組織保存液的作用、特性、使用方法及在科研實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用
瀏覽次數(shù):133 發(fā)布日期:2025-12-5
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實(shí)驗(yàn)室里,那塊珍貴的新鮮組織樣本在低溫保存液中靜靜等待著漫長(zhǎng)的運(yùn)輸,而它的細(xì)胞活性將在72小時(shí)后依然保持在80%以上。
在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中,組織保存液已成為不可或缺的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)試劑。無論是醫(yī)院樣本采集、跨機(jī)構(gòu)合作研究,還是需要長(zhǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)操作的情況,這種特殊的溶液都能為組織和細(xì)胞提供穩(wěn)定的體外環(huán)境,確保樣本從采集到分析前始終保持良好的生理狀態(tài)和活性。
01 何為組織保存液?
組織保存液是一種用于短期保存和運(yùn)輸新鮮組織與細(xì)胞樣本的特殊溶液。它所有成分對(duì)細(xì)胞或組織無毒害作用,不會(huì)影響保存細(xì)胞或組織的生理功能。
這種溶液的基本設(shè)計(jì)要求是能夠在低溫條件(2-8℃)下,保持組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活性,根據(jù)產(chǎn)品不同,保存時(shí)間可達(dá)24至72小時(shí)。
與簡(jiǎn)單的生理鹽水或傳統(tǒng)培養(yǎng)基不同,組織保存液經(jīng)過專門優(yōu)化,含有鈉鹽、鉀鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖等成分,pH值維持在7.0-7.6之間,滲透壓為320-360mOsm/kg,為細(xì)胞提供最適宜的生存環(huán)境。
更為專業(yè)的產(chǎn)品還不含抗生素、DMSO、EDTA、DNase/RNase抑制劑、外源動(dòng)物成分和血清,避免了這些成分可能對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成的干擾。
Absin組織保存液(#abs9474)
02 組織保存液的卓越特性
- 高細(xì)胞活性保護(hù):核心價(jià)值是保護(hù)細(xì)胞活性,在2-8℃條件下保存組織72小時(shí)后,細(xì)胞活率可達(dá)到80%以上,遠(yuǎn)勝于常規(guī)鹽水或普通培養(yǎng)基。
- 即用型設(shè)計(jì):無需自行配制多種溶液,可直接使用,批間次差異小,大幅提升實(shí)驗(yàn)效率。
- 成分明確安全:無血清、無蛋白,提高實(shí)驗(yàn)安全性,降低外來蛋白引起的不必要干擾。
- 無DMSO干擾:優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品不含DMSO成分,避免化學(xué)保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞自然狀態(tài)的潛在影響。
03 組織保存液的多場(chǎng)景應(yīng)用
單細(xì)胞測(cè)序
在當(dāng)今熱門的單細(xì)胞測(cè)序領(lǐng)域,組織保存液展現(xiàn)出獨(dú)特價(jià)值。它能夠在不冷凍樣本的情況下,保持RNA完整性,確保單細(xì)胞水平的基因表達(dá)分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
組織病理學(xué)研究
對(duì)于需要運(yùn)輸?shù)胶献鲗?shí)驗(yàn)室處理的珍貴手術(shù)樣本(如腫瘤組織、活檢組織等),組織保存液提供了可靠保障;多個(gè)樣本處理時(shí),還能避免因時(shí)間差導(dǎo)致的批間效應(yīng),提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的一致性。
細(xì)胞培養(yǎng)前處理
從保存的組織中分離活細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),或進(jìn)行PDX接種(人源腫瘤異種移植模型)時(shí),組織保存液處理后的樣本可直接用于后續(xù)操作。
特殊結(jié)構(gòu)研究
對(duì)于有血管、管腔結(jié)構(gòu)的樣本,可先用保存液沖洗、灌注管腔后再充分浸潤(rùn),確保復(fù)雜組織結(jié)構(gòu)也能得到完整保存。
04 組織保存液的實(shí)戰(zhàn)操作指南
樣本前處理
1. 確保新鮮組織沒有真菌、細(xì)菌、支原體污染,這是關(guān)鍵第一步;
2. 選取適宜區(qū)域的活性組織,除去壞死的多余組織和殘留血液;
3. 對(duì)于實(shí)質(zhì)性組織,用手術(shù)剪或解剖刀將組織塊修剪成約0.5cm寬×0.5cm厚的尺寸(組織塊太大會(huì)影響代謝廢物與保存液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換)。
保存液準(zhǔn)備與使用
1. 使用前將保存液預(yù)冷至2-8℃,生物樣本在運(yùn)輸和保存過程中也需保持這一溫度范圍;
2. 估算樣本體積后,取至少5倍體積的組織保存液將組織完全浸泡;若保存時(shí)間較長(zhǎng)(24-72小時(shí)),建議使用5-10倍體積的保存液。
保存后處理
1. 保存后的組織可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);
2. 部分產(chǎn)品含有抗氧化劑,若需防止其干擾實(shí)驗(yàn),可用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液將組織樣本浸潤(rùn)清洗2-3次。
05 不同樣本的特殊考量
- 實(shí)質(zhì)性器官(肝、腎等):需切成適當(dāng)大小(厚度不超過0.5cm),確保保存液充分滲透,避免中心區(qū)域因滲透不足而壞死。
- 空腔器官(腸管、血管等):除外部浸泡外,需用保存液沖洗、灌注管腔,確保內(nèi)外環(huán)境一致。
- 特殊注意事項(xiàng):
- - 部分組織保存液對(duì)血細(xì)胞保存效果一般,不推薦用于保存血細(xì)胞;
- - 僅適用于組織,不可用于儲(chǔ)存單細(xì)胞,單細(xì)胞需選擇專門的細(xì)胞保存產(chǎn)品。
06 常見問題與解決方案
沉淀問題
部分產(chǎn)品解凍后會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀,通常可通過將產(chǎn)品恢復(fù)至室溫解決,待沉淀完全溶解后再進(jìn)行分裝或使用。
顏色變化
保存液在4℃環(huán)境中長(zhǎng)時(shí)間放置,顏色可能變深至黃褐色,但通常不影響使用效果。
長(zhǎng)期保存限制
如需儲(chǔ)存更久,應(yīng)考慮使用專門的凍存液(復(fù)蘇后不影響細(xì)胞活率);組織保存液主要設(shè)計(jì)用于短期低溫保存,而非長(zhǎng)期凍存。
組織大小疑問
不同產(chǎn)品對(duì)組織大小的要求不同,部分產(chǎn)品無嚴(yán)格限定;若必須切小,建議在組織保存液中操作,比暴露在保存液外面對(duì)細(xì)胞更友好。
隨著單細(xì)胞測(cè)序、精準(zhǔn)醫(yī)療等前沿技術(shù)的快速發(fā)展,組織保存液的價(jià)值愈發(fā)凸顯。它如同一座微型的生命橋梁,連接著樣本采集與精細(xì)分析的兩個(gè)世界,讓曾經(jīng)難以實(shí)現(xiàn)的跨時(shí)間、跨地域科研合作成為日常。
在未來的生命科學(xué)研究中,隨著無血清、無動(dòng)物源成分、化學(xué)成分明確的組織保存液成為主流,我們將能更加真實(shí)、準(zhǔn)確地探索生命機(jī)制,推動(dòng)醫(yī)學(xué)研究邁向新的高度。
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