LVV體內遞送平臺技術格局、策略優劣勢和市場定位分析

文章來源公眾號：VTALK       作者：VTALK

第 1 部分：技術格局分析
1.1平臺對比矩陣

注：update to 2025。 

Kelonia Therapeutics 正在開發一種創新的體內基因編輯系統 （iGPS） 平臺，用于直接在患者體內生成 CAR-T 細胞。 iGPS 平臺是通過復雜的病毒載體工程開發的：
·去靶向天然受體：對 VSV-G（水皰性口炎病毒糖蛋白）包膜進行修飾，以消除與其天然受體 LDL-R（低密度脂蛋白受體）的結合 
·T 細胞特異性靶向：摻入抗 CD3 單鏈可變片段 （scFv） 以為 T 細胞提供特異性趨向性 
·優化過程：篩選了多個 VSV-G 變體，以確定那些：
·最佳抑制 LDL-R 結合
·保持有效的 T 細胞轉導能力

1.2 技術準備評估
·臨床驗證：ESO-T01 （BCMA） —  《柳葉刀》上第一個經過同行評審的體內 CAR-T 病例系列 （RRMM）;ENaBL顆粒設計（MHC-I–/CD47+/TCRαβ VHH;T細胞特異性啟動子）在臨床補充劑中公開。

·臨床（I 期活性/啟動）階段：Umoja （CD19+RACR） 和 Interius （INT2104，CD7 靶向抗 CD20）——均已進入人體臨床研究。Kite 宣布有意收購 Interius; 艾伯維選擇了 Umoja 的 UB-VV111進行開發合作，UB-VV111于日前獲得FDA的FTD（fast track designation）。 

·臨床前階段：Sana — 具有 NHP 特異性的 CD8 靶向副粘病毒融合體系統(Paramyxoviral)，與早期構建的fusogen相比，滴度更高，能夠減少劑量; Kelonia — 初步展現的 NHP 藥理數據和計劃于 2025 年公布的去靶向 VSV-G CD3 管線。 

·早期臨床前：Exuma、Ensoma （VLP 多譜系體內工程）和其他進入者。 

第二部分：策略優劣勢分析
2.1 靶向策略分析（CD3、CD4、CD8、CD7、TCRαβ）
·CD3
o優點： 廣泛的泛-T攝取（CD4/CD8），強大的激活協同作用（例如，Umoja的CD3 + CD80 / CD58 APC模擬物）;在臨床前/大型動物環境中的穩健轉導。 
o缺點： 如果激活太強，更廣泛的趨向性會增加細胞因子激增的風險;如果沒有護欄，則有可能轉導 T 細胞腫瘤中的惡性 T 細胞。
o治療指標： 有利于快速 T 細胞擴增;使用 VivoVec 觀察到循環 T 細胞的 NHP 峰值高達 ~65% CAR-T。 
o定位： 較多玩家的競爭（Umoja、Kelonia、Genocury、Exuma）——通過APC 模擬與隱身功能和安全導軌進行區分。

·CD4
o優點： 輔助性 T 細胞偏倚;在某些情況下可以避免惡性 CD8+ 克隆的轉導。
o缺點：CD4+ T 細胞惡性腫瘤的風險;輔助偏倚可能會降低直接細胞毒性分數。
o證據： 副粘病毒 NiV 重定向框架允許在臨床前工作中進行 CD4 特異性轉導。 

·CD8
o優點：選擇性遞送至細胞毒性T細胞;Sana CD8 fusogen的臨床前/NHP數據顯示出很強的特異性和淋巴器官靶向性;可避免在T細胞惡性腫瘤中將CAR遞送至CD4+惡性細胞。
o缺點：無輔助T細胞支持，可能需要共同刺激或細胞因子支持才能持續存在。
o定位： 對B細胞癌具有很強的擬合性，具有安全優勢;利用副粘病毒 pH值不依賴的 進入優勢（第2.2節）。

·CD7
o優點：廣泛的 T/NK 覆蓋范圍 （Interius），支持多效應器 CAR 種群。去靶向的 VSV-G 變體 （Gen2.1） 增強持久性并減少意外的 LDLR 結合。 
o缺點： 正常 T/NK 中 CD7 抗原表達增加了復雜性;離體潛在的自相殘殺（When a CAR targets a T-cell antigen (e.g., CD7, CD5, TRBC1/2), engineered T cells kill themselves or each other during manufacturing because they express the same antigen they’re meant to attack. Result: poor cell yields, unstable products, or the need for edits/PEBLs/knockdowns to remove）不適用于此，但生物學仍然相關;需要仔細的安全門控。

·TCRαβ（恒定區）
o優點： 靶向常規 αβ T 細胞，無論子集如何;與 MHC-I–/CD47+ 隱形涂層和 T 細胞特異性 啟動子 （ESO-T01） 配對以限制非 T 表達。 
o缺點： Pan-T 與 CD3 一樣到達;在很大程度上依賴 啟動子特異性和 包膜隱蔽性來防止脫靶轉導和先天清除。
o臨床信號：通過該設計實現的第一個經過同行評審的人體療效/安全性信號 （Esobiotech）（RRMM）。

2.2 Fusogen進入機制（pH 依賴性 VSV 譜系與 pH 依賴性副粘病毒）
·特異性和脫靶
o副粘病毒（NiV/麻疹衍生）：質膜融合與受體結合偶聯，→體內  VSV-G 家族可見的更高的靶向特異性和減少的非特異性內體攝取。
oVSV 譜系（VSV-G / cocal 變體）： 高滴度和成熟的 GMP，但 pH 依賴性 內體融合可以允許 非特異性攝取; 緩解措施包括 去靶向 VSV-G（通過引入多個具有氨基酸取代的 VSV-G 變體，例如 Interius Gen2.1）和血清耐藥 cocal（Umoja Biopharma 的 VivoVec 平臺 使用 Cocal 病毒融合糖蛋白 而不是傳統的包膜蛋白）。

·CMC挑戰
oVSV 譜系：通常滴度最高，規模穩健，純化成熟;有吸引力的 COG。 
o副粘病毒：歷史上較低的滴度;Sana 報告稱，滴度/工藝進步 50×，可在保持特異性的同時減少劑量。 

·臨床應用特征
oVSV 系列現在利用對  GMP 的熟悉度，有多個已經進入臨床開發階段的LVV in vivo CAR T產品（Umoja、Interius）。 
o副粘病毒 CD8 fusogen 平臺具有 NHP 特異性和生物分布優勢（報告肝臟信號降低），支持進一步開發。 

·創新潛力
o副粘病毒系統對于受體重定向具有高度模塊化;VSV 譜系可以去靶向工程化處理（Kelonia、Interius）結合。 

2.3 多功能Envelop工程
·APC 模擬 （Umoja）：載體顯示抗 CD3 + CD80/CD58，在一個顆粒中提供結合 + 激活 + 轉導 — 加速 T 細胞原位啟動，但提出了細胞因子管理考慮因素。 
·免疫隱身（EsoBiotec）：MHC-I-包膜加CD47逃避吞噬作用，降低清除率/先天攝取;與T細胞特異性啟動子配對抑制非T表達。 
·多譜系（Ensoma VLP）： 靶向 CD46 的 VLP 旨在 HSC 產生多譜系效應子;CAR-T 處于早期階段，但有可能擴展到 T 細胞之外。 
權衡：增加的envelope功能增加了 CMC 的復雜性（分析、一致性），而不是明顯的治療益處（快速激活與隱身和持久性）。Umoja 和 EsoBiotec 說明了不同的、可防御的護城河（APC 模擬與隱形啟動子+CD47）。

2.4 脫靶效應減少策略
ü受體靶向fusogen/binding domain（CD8/CD3/CD7/TCRαβ） —  特異性的主要驅動因素。 
ü副粘病毒進入（受體偶聯，非pH依賴），以避免  VSV-G 出現的內體非特異性攝取。
ü去靶向的 VSV-G + 結合劑 （Kelonia、Interius）可減少天然 LDLR 結合;保留強滴度。 
ü包膜上的 CD47 （和 MHC-I 減少）以減少 吞噬作用匯 和先天攝取（ESO-T01;也普遍用于 LV）。 
üT 細胞特異性啟動子（以及 2025 年摘要報告中的新型合成啟動子）以最大限度地減少  整合后的非 T 表達。
ü防止載體顆粒上的 CAR 殘留 （VSV-G 的主要脫靶風險）：2025 年“第四代”LVV基因組 + TRiP + 2KO 消除了顆粒中可檢測的 CAR ，并減少了異常的 vRNA 剪接。 

üCAR 殘留是指在制造過程中慢病毒 （LV） 顆粒上/中意外存在 CAR 蛋白（和/或編碼 CAR 的剪接病毒 RNA）。當這些顆粒用 VSV-G 進行假分型時，病毒粒子表面的 CAR 可以將其抗原結合在非 T 細胞上并重新靶向載體，從而驅動脫靶轉導，而不受預期的融合原趨向性的影響。這種現象已被明確標記為 VSV-G 系統的安全風險：CAR 蛋白可以在 LV 生產過程中摻入載體顆粒中，并且當與 VSV-G 融合劑結合時，已被證明可以驅動脫靶轉導。

ü重要性：向攜帶抗原的旁觀者細胞（例如 B 細胞、髓系細胞或腫瘤組織）脫靶遞送會產生可避免的插入風險，并可能混淆生物分布、效力和安全性讀數。pH 依賴性內體進入途徑（VSV-G 譜系）已經容易發生非特異性攝取;在顆粒上添加 CAR 會進一步破壞特異性。

ü2025年“第四代”修復：2KO+TRiP（帶TRAP/tbs）：
ü2KO 基因組：第四代LVV基因組 （SupA2KO-LV），可滅活 MSD 驅動的剪接，消除那些編碼 CAR 的剪接 vRNA。 

üTRiP系統：將TRAP結合序列（tbs）插入CAR 5′ UTR（與Kozak / ATG重疊）并在  生產者系中表達TRAP;TRAP 結合結核病并抑制生產細胞中的 CAR 翻譯，防止 CAR 蛋白出現在生產者膜上（從而出現在出芽顆粒上）。

ü使用該第四代構建物重靶 NiV-糖蛋白 LV（pH 不依賴入口）顯示出更高的 T 細胞特異性， 并 避免了 VSV-G 載體在體內看到的脫靶信號（例如，骨髓/肝臟攝取）。

·藥物聯合治療：目標：在LVV給藥時瞬時提高靶向轉導和安全性，而不影響以后的CAR-T擴增/功能。

ü兩個互補boost：
l雷帕霉素（mTORC1 抑制劑）→改善  T 細胞內的載體進入/運輸。
l達沙替尼 （Src/Lck 酪氨酸激酶抑制劑）→ 抑制 TCR 信號傳導，阻止 CD3 內化，減少急性細胞因子釋放，并可以暫時“暫停”CAR 活性。

第 3 部分：競爭格局和市場定位
3.1 臨床證據層次結構
一.ESO-T01 / AZ — 第一個經過同行評審的 MM 臨床 PoC;設計包括 MHC-I–/CD47+ 包膜和 T 細胞特異性啟動子。 
二.遺傳學 — 使用VZV-G逆轉錄病毒載體和抗CD3結合劑的IIT首次患者報告（iit first-patients report， DLBCL  ）;PR → CR 更新 3 個月。
三.Umoja — I 期活性 （CD19+RACR）;強大的 NHP 經驗;艾伯維選項驗證。 
四.Interius （Kite） — CD7 靶向 LV + 改良 VSV-G 的 I 期;Kite 的收購表明對平臺的信念。 
五.Kelonia — 晚期臨床前，NHP B 細胞耗竭強勁，濃度為 10^8 vp/kg，毒性低; IND 就。
六.Sana — 具有 NHP CD8 靶向和特異性生物分布的高級臨床前; 制造效率提高。 
七.Ensoma/Exuma — 早期臨床前（分別為VLP和CD3-LV）。 

3.2 適應癥策略擬合度
·血液系統惡性腫瘤（B 細胞）：跨平臺最強擬合; CD19/22，由 NHP 和早期臨床信號（Umoja、Interius、Kelonia、ESO-T01）支持的 BCMA  靶點。
·T細胞惡性腫瘤：CD8靶向 方法有助于避免轉導惡性CD4細胞;存在臨床前支持。 
·實體瘤： 早期（Ensoma 抗 HER2 VLP 臨床前）;TME 障礙仍然存在;可能需要裝甲/連擊。 
·自身免疫： 興趣日益濃厚（例如，自身免疫的Interius路線圖）;安全標準高;啟動子/包膜特異性至關重要。 

3.3 未滿足的需求和空白
·VSV 譜系系統的穩健脫靶硬化（脫靶向之外）→采用 TRiP/2KO 基因組和啟動子對照。 
·肝臟和巨噬細胞 → CD47 和抗吞噬涂層;進一步的生物分布調整。 
·用于適應癥定制的子集選擇性遞送（CD8 與 CD3/CD7）; 雙靶點有效載荷以減輕抗原逃逸。
·實體瘤鎧甲裝配和 組合 策略（檢查點/趨化因子）仍處于早期體內形式。

第 4 部分：關鍵挑戰和風險評估
4.1 安全
·CRS/ICANS： 激活前向包膜 （APC-mimic） 需要仔細劑量和托珠單抗/標準措施（見于 NHP）。 
·插入誘變： 根據綜合 LV 標準（監管預期）進行長期隨訪。
·長期的靶向效應： CD19/BCMA 計劃預計會出現 B 細胞發育不全（根據需要使用 Ig 替代療法進行管理）。
·免疫原性和再給藥： 包膜/結合劑免疫原性和抗載體免疫需求計劃（副粘病毒與 VSV 譜系貿易）。

4.2 功效
·轉導變異性：副粘病毒受體偶聯進入提高了 特異性; 混合包膜 NiV（75% 重靶向 + 25% 非靶向）可提高 T 細胞進入和效率。 
·擴展和持久性： VivoVec 在 NHP 中顯示出強勁的峰值和二次擴展;RACR 提供藥物控制。 
·抗原逃逸： 考慮LVV cargo中的早期雙抗原（例如 CD19+CD22）設計。
·TME（實體瘤）： 挑戰較大

4.3 制造與可擴展性
·滴度/產量： VSV 譜系最高;副粘病毒滴度 改善 （Sana）。 
·血清穩定性和配方：Cocal 涂層支持直接輸液; 隱身 功能。 
·GMP 復雜性： 多域包絡和工程生產線 （ENaBL-TT） 增加了分析/控制需求。 
·規模：Umoja已經進行規模化生產的準備，從自體細胞治療到真正現貨型治療是質的飛躍