如何有效滅菌培養皿和培養基？關鍵步驟和注意事項揭秘！
培養皿和培養基的方法滅菌及注意事項
培養皿分為塑料培養皿和玻璃培養皿，塑料培養皿是一次性的，用完處理后就可以扔了，廠家會對塑料培養皿滅菌之后再進行發貨，客戶拆開包裝后可直接使用，廠家的滅菌方式一般有射線滅菌和環氧乙w滅菌;玻璃培養皿是可以重復使用的，需要自行滅菌，實驗室對玻璃培養皿可進行干熱滅菌或濕熱滅菌,干熱滅菌方法就是將培養皿包在鐵質容器內,進行高溫烘烤。濕熱用牛皮紙包起來放在高壓鍋中進行高壓滅菌。培養基一般均采用濕熱滅菌。
培養皿滅菌方法有干熱滅菌和濕熱滅菌,干熱滅菌方法：包在鐵質容器內,進行高溫烘烤.濕熱用牛皮紙包起來放在高壓鍋中進行高壓滅菌.培養基滅菌方法有濕熱滅菌、煮沸滅菌和過濾除菌,煮沸滅菌在電磁爐或者微波爐內進行煮沸即可,過濾除菌適用于不能高溫處理的培養.
培養皿和培養基有效滅菌的關鍵步驟與注意事項，綜合實驗室常用方法及操作規范：
一、培養皿滅菌方法
1. 干熱滅菌法(主流方法)
步驟：
將干燥的培養皿用牛皮紙包裹或放入金屬盒中。
置于烘箱，160–170℃加熱1–2小時。
滅菌后待溫度降至60℃以下再取出，避免玻璃炸裂。
適用場景：耐高溫玻璃培養皿，可徹底滅活芽孢。
2. 高壓蒸汽滅菌法(輔助方法)
步驟：
使用培養皿滅菌桶(需對齊通氣孔)或雙層報紙包裹。
121℃、100kPa壓力下滅菌15–30分鐘。
出鍋時趁熱旋轉桶蓋錯位通氣孔，防止污染。
適用場景：一次性塑料培養皿(需確認材質耐溫性)。
3. 其他方法
紫外線/酒精消毒：僅表面臨時處理，不可替代高溫滅菌。
二、培養基滅菌方法
1. 高壓蒸汽滅菌法(最常用)
步驟：
分裝培養基至錐形瓶，密封后放入滅菌鍋。
121℃、103–137kPa壓力下滅菌15–30分鐘。
避免過度滅菌導致營養成分(如糖類、維生素)降解。
驗證：使用生物指示劑或化學指示卡監測效果。
2. 過濾除菌法(熱敏成分)
適用：含血清、維生素等易分解物質的培養基。
操作：通過0.22μm濾膜過濾，容器需預先滅菌。
3. 低溫濕熱滅菌
參數：115℃處理不耐高溫培養基(如含化學不穩定成分)。
三、關鍵注意事項
安全操作：
高壓滅菌鍋需先加水防干燒，壓力歸零后再開閥。
干熱滅菌后器械需冷卻至安全溫度再取用。
防污染措施：
滅菌后培養皿/培養基需在超凈臺中拆封。
金屬工具(如鑷子)可火焰灼燒輔助滅菌。
質量控制：
定期校準滅菌設備溫度與壓力參數。
不同批次試劑勿混用，封板膜一次性使用。
四、方法選擇建議
對象 推薦方法 優勢
玻璃培養皿 干熱滅菌(160–170℃) 徹底滅活芽孢，保持干燥
耐高溫培養基 高壓蒸汽滅菌(121℃) 穿透力強，時間短
熱敏成分培養基 過濾除菌 避免熱破壞
通過規范操作和參數控制，可確保滅菌效果達到無菌保證水平(SAL≤10⁻⁶)。
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