生物制藥4.0 ：上游工藝中先進的過程分析技術(shù)（PAT）

生物制藥4.0的核心在于通過數(shù)據(jù)驅(qū)動決策，實現(xiàn)工藝的實時監(jiān)控與自適應(yīng)控制，最終達到更高的產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)量和工藝穩(wěn)健性。PAT由美國FDA倡導(dǎo)，是一個通過實時測量原料、過程物料及過程的關(guān)鍵質(zhì)量和性能屬性，以設(shè)計、分析和控制制造的系統(tǒng)。

在上游工藝中，傳統(tǒng)的離線取樣分析存在明顯的時間滯后性、操作繁瑣和高污染風(fēng)險等問題，無法滿足實時控制的需求。因此，先進的在線PAT工具成為必然選擇。

• 技術(shù)原理：高度自動化的無菌取樣系統(tǒng)（EAS在線取樣系統(tǒng)）通過自動從生物反應(yīng)器獲取樣品，將樣品輸送至線旁細胞計數(shù)儀（CytScop® Pro自動對樣品進行TB/AOPI染色），基于圖像識別，通過分析細胞形態(tài)來精確區(qū)分并計數(shù)活細胞與死細胞，從而同步計算出總細胞密度和活細胞活力。

• 應(yīng)用價值：實現(xiàn)對細胞培養(yǎng)過程的近實時、高頻率監(jiān)控，通過自動化消除了人工誤差，提升數(shù)據(jù)的一致性與可靠性，從而根據(jù)數(shù)據(jù)優(yōu)化補料策略、確定最佳收獲時間，避免因細胞凋亡釋放宿主細胞蛋白和DNA而增加下游純化負擔。

代謝物濃度

• 技術(shù)原理： 傳統(tǒng)電化學(xué)探頭可在線監(jiān)測pH、溶氧（DO）和二氧化碳。而對于更復(fù)雜的代謝物，在線拉曼光譜 結(jié)合化學(xué)計量學(xué)模型（PLS）已成為強大工具，可同時定量多種代謝物濃度。

• 應(yīng)用價值： 實現(xiàn)動態(tài)補料控制，維持營養(yǎng)物在最佳濃度，避免代謝副產(chǎn)物的過度積累，從而優(yōu)化細胞生長和蛋白表達。

產(chǎn)物濃度

• 技術(shù)原理： 拉曼光譜的指紋特性使其能夠通過與已建立的模型關(guān)聯(lián)，來預(yù)測產(chǎn)物滴度甚至關(guān)鍵的質(zhì)量屬性。

• 應(yīng)用價值： 實時了解生產(chǎn)過程效率和一致性。對于糖基化等關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQAs）的早期預(yù)警，允許操作員進行干預(yù)（如調(diào)整溫度或pH），確保產(chǎn)品質(zhì)量批次間一致。
  
  
  

通過整合多變量PAT數(shù)據(jù)，可以構(gòu)建高級過程控制（APC） 或模型預(yù)測控制（MPC） 策略。

展望未來，隨著對傳感器硬件、海量數(shù)據(jù)處理與建模復(fù)雜性等先進技術(shù)的突破及法規(guī)合規(guī)性的不斷完善，在線PAT正朝著與人工智能（AI）及物聯(lián)網(wǎng)（IoT）平臺更深度集成的方向演進，同時通過行業(yè)對質(zhì)量源于設(shè)計（QbD）理念的深入理解，PAT必將成為未來生物制藥智能工廠的標準配置，助力生物制藥生產(chǎn)進入更穩(wěn)健和智能的新紀元，推動行業(yè)向著更高質(zhì)量的方向發(fā)展。