HPV DNA 檢測新方法：以致癌基因E6/E7作靶點，避免漏檢
宮頸癌簡介
宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤，其死亡率僅次于乳腺癌。近年來，宮頸癌的發展趨勢逐漸偏向年輕化且呈逐年上升現象。人乳頭瘤病毒( HPV)感染與宮頸癌有高度相關性，是宮頸癌的主要致病元兇，研究表明99.7% 的宮頸癌患者存在HPV感染。因此，宮頸癌篩查至關重要。宮頸癌篩查項目中，臨床上以HPV檢測和TCT檢查較為常見。
HPV基因組介紹
HPV是一種雙鏈的小DNA病毒，具有7900個堿基對，由病毒蛋白外殼和核心DNA物質構成，無包膜。病毒基因組分為3個部分：早期基因區（E）、晚期基因區（L）及將早期區與晚期區分開的長調控區（LCR）。調控區主要調控病毒的轉錄，控制病毒蛋白和感染顆粒的產生。早期區編碼E6、E7、E1、E2、E4和E5蛋白質，主要參與病毒DNA的復制、轉錄。晚期區編碼L1、L2蛋白質，分別是病毒的主要和次要衣殼蛋白[1]。
E6、E7基因的致癌機理
早期區（E區）編碼蛋白基因中，由E6、E7基因編碼的致癌蛋白是導致宮頸上皮癌變的重要因子，編碼的致癌蛋白是導致宮頸上皮癌變的重要因子，這兩種蛋白與細胞內兩種主要抑癌蛋白p53和pRb的結合以及調控可以明顯改變細胞生長周期和DNA修復，由此導致的基因組不穩定性是細胞轉化和永生化的必要條件，
在CIN I期及之前，HPV主要以游離狀態存在于宿主細胞中，在病變進一步發展的過程中，HPV基因組會整合到宿主細胞基因組，隨著病變程度的增加，HPV最終以整合狀態存在。整合之后，L1基因常常丟失，而E6/E7基因持續存在。
L1 與E6/E7分別作為檢測靶點的區別
從低級別病變發展為癌的過程中，HPV基因組會發生整合。在整合過程中，E6/E7基因持續存在，L1基因可能會丟失，有漏檢風險。
· 對56個浸潤性宮頸癌組織活檢樣本分別用L1區通用引物和E6-E7分型引物進行檢測比較發現，有23個樣本存在L1區缺失[3]。
· 研究發現，HPV 18的L1/E1區更容易丟失。幾乎所有的HPV18陽性的宮頸癌中病毒基因組整合到人基因組上；而HPV16陽性的宮頸癌中也有≤60%的病毒基因組發生整合[4]。
· 一項基于15,774例病人樣本的研究發現，跟型別特異性E6/E7引物PCR比較，通用引物MY09/11 PCR檢測會造成10.9%（522例）的漏檢；409例由MY09/11 PCR檢測結果為陰性的病人中，隨訪發現最終有104人（25.4%）發展為CIN2+[5]。
相對于以L1基因作靶點，以E6/E7基因作檢測靶點，可以避免由于HPV基因組整合到人基因上造成的漏檢。因此，致癌基因E6/E7更適合作為HPV DNA檢測的靶點。
