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世界領(lǐng)先的3維細(xì)胞反應(yīng)器
世界上唯一能在體外進(jìn)行的3維細(xì)胞組織培養(yǎng)系統(tǒng)Equl-3DB已進(jìn)入中國!Equl-3DB的應(yīng)用面極廣,從癌癥和愛滋病研究,到組織工程和工業(yè)制藥。
傳統(tǒng)靜態(tài)細(xì)胞培養(yǎng)是在培養(yǎng)瓶或皿中進(jìn)行的。無論是細(xì)胞或組織均生長(zhǎng)在二維平面空間并接觸玻璃或塑料表面。這樣的方式會(huì)影響細(xì)胞中基因的表達(dá)且無法持續(xù)生長(zhǎng)及分化。同時(shí),平面培養(yǎng)的細(xì)胞還會(huì)發(fā)生“去分化”(dedifferentiation)現(xiàn)象,使培養(yǎng)的細(xì)胞逐漸失去其來源組織的許多生理特征。而大部分動(dòng)態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)中,細(xì)胞或組織是有物理的外力而懸浮的,有許多包括液態(tài)剪切力在內(nèi)的因素會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞及組織損傷。
Equl-3DB是一種顛覆傳統(tǒng)的三度空間微重力培養(yǎng)系統(tǒng)。其利用培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱進(jìn)行培養(yǎng),將培養(yǎng)液、細(xì)胞或組織一起加入培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱中,并去除所有氣泡。培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱安裝于具旋轉(zhuǎn)馬達(dá)之基座上,內(nèi)部組織、細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)塊因旋轉(zhuǎn)切線力量及重力雙重影響下而保持懸浮狀態(tài)。隨著細(xì)胞或組織成長(zhǎng),旋轉(zhuǎn)速度可做調(diào)整,細(xì)胞形成團(tuán)塊之后,必須提高轉(zhuǎn)速使其不會(huì)沉降而碰觸底部。旋轉(zhuǎn)的目的是要讓所有細(xì)胞均勻交換養(yǎng)分和氣體,并且細(xì)胞和細(xì)胞之間可有足夠的接觸,有利于細(xì)胞聚集。另外,不論是培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱背側(cè)均具備硅膠制成的換氣膜以利進(jìn)行氣體交換,使細(xì)胞/組織得到充分氧氣及排除代謝后的廢氣。
生長(zhǎng)其中的細(xì)胞或組織是以自由落體的狀態(tài)懸浮,沒有攪拌器、氣泡等破壞性壓力,故組織在培養(yǎng)液中得以自由降落、翻轉(zhuǎn)并與培養(yǎng)液充分混合,其容器內(nèi)各方向的力量達(dá)到平衡,所以細(xì)胞/組織不會(huì)受到單一方向的力量影響,可朝任意方向均勻生長(zhǎng),是市面上唯一可使細(xì)胞自由生長(zhǎng)分化,增加細(xì)胞增殖速率,減少細(xì)胞死亡和有效增加細(xì)胞產(chǎn)物分泌的系統(tǒng)。而且,相比其他的三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),Equl的Equl-3DB系統(tǒng)可以克服長(zhǎng)期困擾三維細(xì)胞培養(yǎng)的內(nèi)生(ingrowth)不足的限制,從而可以真正用來培養(yǎng)工程組織(engineered tissue),使之用于藥物、醫(yī)學(xué)研究及再生醫(yī)學(xué)、細(xì)胞療法。
Equl-3DB將細(xì)胞研究帶入更多元化、更進(jìn)一步的領(lǐng)域,應(yīng)用范圍十分廣泛,無論學(xué)術(shù)研究或臨床研究上都有相當(dāng)?shù)膽?yīng)用價(jià)值。無論是培養(yǎng)人體組織以進(jìn)行治療藥物的研究,或是培養(yǎng)替代的組織,進(jìn)行再生醫(yī)學(xué)及細(xì)胞治療,例如肝臟、皮膚、骨髓、軟骨、心肌、肺或其他組織等,均提供了最佳的研究系統(tǒng),以達(dá)到最接近體內(nèi)環(huán)境的條件。科學(xué)家更可利用此系統(tǒng)進(jìn)行腫瘤細(xì)胞、病毒或其他可生產(chǎn)蛋白質(zhì)、酵素、荷爾蒙、抗原或抗體等重要物質(zhì)的細(xì)胞的培養(yǎng)。Equl-3DB這樣的系統(tǒng)還提供了ex vivo培養(yǎng)環(huán)境,研究者可利用Equl-3DB以探討微環(huán)境因子,對(duì)細(xì)胞分化和功能的影響。Equl的三維細(xì)胞組織培養(yǎng)系統(tǒng)在國外為世界頂尖生物制藥公司、大學(xué)、研究機(jī)構(gòu)廣泛采用.
1.【Equl-3DB™的機(jī)制和優(yōu)勢(shì)】
相比動(dòng)態(tài)和靜態(tài)組織培養(yǎng)系統(tǒng),Equl-3DB的主要優(yōu)勢(shì)是其能提供理想的環(huán)境,從而允許細(xì)胞聚集、3維生長(zhǎng)和分化。這個(gè)優(yōu)勢(shì)使得我們的培養(yǎng)環(huán)境非常接近于體內(nèi)。
在大多數(shù)的動(dòng)態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)中細(xì)胞/組織會(huì)受損,這主要是其與推進(jìn)器接觸而致。那么它為何會(huì)與推進(jìn)器接觸呢?因?yàn)閼腋。菓腋∈侨绾萎a(chǎn)生的?這歸因于以下2個(gè)力:1.受到推進(jìn)器產(chǎn)生的力;2.在培養(yǎng)的氧交換和懸浮過程中噴出的氣泡所產(chǎn)生的剪切力。
在靜態(tài)的平面培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿中,2維的環(huán)境和塑料基質(zhì)會(huì)改變基因表達(dá)和阻止分化。
相比之下,在Equl-3DB™中生長(zhǎng)的細(xì)胞/組織因隨機(jī)變化的重力矢量而懸浮,從而在培養(yǎng)液中成連續(xù)的自由落體狀態(tài)。一個(gè)較好的比喻是:細(xì)胞從無限高的充滿液體的管中落下。組織在培養(yǎng)液中會(huì)落下、翻滾和混合,受不到任何主宰生長(zhǎng)方向的單個(gè)重力矢量的影響;組織會(huì)向各個(gè)方向生長(zhǎng)。這就是Equl-3DB™的機(jī)制。
由于系統(tǒng)無推進(jìn)器、空氣升液器、氣泡或攪拌器,使破壞性應(yīng)力減到最小。因維持在一個(gè)理想的流體軌道中,故細(xì)胞能共同生長(zhǎng)、互相交流和形成3維的結(jié)構(gòu)。
此外,Equl-3DB™是目前唯一的能使研究者進(jìn)行共同培養(yǎng),而這種培養(yǎng)能提供本能的分化、高細(xì)胞增殖、低的細(xì)胞死亡率和增加細(xì)胞產(chǎn)物的分泌。
總之,Equl-3DB™的培養(yǎng)容器中充滿了用作培養(yǎng)基的生長(zhǎng)液以及細(xì)胞或組織材料。整個(gè)容器由電機(jī)驅(qū)動(dòng)沿水平軸旋轉(zhuǎn)。細(xì)胞顆粒在水平軸內(nèi)建立均質(zhì)的液體懸浮軌道。培養(yǎng)基以及細(xì)胞顆粒隨容器一起旋轉(zhuǎn)且不與容器壁和它物相撞。由于系統(tǒng)無推進(jìn)器、空氣升液器、氣泡或攪拌器,使破壞性應(yīng)力減到最小。Equl-3DB中的細(xì)胞通過膜式氣體交換器來吸氧和排出CO2。任何氣泡都被清除,以防其旋渦對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)的影響。無破壞應(yīng)力使生成的三維組織具有與父系相同的結(jié)構(gòu)和功能。其組織的培養(yǎng)密度為10E10至10E11個(gè)細(xì)胞/ml;細(xì)胞的培養(yǎng)密度為10E7。至今所有的細(xì)胞組織都能培養(yǎng)。
Equl-3DB™具有普通培養(yǎng)裝置無可比擬的三大特點(diǎn):
(1) 高分化度: Equl-3DB使高分化的人體組織能在實(shí)驗(yàn)室中生長(zhǎng),模仿感興趣的器官和腫瘤。
(2) 模擬微重力: 以前要在體外模擬正常組織的微環(huán)境因細(xì)胞外基質(zhì)太復(fù)雜和難適應(yīng)環(huán)境而受阻,而細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)于調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架和細(xì)胞核基質(zhì)蛋白非常重要。Equl-3DB使分裂原本應(yīng)在一起的細(xì)胞組織成分的重力問題得到解決。
(3) 三維細(xì)胞培養(yǎng): 而普通生物反應(yīng)器因要保持細(xì)胞的懸浮而產(chǎn)生剪切力。其破壞了細(xì)胞間和細(xì)胞與基質(zhì)間的穩(wěn)定,使組織和細(xì)胞集中于自身的修復(fù), 而大大影響其生長(zhǎng)和其它的正常生理功能。發(fā)孝罐主要培養(yǎng)大量細(xì)菌, 不適于大量培養(yǎng)人及其它哺乳動(dòng)物細(xì)胞組織,因很難把大量的細(xì)胞移植到發(fā)孝罐中, 即使能夠培養(yǎng), 所得的細(xì)胞數(shù)也有限且很難生成組織。而Equl-3DB行且可用于大規(guī)模生產(chǎn),其細(xì)胞的成活率平均為97%且分化度極高。
2.【Equl-3DB™的應(yīng)用】
(在模擬的微重力環(huán)境下,細(xì)胞/組織的三維高分化的培養(yǎng)技術(shù)已進(jìn)入臨床和生產(chǎn))
組織移植:例如Equl-3DB培養(yǎng)的肝組織和自然的在整體上無區(qū)別,使局部組織移植成為可能。
疫苗生產(chǎn):以前丙肝疫苗效果不佳的原因之一是用來產(chǎn)生這種疫苗的病毒并不長(zhǎng)在人的肝臟中,現(xiàn)在Equl-3DB培養(yǎng)的肝使產(chǎn)生肝炎疫苗的病毒生長(zhǎng)在人的肝臟成為現(xiàn)實(shí)。Equl-3DB在美國已廣泛用于生產(chǎn)。
軟骨再生:經(jīng)培養(yǎng)的軟骨密度極高,可治療關(guān)節(jié)損傷。
激素、酶和其它由人體組織產(chǎn)生的蛋白以及基因工程:經(jīng)培養(yǎng)的高分化的人體組織,其被刺激后能分泌治療用的蛋白。例如經(jīng)培養(yǎng)的神經(jīng)組織產(chǎn)生的神經(jīng)生長(zhǎng)激素能修復(fù)脊椎的損傷。
骨髓再生:培養(yǎng)的骨髓生長(zhǎng)情況極佳,且可連續(xù)進(jìn)行增生和低溫冷凍保藏,可建大型骨髓庫。
糖尿病:胰島素培養(yǎng)后能插入體內(nèi)繼續(xù)生長(zhǎng),無數(shù)患者有望免去長(zhǎng)期注射胰島素。
有效殺滅腫瘤:對(duì)腫瘤組織活體取樣,與自身的白細(xì)胞或淋巴細(xì)胞在Equl-3DB中混合培養(yǎng),刺激或馴化它們來識(shí)別和攻擊腫瘤組織,然后把經(jīng)馴化后有殺傷力的細(xì)胞直接注入病灶。這樣,這些經(jīng)感化的淋巴細(xì)胞徹底殺滅了腫瘤。
腫瘤、愛滋病、腎病和心臟病的理想模型:培養(yǎng)人的器官、腺體和淋巴結(jié)。然后感染這些類器官,再跟蹤其生長(zhǎng)。把藥物用在被感染的經(jīng)培養(yǎng)的組織模型上,研究其對(duì)抗疾病的效果及其對(duì)抗方式。例如腫瘤組織的培養(yǎng)有利于測(cè)試化療藥在病人自身的經(jīng)培養(yǎng)和分化的腫瘤上的療效,避免了用藥的盲目性。以前這是在鼠的組織模型上進(jìn)行的,但物種差異使許多腫瘤在鼠中的生長(zhǎng)情況并不好。而在Equl-3DB中,所有的腫瘤組織都完好生長(zhǎng),且避免了原先鼠蛋白的干擾。
替代動(dòng)物實(shí)驗(yàn),體外毒理試驗(yàn),藥物研究和生產(chǎn): 用動(dòng)物作藥物研究是一個(gè)周期比較長(zhǎng),穩(wěn)定性比較差的選擇,而且異源性也給我們所研究的結(jié)果帶來了很多預(yù)想不到的后果。Equ-3DB所培養(yǎng)的組織具有愿器官的類似功能,如:培養(yǎng)的肝臟組織同樣具有分泌膽汁和部分藥物代謝的功能。可以助您早日成功的研究出質(zhì)優(yōu)的藥物。現(xiàn)在不能培養(yǎng)的norovirus諾羅病毒,通過我們的3DB就可以很好的培養(yǎng)出來。那么該產(chǎn)品的藥物也會(huì)隨之而出,這樣會(huì)贏得全世界的藥物市場(chǎng)。
皮膚移植:經(jīng)培養(yǎng)的皮膚具有極高分化度避免了以前培養(yǎng)的皮膚在肌理、靈巧度和膚色的不足。
3.【各種培養(yǎng)系統(tǒng)的對(duì)比】
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剪切力 |
物質(zhì)傳遞 |
維數(shù) |
異類細(xì)胞的共同培養(yǎng) |
細(xì)胞密度(細(xì)胞/ml) |
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靜態(tài)培養(yǎng) (T型燒瓶) |
無 |
準(zhǔn)二維 |
3至4層的二維 |
有限 |
0.3 - 1x106 |
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靜態(tài)基質(zhì)培養(yǎng) |
無 |
有限的三維 |
有限的三維 |
有限 |
低 |
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轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng) |
中 |
好的二維 |
3至4層的二維 |
極有限 |
1 - 5x106 |
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攪拌懸浮培養(yǎng) |
中/高 |
好 |
極有限的三維 |
極有限 |
106 - 107 |
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空氣升液培養(yǎng) |
中/低 |
好 |
極有限的三維 |
極有限 |
106 - 107 |
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空心纖維灌注培養(yǎng) |
無 |
好 |
有限的三維 |
有限 |
107 |
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Equl-3DB培養(yǎng) (生物反應(yīng)器) |
極低 |
極佳 |
出色的三維 |
極佳 |
107 |
世界最新的生物反應(yīng)器:3D細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)(以下簡(jiǎn)稱Equl-3DB)是目前世界上培養(yǎng)貼壁和懸浮細(xì)胞的最新的裝置。
1.大量培養(yǎng)細(xì)胞的意義
動(dòng)物和人的細(xì)胞可以合成有重要價(jià)值的蛋白質(zhì)(例如干擾素、單克隆抗體等等),在科研、臨床和商業(yè)上都有重大價(jià)值。要制備干擾素、單抗、尿激酶等,就需要大量培養(yǎng)哺乳動(dòng)物的細(xì)胞、人的雜交瘤骨髓瘤細(xì)胞、人的腎細(xì)胞等等。雖然工業(yè)微生物技術(shù)已發(fā)展很完善,但是它主要是用于培養(yǎng)細(xì)菌類的細(xì)胞,它們有堅(jiān)韌的細(xì)胞壁,對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求較簡(jiǎn)單。而哺乳類細(xì)胞則大而脆弱,對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要求高,不能游離生活,大多數(shù)要附著在某種表面才能生長(zhǎng)。要大量培養(yǎng)哺乳類細(xì)胞是個(gè)困難的任務(wù)。
2.大量培養(yǎng)細(xì)胞的方法
小的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,瓶底面積很小,只能培養(yǎng)很少細(xì)胞,要不斷分瓶,得用許多長(zhǎng)的瓶子不斷滾動(dòng)來獲得較多的細(xì)胞。后來,人們又采取高密度培養(yǎng)方法,以求在一定的容積內(nèi)能培養(yǎng)更多的細(xì)胞。對(duì)于要求附著生長(zhǎng)的細(xì)胞,為提高表面積/體積的比值,用空心纖維和微載體作為附著物,可以大大提高培養(yǎng)容積的利用率。微珠作為載體,是提高培養(yǎng)密度的有效方法,細(xì)胞可以生長(zhǎng)在微珠的表面,微載體法,可使在同樣容積內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)增加幾個(gè)量級(jí)。隨著細(xì)胞的生長(zhǎng),附近的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)逐漸減少,廢物逐漸增多,為了使生長(zhǎng)的細(xì)胞不斷接觸到營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并離開廢物,微珠能在培養(yǎng)介質(zhì)中分散和懸浮,并且不斷供應(yīng)培養(yǎng)液,不斷排出廢液。
3.適用范圍
生物制藥中進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。
鄧先生 (58.49.103.46)
在美國用過,很好的一個(gè)東西。
2009-12-25 12:34:00