Taq DNA聚合酶（with MgCl2 in Buffer）使用說明書

『注意事項』
1.    長期儲存（非頻繁使用）于-70ºC；每天或每周使用儲存于-20ºC。盡量避免多次凍融，勿暴露在溫度波動較大之處，這些波動對產品的穩定性有一定影響。
2.    建議在100l反應液中，酶的使用量為1~2.5l。過多酶量和過長的延伸時間可能會引起非特異擴增條帶。
3.    為確保實驗結果，建議使用本公司配套緩沖液及相關試劑。
4.    擴增結果與反應體系、Mg2+濃度、引物、循環參數等因素有關。為了減少不必要的優化過程、節省時間和保證試驗結果的穩定可重復，推薦使用本公司的PCR SmartMix。

產品編號：TQ-01/02/03/04

MyLab® Taq DNA聚合酶
（with MgCl2 in Buffer）

使用說明書
『規格』5U/l; 100l; 500U。
『特點』
本制品是分子量為94 kDa的耐熱的DNA聚合酶。是將棲熱水生菌（Thermus aquaticus）DNA Polymerase的基因克隆后，在大腸桿菌中表達后，分離純化而得到的。它與天然的Taq DNA聚合酶有相同的功能。該酶反應需Mg2+參與，它以雙鏈DNA為模板催化核苷酸從5’向3’末端形成雙鏈DNA。該酶不具有5’-3’核酸外切酶的活性。該產品主要用于DNA的PCR擴增，DNA測序等。PCR產物3' 端為A，可用于T/A克隆。在70~75ºC時，DNA聚合的速度每秒大于75個堿基。
『組成』
Taq DNA Polymerase: 500U (5U/l; 200l)
10 PCR Buffer: 1.5ml，組份為：
100 mM Tris-HCl (pH8.7)
500 mM KCl
15 mM MgCl2
0.1%白明膠
其它穩定劑和增強劑
『活性單位』
1單位酶定義為在72ºC、30min內催化10nmol同位素標記的dNTP加入到酸不溶物質所需的酶量。
『保存條件』-20℃保存。
『有效期』12個月。

『質量控制』
1.    Overdigest (OD) 檢測：30U Taq DNA 聚合酶與1g λDNA在72ºC下反應16小時后，用瓊脂糖凝膠電泳未檢出降解的λDNA。
2.    切口酶檢測：30U Taq DNA 聚合酶與超螺旋質粒DNA在72ºC下反應4小時后，用瓊脂糖凝膠電泳未檢出切口酶或線性DNA帶。
3.    熱穩定性檢測：92ºC時，每2.5U Taq DNA 聚合酶在緩沖液中的半衰期長于1小時。
4.    SDS-PAGE檢測純度大于99%以上。
『適用范圍』
常規PCR/反轉錄PCR/熒光定量PCR/DNA測序/平端PCR產物加A等。
『使用方法』
注意：以下舉例多數情況下可參考。實際反應條件因模板、引物等的結構不同而各異，需根據實際情況，設定最佳反應條件。
以人基因組DNA 為模板，擴增1kb的片段，反應體系為25l。
10PCR Buffer              2.5l
Primer 1 (10M)              1l
Primer 2 (10M)              1l
dNTP (10mM)                0.5l
Taq DNA Polymerase        1~2.5U
Template                    1g
ddH2O                      補至25l
如反應體系不同，可按此比例增加或減少用量。混勻后，置于PCR儀中，按設定的程序運行即可。反應結束后取5l反應產物，瓊脂糖凝膠電泳檢測。
本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床治療、食品等用途。