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          DSP空間多組學技術(shù)的常見問題及項目經(jīng)驗總結(jié)

          瀏覽次數(shù):363 發(fā)布日期:2025-9-17  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

          上期我們分享了“空間組學樣本制備指南 | 打造完美切片:DSP技術(shù)樣本處理全攻略
          本期我們將大家常見的問題以及項目經(jīng)驗為大家整理成了FAQ,趁熱打鐵與您分享!

          1、DSP(Digital Spatial Profiling)是一個空間多組學技術(shù),這些組學可以同時檢測嗎?具體包含哪些組學呢?
          答:可以在一張切片同時檢測轉(zhuǎn)錄組和蛋白組。包含哪些具體組學產(chǎn)品見下圖1。

          2、ROI和AOI有什么區(qū)別呢?
          答:在 Digital Spatial Profiling (DSP) 技術(shù)中,ROI(Region of Interest)是指在組織切片上由研究者根據(jù)形態(tài)學特征或標記物選擇的感興趣區(qū)域,是進行空間分子分析的總體框架。

          AOI(Area of Illumination/Analysis)則是 ROI 內(nèi)部進一步定義的分析單元,代表實際進行熒光照射、寡核苷酸釋放及分子信息采集的空間范圍。

          換言之,ROI 是“宏觀選區(qū)”,決定研究的整體區(qū)域;AOI 是“微觀劃分”,決定數(shù)據(jù)獲取的精細尺度。二者的合理結(jié)合可實現(xiàn)從組織結(jié)構(gòu)層面到分子分辨層面的空間多組學解析。(具體可全選圈選模式見下圖2)

          3、DSP成像marker可以自由選擇嗎?
          答:不完全自由,主要受熒光通道的限制。DSP主要包含以下四種熒光通道:

          通道名稱

          典型代表熒光染料或用途

          激發(fā)波長(峰值 ± 帶寬)

          發(fā)射波長(峰值 ± 帶寬)

          說明

          FITC / 525 nm

          Alexa Fluor 488, SYTO 13(DNA 染色)

          480 ± 28 nm

          516 ± 23 nm

          常用于 DNA 染色(如 SYTO 13),無需用 DAPI,否則會損壞條碼

          Cy3 / 568 nm

          AF532, Cy3, PE, TRITC

          538 ± 19 nm

          564 ± 15 nm

          可用于細胞標記與結(jié)構(gòu)識別

          Texas Red / 615 nm

          AF594, Texas Red, DyLight594

          588 ± 19 nm

          623 ± 30 nm

          用于中紅光區(qū)染色標記

          Cy5 / 666 nm

          AF647, Cy5, DyLight650

          645 ± 19 nm

          683 ± 30 nm

          信噪比高,適合低豐度靶點檢測

          4、DSP實際圈選的界面怎么操作?
          答:
          (1)ROI/AOI圈選主界面。



          (2)ROI圈選模式-多種可選

             
          (3)ROI菜單(根據(jù)形狀)
          ROI菜單內(nèi)容:①ROI名稱、坐標及尺寸;②圈選面積&包含核數(shù);③備注等其他信息(可選);④AOI信息(可選);⑤不超過660×770μm

           

          (4)AOI菜單(根據(jù)顏色)
          AOI定義:通道之間的邏輯運算;
          通道閾值是所有ROI通用

           

          (5)渲染設(shè)置內(nèi)容:
          ①Min&Max:明暗度和對比度;
          ②不同樣本或ROI可靈活調(diào)整
          “空間維度+多組學”-高分中標公式!



          本期分享挑選了top問題進行解答,若您對DSP有其他疑問,請隨時聯(lián)系小備~

          注:本文所用圖片均來源于樂備實,版權(quán)歸其所有,請勿擅自挪用。

          樂備實是國內(nèi)專注于提供高質(zhì)量蛋白檢測以及組學分析服務(wù)的實驗服務(wù)專家,自2018年成立以來,樂備實不斷尋求突破,公司的服務(wù)技術(shù)平臺已擴展到單細胞測序、空間多組學、流式檢測、超敏電化學發(fā)光、Luminex多因子檢測、抗體芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫組化、DSP空間多組學等30多個,建立起了一套涵蓋基因、蛋白、細胞以及組織水平實驗的完整檢測體系。

          我們可提供從樣本運輸、儲存管理、樣本制備、樣本檢測到檢測數(shù)據(jù)分析的全流程服務(wù)。憑借嚴格的實驗室管理流程、標準化實驗室操作、原始數(shù)據(jù)儲存體系以及實驗項目管理系統(tǒng),已經(jīng)為超過3000家客戶單位提供服務(wù),年檢測樣本超過100萬,受到了廣大客戶的信任與支持。


          原文點擊:嘿!關(guān)于DSP空間組學的FAQ來嘍~ (干貨分享)

          發(fā)布者:上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司
          聯(lián)系電話:15921930842
          E-mail:yh-wang@univ-bio.com

          標簽: DSP 空間多組學
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