OI 600應用實例：ACSS2—Hepcidin 通路抑制酒精性肝損傷中的鐵死亡

近期發表于《Nature Communications》（IF=15.7，Q1/1區）的研究顯示：長期乙醇暴露抑制乙酸輔酶A合成酶2(ACSS2)，阻斷乙酸到乙酰輔酶A的生成；隨之CBP-依賴的組蛋白乙酰化減少，使肝臟鐵調素基因HAMP1/2(hepcidin)轉錄受抑。鐵調控失衡疊加脂質過氧化，引發鐵死亡并加重酒精性肝損傷。補回ACSS2、過表達HAMP1/2，或給予Fer-1/DFO/重組hepcidin均能顯著改善表型。

疾病痛點：酒精性肝病（Alcoholic Liver Disease, ALD）發病上升、有效藥物缺位，移植幾乎是末期主要選擇——機制與可成藥靶點稀缺。

機制新意：把“代謝（ACSS2）-表觀（乙酰化）-鐵穩態（hepcidin）—細胞死亡（ferroptosis）”串成閉環，為ALD的鐵負荷與肝損傷提供統一解釋。

人群/動物/細胞多層驗證：人群血清乙酸、hepcidin、鐵指標；雌雄小鼠乙醇飼喂“急+慢”兩種模型；肝細胞體外乙醇暴露。

遺傳與藥理雙路徑：肝細胞特異Acss2敲除、AAV-Acss2回補；ACSS2抑制劑加重表型；AAV-Hamp1/2或hepcidin/Fer-1/DFO糾偏。

核心指標：肝功能、生化脂質、炎癥因子、鐵穩態（HAMP1/2、FPN、TFRC、普魯士藍、組織/血清鐵）、鐵死亡（GSH、LPO、4-HNE、C11-BODIPY、ROS、線粒體超微結構）。

部分方法學

Western blot（化學發光成像）

蛋白檢測方法：研究人員將樣本經SDS-PAGE分離并轉印至0.45 μm NC膜，5%脫脂奶粉封閉后按標準流程完成一抗（4 °C 過夜）與二抗（室溫 90 min）孵育，隨后使用光儀（BIO-OI）OI600全自動化學發光凝膠成像系統采集ECL條帶圖像，用于后續定量分析。

相關發現

組蛋白乙酰化變化

檢測H3/H4及其位點乙酰化（H3K9ac、H3K14ac、H3K18ac、H3K27ac；H4K5ac、H4K8ac、H4K12ac）條帶，顯示ACSS2下降伴隨乙酰化降低。

ACSS2–CBP相互作用的Co-IP+WB

Flag-ACSS2/HA-CBP過表達體系與內源體系的Co-IP后，以WB條帶確認結合。

鐵穩態/肝損傷相關蛋白的WB

論文對HAMP1/2（hepcidin）與FPN等鐵穩態關鍵蛋白進行了WB檢測，用于評估ACSS2過表達或干預（AAV-Acss2、AAV-Hamp1/2、重組hepcidin、Fer-1/DFO）對通路的糾偏作用；這些WB條帶均按同流程由OI600采集。

Fig 5b:AAV-Acss2 轉導效率	Fig 6a-b:組蛋白乙酰化位點（H3K9ac/H3K14ac/H3K18ac/H3K27acH4K5ac/H4K8ac/H4K12ac）Western blot。 Fig 6c–f：ACSS2 與 CBP 的 Co-IP + WB。

實驗配套

這類課題的WB，如何用OI600做到“穩、準、快”

這類弱信號WB對成像設備提出了三點核心要求：靈敏度、線性區和多模式兼容，而OI 600能很好的滿足以上需求。

設備要點：

▶900萬像素深冷科研相機，高靈敏、低噪聲，適合弱信號ECL/化學發光與微弱熒光；

▷F0.95大光圈自動對焦鏡頭，弱信號條帶進光量充足；

▶峰值QE可達約95%，在可見-近紅外波段都能高效收光，暗條帶信號也不流失；

▷可選配RGB熒光光源/紫外/白光/ECL樣品臺，覆蓋生物化學發光、凝膠成像、多色熒光、孔板發光等場景。

小結

本文以“ACSS2-乙酰化-HAMP1/2-鐵穩態-鐵死亡”為主線，把ALD的代謝與細胞死亡機制打通，并在遺傳/藥理/人群多層檢驗。針對這類課題的條帶與弱發光拍攝，OI600提供了“深冷相機+大光圈自動對焦+高量子效率+OD6濾光+多光源樣品臺”的一體化方案，既能把弱信號拍清楚，也能把歸一化證據留完整，利于可復現與審稿。

參考文獻：Wang M, Wen X, et al. ACSS2 protects against alcohol-induced hepatocyte ferroptosis through regulation of hepcidin expression. Nature Communications (2025). doi:10.1038/s41467-025-61067-8