細胞因子檢測常用方法合集速遞

細胞因子（cytokine，CK）是由免疫細胞（單核細胞、巨噬細胞、T/B 細胞、NK 細胞等）與非免疫細胞（內皮細胞、表皮細胞、成纖維細胞等）合成分泌的小分子蛋白質，具備廣泛生物學活性。其通過結合特異性受體，調控細胞生長分化、免疫應答等關鍵過程，通常由免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導產生，功能涵蓋固有免疫與適應性免疫調節、血細胞生成、APSC 多能細胞調控及損傷組織修復等。依據功能特性，細胞因子可劃分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長因子等多個家族，是維持人體穩態、抵御疾病的核心調節分子。

    

2、酶聯免疫斑點技術（ELISPOT，Enzyme-linked ImmunoSpot）

作為 ELISA 技術的進階升級方案，ELISPOT 是聚焦單個分泌細胞的定量檢測核心技術 —— 依托免疫吸附與細胞培養技術融合，將目標細胞接種于包被特異性抗體的 96 孔板，經刺激后細胞分泌的細胞因子或免疫球蛋白會被原位捕獲；移除細胞后，通過生物素標記二抗、酶標親和素孵育及底物顯色，單個分泌細胞會形成特征性染色斑點，實現可視化定量。

該技術兼具超高靈敏度、操作便捷、成本可控等優勢，不僅能精準檢測單個細胞分泌細胞因子 / 免疫球蛋白的頻率，動態監測樣本中活細胞免疫狀態，還可對於抗原刺激后的活細胞進行功能性驗證，憑借特異性強、結果直觀可信的核心特點，廣泛應用于分泌細胞因子細胞檢測、抗體分泌細胞（ASC）測定等場景，成為國內外免疫學界公認的核心檢測技術之一。
 

     

3、蛋白質印跡法（Western Blot，WB）

作為蛋白分析領域的經典常規技術，WB 專為細胞 / 組織中特定蛋白質表達檢測設計，核心原理是將樣品經凝膠電泳分離后轉印至固相膜，通過特異性抗體與目標蛋白的免疫結合反應，結合顯色或化學發光檢測，依據條帶位置與灰度值，實現蛋白的定性鑒定及半定量分析。

該技術流程清晰（含電泳分離、轉膜、免疫印跡、顯色等關鍵步驟），兼具高分辨率與強特異性優勢，可同時對比多個樣品中同種蛋白的表達量差異，廣泛應用于基因蛋白水平表達研究、抗體活性檢測、疾病早期診斷等生物醫藥研究及臨床相關場景。

 

4、超敏電化學發光技術（MSD，Meso Scale Discovery）

作為生物分子檢測領域的超高靈敏度技術，MSD 以電化學發光為核心原理 —— 通過電化學信號激發特異性標記物產生強光信號，結合信號放大機制實現對低濃度目標分子的精準捕獲，尤其適用于生物標志物等微量生物分子檢測。
 

該技術兼具高靈敏度、寬線性范圍、強特異性及低背景干擾等核心優勢，更支持多靶點并行檢測，能高效實現低豐度目標分子的定量分析，在生物標志物篩查、藥物高通量篩選及免疫分析等場景中表現突出。目前已廣泛應用于臨床診斷與生物醫藥研究：臨床端可精準檢測腫瘤、感染性疾病、心血管疾病等標志物，為診療決策提供可靠依據；研發端可支撐生物分子互作研究、新藥活性評價及免疫學機制解析，為新藥研發與基礎科研提供關鍵技術支撐。

 

5、Luminex 液相芯片檢測技術

作為多因子檢測領域的核心技術，Luminex 融合微球編碼與流式細胞儀原理，通過微球內部三種免疫熒光的不同配比，可實現數百種特異性微球的精準區分，每種微球均能靶向捕獲一種目標蛋白。檢測時，儀器通過雙激光系統完成定性與定量分析：635nm 紅色激光識別微球編碼，明確對應靶標類型；532nm 綠色激光檢測 PE 熒光基團信號強度，精準反映靶標蛋白結合量。

該技術兼具多重檢測優勢與超高靈敏度，既實現 pg 級絕對定量（性能媲美多重 ELISA），又支持單次實驗同時檢測多種蛋白指標，大幅提升檢測效率與樣本利用率。配套試劑盒覆蓋人類、非人靈長類、小鼠、大鼠、犬、豬等多個物種，廣泛適用于多因子聯合檢測、生物標志物篩查、藥物研發等生物醫藥研究場景。

   

6、Olink 技術

作為突破蛋白檢測多重性、特異性與靈敏度瓶頸的核心平臺，Olink 聚焦超靈敏多重蛋白標志物檢測、無偏靶向蛋白質組學及精準蛋白組學三大核心方向，通過技術創新推動蛋白標志物發現、藥物研發、轉化醫學研究及多組學整合的落地應用。
 

該平臺檢測服務兼具高靈敏度、強穩定性與高準確性優勢，配套超微量蛋白標志物開發、蛋白互作分析等多元化方案，可適配精準醫療、轉化醫學、藥物研發等廣泛研究場景。同時，其在生物標志物篩查、疾病預測診斷等領域的應用，為臨床診療決策與科研創新提供高效技術支撐，加速醫學研究向臨床轉化的進程。

 

7、Cytometric Bead Array（CBA）系統

作為流式細胞術與蛋白定量技術的融合創新，CBA 系統是針對微量樣本設計的多指標檢測技術，核心原理是利用微米級熒光編碼微球 —— 每種微球偶聯特異性抗體，與樣本中目標細胞因子 / 蛋白質結合形成免疫復合物，經洗滌去除未結合成分后，通過流式細胞儀實現精準檢測。

該技術兼具多重檢測與高效分析優勢：單次實驗可同步定量單個樣本中多種指標，且具備高靈敏度、強特異性特點，同時操作快速簡便、檢測通量高，成為免疫學研究與臨床診斷的關鍵工具。臨床端可精準檢測免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤等疾病標志物，支撐早期診斷、病情監測及療效評估；研發端可助力細胞因子表達規律、分子互作機制及疾病關聯研究，為新藥研發與免疫學基礎研究提供可靠數據支撐。

 

8、質譜法（Mass Spectrometry，MS）

作為蛋白分析領域的高分辨率技術，MS 通過質譜儀精準測量離子質荷比，可直接獲取細胞因子的分子量、氨基酸序列等核心信息。其核心優勢在于兼具超高靈敏度、強特異性與高分辨率，既能實現低濃度細胞因子的精準檢出，又能有效區分不同細胞因子的結構差異，為蛋白鑒定與特性分析提供直接依據。

   

綜上，細胞因子檢測是貫穿生物醫藥領域的關鍵技術支撐，廣泛賦能疾病診斷監測、治療預后評估、藥物研發篩選、疫苗設計評估及基礎機制研究等核心場景。伴隨檢測技術的持續迭代與應用場景的不斷拓展，細胞因子檢測必將在未來生物醫藥領域中發揮更為核心的引領作用。

 

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