MaxCyte流式電轉儀在急性髓系白血病(AML)通用型CAR-T療法中的優勢
在細胞治療的江湖里，急性髓系白血病（AML）一直是個難啃的硬骨頭。尤其是那些復發或難治（rrAML）的患者，常規化療的路越走越窄，唯一的希望曙光——造血干細胞移植（HSCT），卻偏偏要求患者先進到“完全緩解”狀態。
這就像一個死循環：想活命得上“移植”這艘船，但上船的門票是“緩解”，而你手里的“化療”牌卻打不出這個效果。于是，大家把目光投向了CAR-T，這位在其他血液腫瘤領域戰功赫赫的“細胞殺手”。
01. 理想很豐滿：打造一個“通用”愛情殺手
直接用病人自己的T細胞（自體CAR-T）來對付rrAML，效果一直不理想。原因很簡單，經過多輪化療的“狂轟濫炸”，病人體內的T細胞早已是“疲憊之師”，戰斗力大打折扣。
所以，一個更優的思路是：用健康捐贈者的T細胞，打造一款“即取即用”的通用型CAR-T（異體CAR-T）。這就像從預備役里直接調來一支裝備精良、精力充沛的特種部隊。
但這支“雇傭軍”有兩個致命問題：
(1) 敵我不分（移植物抗宿主病, GvHD）： 它可能會攻擊患者的健康組織，畢竟不是“原裝”的。必須把它原生的T細胞受體（TCR）給敲除，相當于拆掉它的“老家導航系統”，讓它別亂跑。
(2) 被友軍誤傷（免疫排斥）： 患者自身的免疫系統會把這支外來部隊當成入侵者，群起而攻之。必須把它的身份標識——HLA-I類分子給敲除，相當于給它披上一件“隱身衣”，讓患者的“防御系統”看不見它。
好了，藍圖有了：我們需要對健康的T細胞進行一番“魔改”——敲除TCR，敲除HLA-I，再敲入一個能識別AML細胞的CD33-CAR。
02. 現實很骨感：三件事如何一步到位？
要把這么多“改造指令”（兩種用于基因敲除的CRISPR RNP、一種用于敲入的睡美人轉座酶mRNA和一種攜帶CAR基因的慢病毒DNA）一次性、高效地塞進嬌貴的T細胞里，是個巨大的工程挑戰。傳統的病毒載體法，流程復雜、成本高昂、周期漫長，還伴隨著潛在的安全風險。有沒有一種方法，能像按一下開關一樣，把這個“基因改造豪華大禮包”一次性精準投遞到細胞里？
03. MaxCyte登場：從“不可能”到“一鍵搞定”
這正是這份應用報告中，來自納瓦拉大學的研究者們所展示的核心價值。他們使用的 MaxCyte GTx™ 流式電轉染平臺，完美解決了這個“一步投遞”的難題。它用一種非病毒的方式，在一次電擊操作中，同時將兩種CRISPR RNP、睡美人轉座酶mRNA和CD33-CAR轉座子minicircle DNA這四種功能各異的生物大分子，成功導入T細胞。
這頓操作堪稱“快、準、狠”，其價值體現在：
• 簡單高效： 整個基因工程的核心步驟被簡化為一次電轉，大大縮短了制備時間。數據顯示，經過改造，平均能獲得32.4%的CD33-CAR陽性細胞，超過69%的細胞成功實現了雙基因敲除。
• 細胞友好： 這種“物理破門”的方式看似粗暴，實則溫柔。改造后的CAR-T細胞依然保持著旺盛的增殖能力和理想的細胞表型，沒有因為這波“電擊療法”而元氣大傷，戰斗力絲毫不減。
• 功能強大： 無論是體外細胞毒性實驗，還是在小鼠模型中的體內抗腫瘤活性測試，這些“一步到位”的CD33-AlloCART細胞都表現出了與傳統方法制備細胞一致的、強大的腫瘤殺傷效果。
• 無縫放大： 最關鍵的一點是，這項技術具備極佳的 scalability（可擴展性）。無論是2x10⁶細胞的小試規模，還是5x10⁷細胞的臨床相關生產規模，細胞的改造效率、表型和功能都高度一致。這意味著，這項技術從實驗室走向臨床、實現商業化生產的道路是通暢的。最終，5x10⁷的起始細胞可以收獲超過3x10⁸的純化后CAR-T產品。
04. 總結：選擇 MaxCyte，選擇效率
面對rrAML這個頑固的敵人，科學家們設計出了一款精密的“通用型”CAR-T細胞武器。而MaxCyte的電轉染技術，則成為了鍛造這把神兵利器的關鍵“智造平臺”。它用一種非病毒、一步式、可規模化的方法，解決了復雜的細胞工程遞送難題，讓“即取即用”的CAR-T療法離現實更近了一步。
這不僅是對一項技術的驗證，更是為那些在困境中掙扎的AML患者，點亮了一盞新的希望之燈。
* 本文轉載自「拓普百奧」微信公眾號，作者：宇文數學
關于MaxCyte：
MaxCyte成立于1999年，總部位于美國馬里蘭州，是一家全球領先的細胞工程電穿孔技術解決方案提供商。利用其ExPERT™電轉平臺，能夠高效、穩定地實現大規模細胞的工程化處理，滿足從早期研究、臨床開發到商業化生產的全階段細胞轉染需求，廣泛服務于抗體蛋白表達、疫苗開發、基因編輯以及細胞與基因治療等領域。—— 作為MaxCyte中國南區總代，上海昊擴將為您在研發、臨床到商業化生產的不同階段，提供滿足您細胞轉染量需求的專業解決方案與技術支持。
