淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒生物學特點和檢測方法

 
淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒生物學特點
 
淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒 (lymphocytic choriomeningitis virus, LCMV) 能夠引起人淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎，這是一種鼠傳的病毒性疾病。
LCMV屬于單股負鏈 RNA 病毒目，沙粒病毒科，沙粒病毒屬病毒，沙粒病毒因為在電鏡下極似沙粒，由此命名為沙粒病毒。1933年發現 LCMV，是沙粒病毒科較早被發現的病毒。沙粒病毒科在病毒學中分為兩類，分別是舊世界病毒和新世界病毒，LCMV屬于沙粒病毒科的舊世界病毒。LCMV分為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型，其中Ⅰ-Ⅲ型與人類嚴重疾病相關，Ⅳ型僅在動物發現，Ⅰ型毒株分布廣泛。LCMV不同毒株致病性不同，例如有些可導致機體急性感染，有些可造成慢性持續性感染，終身攜帶病毒，有些可使小鼠死亡，有些則使小鼠無感染癥狀。而不同的毒株可能僅有幾個核苷酸不同。
LCMV基因組含有S和L兩個節段，S節段編碼糖蛋白(GP1和GP2蛋白)和核衣殼蛋白(NP蛋白)；L節段長編碼RNA依賴性RNA聚合酶L蛋白和小鋅指蛋白Z蛋白。糖蛋白由GP1和GP2兩個亞基組成。核衣殼蛋白、病毒基因組RNA與L蛋白一起形成病毒核糖核蛋白，指導病毒RNA的復制和轉錄。
LCMV通常以家鼠、野鼠等嚙齒類動物為宿主，且犬、猴、雞、貓等也可感染。大約1/5的小家鼠攜帶LCMV，被感染的小家鼠可終身攜帶LCMV，但不表現出任何癥狀。可通過他們的乳汁、唾液、傷口、尿、糞便、氣溶膠等傳染給其他動物和人。人感染LCMV后臨床癥狀為：流行性感冒、腦膜炎、腦炎等癥狀，孕婦感染后可癥狀明顯。LCMV可經垂直傳播給子代。
 
淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒檢測方法
目前檢測LCMV的方法有多種，主要有免疫熒光､免疫組化､ELISA､RT-PCR（逆轉錄PCR）和熒光RT-PCR等，PCR檢測方法已經越來越普遍的應用于微生物的檢測。熒光定量RT-PCR技術是通過檢測熒光信號來進行PCR產物判斷的技術，具有操作簡便､敏感性高､特異性強的特點，已被廣泛應用實驗動物病原微生物核酸的檢測。
翼和生物開發的SPF大鼠小鼠病原體檢測試劑盒根據 LCMV 編碼基因序列設計合成特異性引物對和 TaqMan熒光探針，經一些列優化反應體系和條件，建立 LCMV 實時熒光定量 RT-PCR 檢測方法，開發出成品試劑盒。且一個反應孔中不光可以檢測LCMV病毒，采用多重熒光的檢測體系還可以同時檢測多種病毒。如鑒定試劑盒SPF.M/R-OVF-004可以同時檢測三種病毒：淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒LCMV、小鼠諾如病毒MNV、大鼠冠狀病毒RCV。而聯檢試劑盒SPF.M/R-OV-001可以同時檢測6種病毒：淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒LCMV、小鼠諾如病毒MNV、大鼠冠狀病毒RCV、鼠痘病毒Ect、小鼠腦脊髓炎病毒TMEV、多瘤病毒POLY。
對試劑盒進行靈敏度､特異性和重復性、穩定性、可靠性等測試，均證明翼和多重實時熒光定量PCR檢測試劑盒表現良好，具有操作簡單快速､靈敏度高､可定量､特異性高、重復性好、穩定性強等優勢。