富集細胞，提高惡性腫瘤細胞陽性檢出率。在每一個精準的診斷背后，都有這樣默默無聞的實驗支撐者。
Absin OCT包埋劑推薦| 貨號 | 產品名稱 | 規格 |
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| abs9756 | OCT包埋劑 | 110mL |
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