活細胞成像設備用于細胞遷移研究
劃痕實驗又稱傷口愈合實驗，是一項常見的細胞功能實驗，用于檢測細胞的遷移能力。原理是當單層細胞生長到融合狀態時，在融合單層細胞上人為制造一個空白區域（即劃痕），之后隨著培養時間的延長劃痕會逐漸愈合，同時細胞增殖也參與了這一過程。
劃痕實驗在一定程度上模擬了體內細胞遷移的過程，并可根據需要對遷移過程中的活細胞進行成像，分析細胞間相互作用，而且劃痕實驗也是研究細胞遷移的體外實驗中最簡單的方法[1]。因此，我們可以通過劃痕實驗來進行藥物篩選、化合物毒性、癌癥治療等研究。
劃痕實驗的基本流程是“培養細胞→制造劃痕→拍攝遷移圖像→分析數據”。
圖1 細胞劃痕實驗流程圖
Celloger® Mini Plus是一款活細胞成像設備，可以根據用戶設定的時間參數對指定的位置進行成像記錄。 同時可通過使用分析軟件計算捕獲圖像的細胞融合度（%），定量分析細胞的遷移能力。常規細胞劃痕工作的全流程，從細胞培養到完成細胞實驗，均可以用該系統來完成觀察記錄（圖2）。
圖2 Celloger® Mini Plus設備
應用示例：
1、使用Celloger® Mini Plus在4x物鏡下，記錄明場HeLa、L929、U-2OS、CHO-k細胞的遷移情況，間隔拍攝時間為30分鐘，總記錄時長為3天（圖3）。
圖3 HeLa、L929、U-2OS、CHO-k細胞的遷移情況（比例尺，200μm）
2、為了驗證來自E2結合的CAFs的CD147是否單獨增強了癌細胞的遷移，在實驗中使用Celloger® Mini Plus記錄48小時MKN1細胞的遷移情況，結果顯示，si- ERα對caf# 14的處理顯著降低了MKN1癌細胞的遷移，但通過添加rhCD147可以恢復癌細胞遷移能力[2]（圖4）。
圖4 細胞的遷移情況（比例尺，200μm）
結語：
評價劃痕實驗的常規方法通常為定點分析，研究者需在固定的時間（24/48/72h）將樣本拿出培養箱置于顯微鏡下觀察。使用Celloge®活細胞成像設備無需反復拿取細胞樣本，在培養箱內即可實現對細胞的可視化以及進行長期動力學測定。利用延時成像技術，可以通過圖像和視頻來驗證細胞的遷移能力，豐富研究人員的數據以及確保數據的客觀準確性。
參考文獻：
[1] Liang CC, Park AY, Guan JL. In vitro scratch assay: a convenient and inexpensive method for analysis of cell migration in vitro. Nat Protoc. 2007;2(2):329-33.
[2] Bae WJ, Kim S, Ahn JM, Han JH, Lee D. Estrogen-responsive cancer-associated fibroblasts promote invasive property of
gastric cancer in a paracrine manner via CD147 production. FASEB J. 2022 Nov;36(11):e22597.
劃痕實驗在一定程度上模擬了體內細胞遷移的過程，并可根據需要對遷移過程中的活細胞進行成像，分析細胞間相互作用，而且劃痕實驗也是研究細胞遷移的體外實驗中最簡單的方法[1]。因此，我們可以通過劃痕實驗來進行藥物篩選、化合物毒性、癌癥治療等研究。
劃痕實驗的基本流程是“培養細胞→制造劃痕→拍攝遷移圖像→分析數據”。
圖1 細胞劃痕實驗流程圖
Celloger® Mini Plus是一款活細胞成像設備，可以根據用戶設定的時間參數對指定的位置進行成像記錄。 同時可通過使用分析軟件計算捕獲圖像的細胞融合度（%），定量分析細胞的遷移能力。常規細胞劃痕工作的全流程，從細胞培養到完成細胞實驗，均可以用該系統來完成觀察記錄（圖2）。
圖2 Celloger® Mini Plus設備
應用示例：
1、使用Celloger® Mini Plus在4x物鏡下，記錄明場HeLa、L929、U-2OS、CHO-k細胞的遷移情況，間隔拍攝時間為30分鐘，總記錄時長為3天（圖3）。
圖3 HeLa、L929、U-2OS、CHO-k細胞的遷移情況（比例尺，200μm）
2、為了驗證來自E2結合的CAFs的CD147是否單獨增強了癌細胞的遷移，在實驗中使用Celloger® Mini Plus記錄48小時MKN1細胞的遷移情況，結果顯示，si- ERα對caf# 14的處理顯著降低了MKN1癌細胞的遷移，但通過添加rhCD147可以恢復癌細胞遷移能力[2]（圖4）。
圖4 細胞的遷移情況（比例尺，200μm）
結語：
評價劃痕實驗的常規方法通常為定點分析，研究者需在固定的時間（24/48/72h）將樣本拿出培養箱置于顯微鏡下觀察。使用Celloge®活細胞成像設備無需反復拿取細胞樣本，在培養箱內即可實現對細胞的可視化以及進行長期動力學測定。利用延時成像技術，可以通過圖像和視頻來驗證細胞的遷移能力，豐富研究人員的數據以及確保數據的客觀準確性。
參考文獻：
[1] Liang CC, Park AY, Guan JL. In vitro scratch assay: a convenient and inexpensive method for analysis of cell migration in vitro. Nat Protoc. 2007;2(2):329-33.
[2] Bae WJ, Kim S, Ahn JM, Han JH, Lee D. Estrogen-responsive cancer-associated fibroblasts promote invasive property of
gastric cancer in a paracrine manner via CD147 production. FASEB J. 2022 Nov;36(11):e22597.
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