M2點樣儀助力沙門氏菌血清分型檢測

瀏覽次數：1007　發布日期：2025-2-20　來源：本站　僅供參考，謝絕轉載，否則責任自負

沙門氏菌是一種能引起食源性疾病的細菌，廣泛存在于各種食物、水、土壤以及動物糞便中。世界范圍內每年患病人數約9500萬例，癥狀表現為腹瀉、發燒、腹部痙攣和嘔吐等，嚴重可導致脫水性敗血癥甚至死亡。其血清亞型超過2500種，分型通常與宿主或地理位置有關，傳統的凝集法不僅需要有豐富的技術經驗，消耗大量的試劑和樣品，檢測周期也較長。相比之下，蛋白微陣列法（蛋白芯片檢測技術）快速、特異性強、操作簡單，同時不受限于數據庫。另外，利用不同的特異性抗體檢測多種抗原血清，可在一次實驗中分析多種病原體。

2024年4月，來自德國萊布尼茨光子技術研究所和耶拿大學感染診斷學研究中心的Ralf Ehricht教授團隊，在Pathogens雜志上發表了一篇題目為“A Proof-of-Concept Protein Microarray-Based Approach for Serotyping of Salmonella enterica Strains”的文章。基于蛋白微陣列（蛋白芯片檢測技術）對腸道沙門氏菌進行血清分型。

該團隊收集10種沙門氏菌免疫血清，并用緩沖液分別稀釋6、8、10和20倍，大腸桿菌和 PBS 緩沖液為陰性對照，德國M2-Automation生物芯片點樣儀以17 × 17微陣列點樣到96孔板（孔內底部功能化處理），每種樣品重復點印至少四次（單孔內4個重復），點間距0.22 mm，靜置偶聯10分鐘后，制備成微孔板蛋白芯片（如圖1）。

圖1:腸道沙門氏菌亞群蛋白微陣列芯片
（左圖：10種沙門氏菌免疫血清1:6/1:8/1:10/1:20稀釋后的點樣陣列排布，4個重復陣列；右圖：單孔內陣列示意圖）

隨后將32種不同的腸道鏈球菌亞型和1種邦戈沙門氏菌的菌株細胞，大腸桿菌細胞、PBS緩沖液分別加到微孔板蛋白芯片上，用HRP標記的抗沙門氏菌多克隆抗體雜交，繼而加入TMB（四甲基聯苯胺）底物顯色進行斑點檢測和數據分析（如圖2）。

圖2：基因分型檢測示意圖：沙門氏菌O或H抗原與特異性免疫血清結合，被酶標捕獲抗體捕獲，最后使用TMB（四甲基聯苯胺）底物催化顯色，進行信號檢測。

結果：基于微陣列的斑點檢測和數據分析，結合所有點樣血清類型，顯示出血清分型的高度準確性和特異性（如圖3）

圖3: 基因分型的結果分析（準確度、靈敏度、特異性、陽性預測值、陰性預測值）

微陣列檢測具有足夠的靈敏性和特異性，可有效用于血清分型或菌株篩選，是一種極具前景的快速檢測手段和方法。

原文鏈接：https://doi.org/10.3390/ pathogens13050355

M2-Automation成立于2003年，總部位于德國柏林，是一家創新技術開發公司，專注于微量/超微量、非接觸式自動化移液和生物芯片點樣技術。儀器準確性、精確性高，重復性好，全程自動化點樣，同時可根據客戶需求進行定制。