顯微成像案例：THUNDER技術(shù)圖庫（一）

將計算清晰度與寬場顯微鏡的速度、熒光信號靈敏度和易用性相結(jié)合，實時解碼三維生物學(xué)*。

為了幫助您回答重要的科學(xué)問題，THUNDER技術(shù)消除了使用基于相機的熒光顯微鏡觀察厚樣品時產(chǎn)生的焦外模糊現(xiàn)象。THUNDER技術(shù)采用了我們?nèi)�新的光電�?shù)字技術(shù)--Computational Clearing。因此，可以對多種三維樣品（包括模式生物、組織切片和三維細胞培養(yǎng)物）進行高速、高質(zhì)量成像。請看這些圖片，了解THUNDER技術(shù)是如何幫助研究人員揭示樣品深處最精細的結(jié)構(gòu)細節(jié)的。

當(dāng)您看到THUNDER技術(shù)實現(xiàn)的無霧圖像質(zhì)量后，請訪問我們的產(chǎn)品頁面了解更多信息。了解THUNDER技術(shù)如何將Computational Clearing與寬場顯微鏡的速度、熒光信號靈敏度和易用性相結(jié)合，從而實時解碼三維生物學(xué)*。（*符合 ISO/IEC 2382:2015 標(biāo)準(zhǔn)）
 

小鼠淋巴結(jié) - 了解炎癥研究的全貌0:11

使用THUNDER技術(shù)三維細胞培養(yǎng)獲得的小鼠淋巴結(jié)。視頻由德國慕尼黑 Selina Keppler 博士提供。

凱普勒實驗室的部分工作涉及利用炎癥疾病的臨床前模型來了解炎癥期間細胞之間的相互作用。為了了解細胞在器官內(nèi)的分布情況，實驗室研究人員需要將淋巴結(jié)的二維冷凍切片成像方法改為能夠觀察整個器官的方法。

他們制定了一套清除方案，為淋巴結(jié)成像做好準(zhǔn)備。起初，他們使用共聚焦顯微鏡進行成像實驗，但這種方法僅對半個淋巴結(jié)成像就需要長達 18 個小時。他們無法使用傳統(tǒng)的寬場系統(tǒng)，因為組織發(fā)出的自發(fā)熒光使他們無法看到大量所需的信號。

“只有使用THUNDER技術(shù)，我們才能考慮使用基于寬場的系統(tǒng)來研究我們的器官”。

Selina Keppler 博士，德國慕尼黑。

 

僅需幾分鐘就能為淋巴結(jié)內(nèi)的相關(guān)細胞成像。

Keppler 實驗室的研究人員發(fā)現(xiàn)，使用THUNDER技術(shù)，他們只需幾分鐘就能對淋巴結(jié)內(nèi)的相關(guān)細胞進行清晰成像。在圖中所示的例子中，他們能夠清楚地研究濾泡細胞（黃色）和血管（品紅色）的分布。然后，他們繼續(xù)研究野生型淋巴結(jié)與發(fā)炎淋巴結(jié)的差異。在短短 15 分鐘內(nèi)獲得初步概覽，有助于他們開發(fā)出更高效的篩選工作流程，然后他們可以選擇想要詳細分析的區(qū)域，使用共聚焦顯微鏡進行更詳細的分割或單細胞分析。

 

“THUNDER技術(shù)提高了我們的研究效率，節(jié)省了時間，而且更加全面，因為我們現(xiàn)在可以觀察整個結(jié)構(gòu)，而不僅僅局限于觀察器官的部分結(jié)構(gòu)”。

Selina Keppler 博士，德國慕尼黑。

 

擬南芥根 - THUNDER技術(shù)

擬南芥根；早期內(nèi)質(zhì)體標(biāo)記蛋白（與 GFP 融合）；隨時間變化的最大投影 Z 疊圖

圖片提供: 德國海德堡生物研究中心（COS）卡琳-舒馬赫（Karin Schumacher）博士，教授

 

Hela 細胞 - THUNDER技術(shù)

用活細胞染料 SIR-Tubulin 染色的 Hela 細胞。視頻顯示了寬場照明和 TIRF 照明的直接對比，以及不同THUNDER方法（此處為 ICC 和 LVCC）如何進一步改善圖像中的對比印象。使用配備 Infinity TIRF 的THUNDER 3D活細胞成像儀，以 638nm 激光線和 110nm 穿透深度進行 TIRF 掃描。延時和記錄時間為 5 分鐘。記錄了一個小的 Z 堆棧，以便為THUNDER LVCC 獲取足夠的數(shù)據(jù)（堆棧大小：1µm，5 個平面）。由徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Oliver Schlicker 博士提供

 

小鼠大腦皮層 - THUNDER技術(shù)

小鼠大腦皮層，血管周圍空間顯示 500 nm 綠色熒光珠。血管用與 Alexa 594 熒光團連接的 WGA 凝集素染色。樣本由芬蘭奧盧大學(xué)奧盧生物中心 Mika Kaakinen 博士和 Abhishek Singh 碩士提供。樣品由 Immuno Diagnostic Oy 的 Janne Ylärinne 博士提供。

 

小鼠胚胎腎臟 - THUNDER技術(shù)

第 12.5 天的小鼠胚胎腎臟。E-Cadherin（紅色），非特異性（綠色）。樣品由 Kristen Kurtzeborn 碩士制備，由芬蘭赫爾辛基大學(xué)腎臟發(fā)育組 Satu Kuure 教授提供使用。樣本由 Immuno Diagnostic Oy 的 Janne Ylärinne 博士進行成像。

 

小鼠食管器官組織 - THUNDER技術(shù)

小鼠食管器官組織。Integrin alpha6（AlexaFluor 488，綠色），Sox2（AlexaFluor 568，紅色），細胞核（Dapi，藍色）。

樣本由芬蘭坦佩雷大學(xué) Fabio Tadeu Arroso Martins 博士提供。樣本由 Immuno Diagnostic Oy 的 Janne Ylärinne 博士提供。

 

小鼠全裝載視網(wǎng)膜 - THUNDER技術(shù)

小鼠全裝載視網(wǎng)膜：Iba1+ 小膠質(zhì)細胞（Alexa Fluor® 488），三維視圖（彩色編碼）顯示兩層膠質(zhì)細胞（40x/0.95，LVCC）。圖片由西班牙穆爾西亞大學(xué)實驗眼科小組提供。

 

1 毫米小鼠大腦切片 - THUNDER技術(shù)

1 毫米小鼠腦切片。立方體已清除。染色血管和細胞核。

視頻由中國上海交通大學(xué)李小偉教授提供

 

C.elegans. 轉(zhuǎn)基因 GFP - THUNDER技術(shù)

C. elegans. 轉(zhuǎn)基因 GFP。

視頻由中南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院馬龍教授提供

 

小鼠皮層神經(jīng)元 - THUNDER技術(shù)

小鼠皮層神經(jīng)元。轉(zhuǎn)基因 GFP（綠色）。

圖片由中南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院郭輝教授提供

 

成年果蠅肌肉 - THUNDER技術(shù)

成年果蠅肌肉。肌動蛋白（Phalloidin-Cy3，紅色），線粒體（mito-GFP，綠色）。

視頻由中南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院譚潔瓊教授提供。

 

果蠅胚胎 - THUNDER技術(shù)

在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中表達 GCaMP 的果蠅胚胎，用于觀察發(fā)育過程中的神經(jīng)活動。

視頻由美國 Arnaldo Carreira-Rosario 提供

 

小鼠心臟 - THUNDER技術(shù) 3D 細胞培養(yǎng)

圍產(chǎn)期第 5 天小鼠心臟 Col1a1-GFP 轉(zhuǎn)基因。

美國檀香山夏威夷大學(xué) Michelle Tallquist 教授提供

 

果蠅蓇葖果 - THUNDER技術(shù)-3D細胞培養(yǎng)