MicroRotofor 微型電泳槽是一種制備型等電聚焦(IEF)儀,它可以將溶液中的復雜蛋白樣品按等電點不同分開。無論是單獨使用還是做為完整蛋白純化流程的一部分,MicroRotofor微型電泳槽都可以簡單、快速、有效地將蛋白從復雜的蛋白混和物中分離和富集出來。使用MicroRotofor 微型電泳槽,等電聚焦(IEF)是在可自由流動的溶液中進行的。因此,每一個組分都可以非常容易地收集得到,甚至可將某些組分再進行分離。液相IEF對于分離那些在凝膠IEF介質中易于沉淀或分離不好的蛋白更有效。而且,在溶液中進行IEF能夠讓蛋白保持其天然等電點(pI)。最后,因為IEF的pH梯度是通過載體兩性電解質產生的,所以用戶可以隨心所欲地造成任意連續的pH梯度,從而真正通過pI值篩選蛋白樣品。
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特點 |
優勢 |
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設計 |
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小量蛋白溶液體積 |
- 容許研究者分析非常有限的蛋白樣品
- 可以自主優化分離流程
- 與其他蛋白分離溶液兼容 (例如 Aurum 血清蛋白小型試劑盒, ReadyPrep 雙向電泳凈化試劑盒)
- 使用Rotofor 和小型 Rotofor電泳槽分離的組分可以用來再次分離
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易于安裝 |
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10個組分(200–250 µl/組分) |
- 完全、徹底地從樣品中篩選蛋白
- 富集特定蛋白濃度可達10倍
- 如果只需較少組分,可將組分合并
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內置Peltier半導體冷卻: (2 檔:-20°C或-10°C) |
- 聚焦時保持恒溫將提高重復性
- 防止蛋白質水解和胺甲酰化
- 可實現蛋白質天然狀態下分離 (保持蛋白的天然構向和功能)
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緊湊的外形 |
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技術 |
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液體分離介質 |
- 可分離在其它介質中難溶的蛋白 (例如疏水蛋白、膜蛋白、大分子量蛋白等)
- 易于配合其它的分離方案
- 可實現蛋白質天然狀態下分離
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膜核心 |
- 在收集蛋白時可防止組分間液體相互流動,從而使組分更穩定
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連續pH梯度/建立特定pH值 |
- 可通過等電點篩選蛋白
- 可分辨異構體
- 靈活性 — 可根據不同pH梯度
- 可與窄范圍和微小范圍的IPG膠條的結果相匹配
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真空收集 |
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一次性使用的分離腔 |
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可旋轉腔體 |
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1D MicroRotofor操作圖示:
實驗結果1:
實驗結果2:
在蛋白組學研究中,經典的雙向凝膠電泳法(2-DE)對堿性蛋白及低豐度蛋白的分離存在技術障礙,但預分離技術的應用可彌補其缺陷。液相等電聚焦可有效地分離富集復雜蛋白樣品。堿性膠條用于2-DE可極大地提高蛋白上樣量和凝膠分辨率。將上述兩種技術相結合用于堿性蛋白質和低豐度蛋白質的分離鑒定,可使堿端區域雙向凝膠圖譜質量顯著提高,蛋白點更清晰且點數增多,質譜鑒定確信度提高,堿性蛋白和低豐度蛋白質譜鑒定成功率提高,對于蛋白組學研究具有一定的意義。
—— 某著名蛋白質組學研究專家
相關鏈接:
液相等電聚焦大顯神威:
http://www.biosou.com/index_newshow.php?newsid=13257
用液相等電聚焦電泳純化藻藍蛋白亞基:
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFD2006-GDXH200606015.htm
液相等電聚焦結合雙向凝膠電泳分離堿性蛋白:
http://www.ilib.cn/A-gdxxhxxb200610009.html
人胃癌組織中分子伴侶蛋白的表達及檢測:
http://www.wjgnet.com/1009-3079/13/1809.asp
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