小鼠胚胎成骨細胞前體細胞（MC3T3-E1）怎么養(yǎng)

Tips：
1、細胞經(jīng)過運輸后，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。貼壁細胞  可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900-1000rpm(約 150g)離心 3min，棄上清。加5mlPBS 重懸細胞，再 900-1000rpm(約 150g)離心 3min，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次 PBS 重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略 PBS 重懸的步驟；如果碎片很多，建議 PBS 多洗幾次。

2、細胞生長不均時，可以將細胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代。

3、細胞生長緩慢時，可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)（最高不超過 20%），也可以根據(jù)細胞生長狀態(tài)， 選擇傳代細胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

4、不同細胞貼壁性差異比較大，所以消化時間差別較大，20s-10min  均有可能，具體以細胞消化到相互分離但未脫落，并可以輕輕吹下為準，嚴禁消化到細胞完全漂浮。客戶消化過度導(dǎo)致細胞   死亡、漂浮、生長緩慢， 不提供免費售后服務(wù)。

5、干冰發(fā)貨均為兩支，客戶先復(fù)蘇一支，若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若 客戶同時復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳， 我方不提供免費售后服務(wù)。

6、細胞狀態(tài)正常時，應(yīng)盡快凍存細胞保種，凍存后應(yīng)隨機抽取一支檢測凍存效果。我方不對客戶 凍存細胞導(dǎo)致死亡負責(zé)， 客戶凍存細胞死亡不提供免費售后服務(wù)。

Notice：
    客戶收到細胞有任何疑問請及時致電我們，細胞收到后 1 周內(nèi)沒有任何電話，或其他形式回訪， 默認為細胞質(zhì)量沒問題，之后出了任何問題不給予免費售后。細胞免費售后只提供一次，若重發(fā)后再次培養(yǎng)死亡不再免費補發(fā)，細胞收貨時已經(jīng)死亡或密度不足的除外。