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          病毒包裝技術(shù)8——病毒包裝實驗經(jīng)驗總結(jié)介紹

          瀏覽次數(shù):1674 發(fā)布日期:2015-7-3  來源:銳賽生物
          銳賽小課堂常識篇0703-115
          病毒包裝實驗經(jīng)驗總結(jié)

          第一,細(xì)胞狀態(tài)、載體系統(tǒng)、目的基因?qū)Σ《景b影響(基因大小、序列情況、蛋白功能毒性等)是三個主要影響病毒質(zhì)量的因素。

          第二,細(xì)胞狀態(tài)需要有豐富的細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗來判斷,比如包裝或轉(zhuǎn)染感染前一定要重視細(xì)胞干凈細(xì)微污染與否、飽滿立體感是否好、鋪板均勻細(xì)胞密度適中否等性狀。另外轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的密度要十分注意,一般在70%左右。

          第三,建議使用商品化的成熟毒載體系統(tǒng)。

          第四,至于包裝轉(zhuǎn)染時的操作控制細(xì)節(jié)及其轉(zhuǎn)染試劑因素,需要注意,不要在中途細(xì)胞被污染導(dǎo)致整個過程都需要重復(fù)

          第五,另一個需要關(guān)注是目的基因的表達載體構(gòu)建和抽提純化環(huán)節(jié),中抽純化是否污染,純度是否到達要求等。這些環(huán)節(jié)也是保證病毒質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)

          第六,目的基因的大小、序列情況、該目的蛋白的功能毒性等能影響導(dǎo)致包裝成功與否,我們可以通過更換病毒包裝載體系統(tǒng),嘗試其他載體系統(tǒng)來實現(xiàn)目的。

          持續(xù)發(fā)布中......

          參考鏈接:http://www.research-bio.com/h-col-159.html​
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