親和層析中生物素和親和素的特點及應用

生物素（biotin，B）廣泛分布于動、植物組織中，常從含量較高的卵黃和肝組織中提取，分子量244．31Da．生物素分子有兩個環狀結構（如圖1），其中Ⅰ環為咪唑酮環，是與親和素結合的主要部位；II環為噻吩環，C2上有一戊酸側鏈，其末端羧基是結合抗體和其他生物大分子的唯一結構，經化學修飾后，生物素可成為帶有多種活性基團的衍生物——活化生物素。活化生物素可以在蛋白質交聯劑的介導下，與已知的幾乎所有生物大分子偶聯，包括蛋白質，核酸，多糖，脂類等。

親和素（avidin，AV）亦稱抗生物素蛋白、卵白素，是從卵白蛋白中提取的一種由4個相同亞基組成的堿性糖蛋白，分子量為68kD，等電點pI=10.5；耐熱并耐受多種蛋白水解酶的作用．尤其是與生物素結合后，穩定性更好。生物素與親和素間的作用是已知強度最高的非共價作用，親和常數（K）為1015mol/L，比抗原與抗體間的親和力（K=105～1011mol/L）至少高1萬倍。并且，二者的結合穩定性好專一性強，不受試劑濃度，PH環境，抑或蛋白變性劑等有機溶劑影響。由于每個親和素能結合4個分子的生物素，這一特點可以用于構建一個多層次信號放大系統。因此，BAS即可用于微量抗原、抗體及受體的定量、定性檢測及定位觀察研究，亦可制成親和介質用于上述各類反應體系中反應物的分離、純化。

低耐壓：生物素瓊脂糖微球
生物素瓊脂糖凝膠是用于純化或去除親和素或鏈霉親和素樣本的產品，生物素是通過間隔臂以多種共價結合的方式固定在基材上的，最大限度避免配基脫落。
這種結合非常緊密，可以應用于不可逆結合（如：從某個樣本中去除親和素組分）

ABT Streptavidin 6HC 是用于固定生物素化的生物分子，重組鏈霉親和素通過高度交聯固定在 6% 的瓊脂糖微球上。