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S-亞硝基化分析
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服務(wù)商: 北京百泰派克生物科技有限公司 | 查看該公司所有服務(wù) >> |
S-亞硝基化(SNO)是指部分亞硝基(NO)與蛋白質(zhì)的巰基殘基(S)共價(jià)連接形成S-亞硝基。巰基殘基屬于蛋白質(zhì)中特定半胱氨酸殘基的子集,所得的SNO為S-亞硝基蛋白。SNOs在細(xì)胞質(zhì)中的半衰期很短,因?yàn)橛性S多還原酶(包括谷胱甘肽(GSH)和硫氧還蛋白)會對蛋白質(zhì)進(jìn)行去亞硝基化作用。因此,SNOs通常存儲在質(zhì)膜、囊泡、間質(zhì)和親脂性蛋白的折疊中,以保護(hù)它們免于被去亞硝基化,例如,介導(dǎo)凋亡的半胱天冬酶(caspases)就以SNO的形式存儲在線粒體膜間空間中。
S-亞硝基化的過程是可逆。去亞硝基化是一種酶催化過程,它逆轉(zhuǎn)了S-亞硝基化過程。然而,S-亞硝基化不是隨機(jī)事件,且僅對特定的半胱氨酸殘基進(jìn)行S-亞硝基化。S-亞硝基化異常可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)發(fā)生錯誤折疊,突觸損傷和細(xì)胞凋亡。SNO信號功能異常還與許多疾病的發(fā)病機(jī)制有關(guān),例如阿爾茨海默氏心血管疾病。

S-亞硝基化
由于蛋白質(zhì)可能包含多個(gè)半胱氨酸,以及SNO的不穩(wěn)定特性,S-亞硝基化的半胱氨酸可能很難檢測到,且很難與非S-亞硝基化的氨基酸區(qū)分開。百泰派克生物科技建立了高度靈敏的分析平臺,可以分析真核生物和原核生物中的S-亞硝基化半胱氨酸。此外,我們還優(yōu)化了檢測流程,可提供更快、更敏感的S-亞硝基化半胱氨酸分析服務(wù)。
S-亞硝基化分析服務(wù)工作一般流程1. 在凝膠或溶液中水解蛋白質(zhì);
2. 使用抗S-亞硝基化半胱氨酸抗體進(jìn)行S-亞硝基半胱氨酸富集;
3. HPLC分離后進(jìn)行ESI-TOF MS/MS分析;
4. 質(zhì)譜數(shù)據(jù)解析。
離子色譜法
高效液相色譜(HPLC)
基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜(MALDI-MS)