微生物細胞計數(shù)儀的實踐方案在突破活菌計數(shù)效率瓶頸中的應(yīng)用

在微生物研究、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品衛(wèi)生檢測等領(lǐng)域，活菌計數(shù)是銜接 “實驗設(shè)計 - 結(jié)果驗證” 的關(guān)鍵環(huán)節(jié)——監(jiān)測菌株傳代中的活性穩(wěn)定性、評估抑菌藥物的半數(shù)抑制濃度（IC50）、驗證食品加工后微生物殘留量，都需要以精準的活菌濃度、活率數(shù)據(jù)為依據(jù)。但長期以來，傳統(tǒng)活菌計數(shù)方法的固有局限，不僅制約了工作效率，還無法解決數(shù)據(jù)可靠性這一痛點。

傳統(tǒng)手動菌落計數(shù)法的流程鏈條長：需先對細菌懸液進行梯度稀釋，再均勻鋪于固體培養(yǎng)基，之后還要經(jīng)歷過夜甚至數(shù)天的恒溫培養(yǎng)。不僅占用大量時間，后續(xù)計數(shù)時還可能因菌落重疊、邊緣模糊，或培養(yǎng)箱內(nèi)溫度 / 濕度不均導致菌落生長差異，最終引入 ±10%-15% 的計數(shù)誤差；而常用的OD值檢測法，本質(zhì)是通過 “吸光度-濃度” 標準曲線間接估算，既無法區(qū)分活菌與死菌（死菌細胞壁碎片同樣會產(chǎn)生吸光度），還會因菌株形態(tài)差異、懸液均一性不足導致數(shù)據(jù)波動，難以滿足高精度實驗或檢測需求。

針對這些實際需求，博大博聚微生物細胞計數(shù)儀通過顯微成像技術(shù)，提供了一套更適配、更高效的實驗場景的解決方案。該儀器搭載20X光學成像系統(tǒng)、1000 萬高分辨率 CMOS 與雙色熒光通道，配合微生物特異性熒光染料（活菌被染為綠色，死菌被染為紅色），可清晰捕獲單個細菌的熒光信號，避免傳統(tǒng)方法中 “群體估算” 的局限性。

從操作流程來看，該儀器的核心優(yōu)勢在于 “簡化預處理與標準化操作”：無需對細菌懸液進行離心富集或沉降處理，僅需兩步即可完成樣品準備——先取 5μL 細菌懸液與 5μL 微生物雙色熒光染液 1:1 混勻；再吸取 5μL 染色后的混合液，滴加至配套的細菌計數(shù)板（計數(shù)室高度為 5μm），再將細菌計數(shù)板置于儀器載物臺。后續(xù)僅需在軟件中錄入樣品編號等基礎(chǔ)信息，點擊 “開始分析”，儀器便會自動完成圖像采集、細菌識別與數(shù)據(jù)計算，整個過程無需鋪板、無需等待培養(yǎng)，幾分鐘內(nèi)即可輸出高清熒光圖像及活菌濃度、活率、細菌直徑分布等參數(shù)，大幅縮短了從 “樣品處理” 到 “數(shù)據(jù)輸出” 的周期。

在數(shù)據(jù)可靠性方面，該儀器的設(shè)計邏輯圍繞 “直接計數(shù)-精準識別” 展開：不同于傳統(tǒng)方法的 “間接推導”，其通過雙色熒光通道區(qū)分活菌與死菌信號，再利用智能算法對每個熒光標記的活菌進行逐一識別（可自動排除雜質(zhì)顆粒干擾），最終可自動補償 1:1 染色的稀釋倍數(shù)，直接輸出原始細菌懸液的活菌濃度（單位：viable cells/mL），無需人工換算。其計數(shù)結(jié)果的重復性與穩(wěn)定性均優(yōu)于傳統(tǒng)方法，能滿足科研論文數(shù)據(jù)溯源、藥品研發(fā)中 GMP 合規(guī)檢測等對數(shù)據(jù)精度的嚴格要求。

儀器實拍案例圖

面對活菌計數(shù)的效率與精度難題，博大博聚微生物細胞計數(shù)儀可切實化解痛點。其簡化流程、精準計數(shù)的特性，適配科研、藥企、檢測等多場景需求。若想了解菌株適配方案或流程銜接細節(jié)，可進一步咨詢，為實驗與檢測提效賦能。