小鼠腦脊髓炎病毒的生物學(xué)特點(diǎn)和檢測(cè)方法

小鼠腦脊髓炎病毒TMEV的生物學(xué)特點(diǎn)
小鼠腦脊髓炎病毒也稱(chēng)Theiler氏小鼠腦脊髓炎病毒 (Theiler's murine encephalomyelitis virus,TMEV)，其核酸為負(fù)鏈單股RNA，屬于微RNA病毒科，心病毒屬。我國(guó)小鼠群的TMEV感染率較高，報(bào)道稱(chēng)上世紀(jì)90年代普通小鼠群中感染率可達(dá)8~35%。被感染的小鼠多數(shù)呈隱性感染狀態(tài)，一般不表現(xiàn)臨床癥狀。
TMEV病毒主要侵害小鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，有時(shí)表現(xiàn)出腦脊髓炎和后肢麻痹等癥狀。TMEV分為多個(gè)毒株，不同的TMEV毒株的毒力也不同，主要可分為兩類(lèi):
高毒力毒株，可引起急性致命性腦炎，如GDVII株和FA株;
低毒力毒株，可導(dǎo)致單核細(xì)胞浸潤(rùn)和脫髓鞘，如Be An株和DA株，其中脫髓鞘癥狀與人類(lèi)的人多發(fā)性硬化癥(MS)相似，因此TMEV感染是研究MS的重要模型。
TMEV感染不光對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康造成危害，對(duì)科研工作者的健康也造成了威脅和干擾。GB 14922-2022《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 微生物、寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》中TMEV是SPF級(jí)小鼠必要時(shí)需要排除的病毒項(xiàng)目。
 
小鼠腦脊髓炎病毒的檢測(cè)方法
TMEV可采用多種方法進(jìn)行檢測(cè)，如抗體抗原檢測(cè)和分子生物學(xué)核酸檢測(cè)。抗體抗原檢測(cè)包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、免疫熒光試驗(yàn)(IFA)和免疫酶試驗(yàn)(IEA)等。分子核酸檢測(cè)可以進(jìn)行熒光定量RT-PCR多種方法進(jìn)行檢測(cè)。小鼠人為注射感染后腦部組織可較早的感染到核酸，并且持續(xù)多天腦部都可以檢測(cè)到核酸，而其他組織器官的核酸量逐漸消失。TMEV的抗體則出現(xiàn)較晚，對(duì)免疫受損或者免疫缺陷的鼠，則產(chǎn)生抗體較少甚至不產(chǎn)生抗體，無(wú)法進(jìn)行抗體檢測(cè)。血清學(xué)檢測(cè)方法不適用于病毒早期感染的診斷，也不適應(yīng)免疫受損的鼠進(jìn)行檢測(cè)。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)則表現(xiàn)出高精確度,高靈敏性，污染少等優(yōu)點(diǎn)，已成為病毒感染診斷的重要手段。qRT-PCR檢測(cè)方法可作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的有力補(bǔ)充。翼和生物的SPF.M/R-OVH-005檢測(cè)試劑盒，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)TMEV，使用Taqman熒光探針，在HEX或者VIC通道進(jìn)行TMEV病毒檢測(cè)，一個(gè)孔可同時(shí)檢測(cè)TMEV、鼠痘病毒和多瘤病毒。不僅如此，翼和生物的SPF.M/R-OV-001檢測(cè)試劑盒可以同時(shí)檢測(cè)6種選檢病毒。該款試劑盒靈敏度高，特異性強(qiáng)，閉管操作污染少，操作簡(jiǎn)單快捷，是TMEV檢測(cè)的有效手段。