親和層析技術(shù)中組氨酸標簽（his-tag）蛋白純化填料的選型分析

親和層析法（IMAC）是目前最廣泛使用的純化技術(shù)，該技術(shù)是基于蛋白表面殘基（組氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等）與過渡金屬陽離子的相互作用而形成螯合，該過渡金屬 / 蛋白絡(luò)合物再與螯功能基團鏈接到瓊脂糖微球上，通常通過降低 pH值或添加咪唑的方式來洗脫目標蛋白。
 
低耐壓
ABT 提供兩種螯合微球，使用標準交聯(lián)微球的兩種配基：亞氨基二乙酸（IDA）和次氮基三乙酸（NTA）。
 
IDA 交聯(lián)瓊脂糖凝膠是由亞氨基二乙酸基團通過間隔臂連接穩(wěn)定的醚鍵組成，IDA 是一種三齒螯合劑，與交聯(lián)的瓊脂糖微球共價偶聯(lián)。該凝膠載有二價金屬（Ni 2+ , Cu 2+ , Zn 2+ 或 Co 2+ ）， 使得該凝膠（即使可用狀態(tài)）成為快速純化帶有組氨酸標簽的目標蛋白的理想材料。
 
與其他螯合凝膠相比，如 NTA 瓊脂糖，IDA 具有三個與金屬離子相互作用的位點，而非四個位點的 NTA。IDA 凝膠通常更易再生，從而可用較低濃度的咪唑更好地洗脫結(jié)合的融合蛋白。
 
該產(chǎn)品范圍涵蓋四種不同類型的金屬離子和兩種不同密度的基團。
 - 鎳螯合物可識別兩個暴露的目標殘基（通常是組氨酸）以實現(xiàn)有效的蛋白質(zhì)結(jié)合，推薦用于大多數(shù)帶組氨酸標簽的蛋白質(zhì)純化。
 - 鋅螯合物似乎可以識別相鄰位置的兩個暴露的目標殘基，建議用于難以分離的蛋白質(zhì)。
 - 鈷螯合物可識別兩個暴露的目標鄰位殘基，這種填料提供了非常好的選擇性。
 - 銅螯合物可識別單個暴露的目標殘留物，這種填料推薦用于難分離的蛋白質(zhì)。
 
凝膠的選擇取決于每一次純化的目的或優(yōu)先級（結(jié)合載量 / 特異性）和純化蛋白的類型（純化的難易程度）。
NTA 交聯(lián)瓊脂糖凝膠由用次氮三乙酸（NTA）衍生并負載二價鎳離子的瓊脂糖組成，NTA 是一種四配位基的螯合劑，占據(jù)鎳離子配位點中的六個結(jié)合位點的四個。其他兩個配位點通常被可與重組蛋白的組氨酸殘基相互作用的水分子占據(jù)，這種結(jié)合最大限度地減少了純化過程中的金屬脫落。
 
高耐壓
鎳和鈷是 IMAC 純化中最常用的金屬離子，鎳 /鈷 Rapid Run™ 微球整合了金屬離子結(jié)合的優(yōu)勢和 Rapid Run™ 凝膠的高流速。這些產(chǎn)品非常適合大規(guī)模的組氨酸標簽（His -Tag）蛋白純化。
Nickel Agarose Extrachel™ 是一種預(yù)裝了與配體緊密結(jié)合的鎳離子凝膠，在 20 mM EDTA 中孵育后，鎳仍然與螯合配體結(jié)合。
低耐壓：螯合瓊脂糖微球和預(yù)裝柱
大包裝填料
ABT 提供利用 IMAC 技術(shù)的組氨酸標簽（his-tag）蛋白純化填料
 - 不同的活化程度以優(yōu)化結(jié)合載量和純化特異性的關(guān)系
 - 填料螯合有鎳、銅、鋅或鈷離子，也有無金屬離子的
 - 可用于批量或純化柱純化 預(yù)裝柱
ABT 提供即時可用的重力柱，預(yù)裝了利用 IMAC 技術(shù)的組氨酸標簽（his-tag）蛋白純化填料快速而簡便的純化
 - 快速而簡便的純化
 - 用于重力層析
 - 無需純化系統(tǒng)
 - 提供鎳和鈷兩種金屬離子選擇
 - 提供 1ml 和 5ml 兩種規(guī)格
低耐壓：鎳NTA瓊脂糖微球和預(yù)裝柱
大包裝填料
鎳 NTA 瓊脂糖填料是由次氮基三乙酸（NTA）衍生，并負載二價鎳離子的交聯(lián)瓊脂糖組成。這是還原條件下最常用的 IMAC 填料，因為螯合物上有四個金屬結(jié)合位點，可實現(xiàn)高蛋白質(zhì)結(jié)合和最小化金屬離子脫落。
 - 一步純化
 - 高載量
 - 原生或變形條件下的純化
 - 最小化金屬離子脫離 預(yù)裝柱
5ml 的鎳 NTA 瓊脂糖預(yù)裝柱是預(yù)裝好了的即時可用的產(chǎn)品，可以用于MPLC、FPLC 和 ÄKTA™ 相關(guān)的設(shè)備上。
ABT 提供1支和5支包裝的 5ml 鎳NTA 瓊脂糖預(yù)裝柱。  
高耐壓：Chelating Rapid Run™ 瓊脂糖微球
大包裝填料
鎳、鈷和無金屬離子的 Rapid Run™ 瓊脂糖微球是專為對帶有組氨酸標簽的蛋白（His-tag）進行大規(guī)模下游純化而設(shè)計的，并且比其他市面產(chǎn)品的流速高 70% 。
 - 極易放大且經(jīng)久耐用
 - 極高的物理和化學(xué)穩(wěn)定性
 - 在最小時間里達到優(yōu)異的分辨率 預(yù)裝柱
5ml 的鎳親和預(yù)裝柱用于純化組氨酸標簽（his-tag）蛋白。
 - 無需優(yōu)化或改變操作流程
 - 優(yōu)異的適應(yīng)性：預(yù)裝柱可用于MPLC、FPLC 和 ÄKTA™ 設(shè)備
 - 與市售產(chǎn)品相比，可一步獲取高純度產(chǎn)物  
高耐壓：Nickel Rapid Run™
大包裝填料
該填料由帶有次氮基三乙酸（NTA）配基的高度交聯(lián)凝膠制成，該填料可以在含有還原劑的情況下依然具有良好的性能，專為大規(guī)模下游純化組氨酸標簽（his-tag）蛋白而設(shè)計。
高耐壓：Nickel Agarose Extrachel™
大包裝填料
Nickel Agarose Extrachel™ 是一種用聚螯合劑配體制造的高容量凝膠，該產(chǎn)品是專為在 EDTA 和 DTT 存在下工作而開發(fā)，不會造成任何性能上的損失。其特異性和穩(wěn)定性允許一步純化，無需對可能會導(dǎo)致鎳離子脫落的情況的樣品進行預(yù)處理。