美國藥典第86章“使用重組試劑的細菌內毒素測試”常見問題解答
為了幫助行業更好地理解和實施這一新章節，美國藥典（USP）提供了針對第<86>章使用“使用重組試劑的細菌內毒素測試”的常見問題解答，旨在全面解析和澄清相關疑問，確保行業能準確理解和高效應用這一創新試劑進行細菌內毒素檢測。以下是對這些問題的詳細梳理：
Q1：如果第<86>章“使用重組試劑進行細菌內毒素檢測”是1000以下的章節，為什么需要按照該章節的規定完成附加驗證？
目前，第<86>章中的方法被視為第<85>章“細菌內毒素檢測（BET）”的替代方法。替代方法的定義可在一般注意事項6.30中找到:“替代方法或程序是指除相關物品的藥典方法或程序以外的任何方法或程序。”
由于第<86>章包含替代方法，因此用戶有責任確保主要方法（非產品特定方法）已經過驗證（根據<1225>藥典程序驗證），并且該方法經過驗證，適用于所測產品/材料（根據<1226>藥典程序驗證），從而確認方法是否適用于檢測特定產品或材料。對于第<86>章，應評估供應商對檢測試劑盒的主要驗證，以確定其是否符合USP<1225>中要求的方法驗證要求。符合藥典方法驗證要求（第<1226>章包含在第<86>章“準備檢測”一節中。
如第<86>章所述，用戶需要查看供應商提供的（或內部開發的）主要驗證包，以確保該方法的驗證狀態適合其預期用途。成功完成這些步驟（第<86>章中的主要驗證審查和成功完成預備測試）可用于證明所選方法適用于所測試的特定材料。由于迄今為止使用這些試劑的經驗有限，監管機構可能在驗收前要求提供更多的具體驗證數據。
Q2：第<86>章是否與Ph Eur2.6.32協調？如果不協調，可以協調嗎？
對于美國藥典（USP）、標準，跨藥典協調工作是通過藥物討論組（PDG）進行的，與ICHQ4B保持一致。
美國藥典（USP）、歐洲藥典（EP）、印度藥典委員會（IPC）和日本藥典（JP）使用鱟源檢測試劑進行的細菌內毒素檢測已協調一致，為全球和認可主要藥典的市場中的最終用戶帶來了巨大利益。通過PDG進行協調是可以實現的，也是人們所期望的；目前正在努力開展討論，以便今后與PDG實現協調。
Q3：為什么重組試劑沒有添加到第<85>章？
因為第<85>章是一個與歐洲、印度和日本的相應章節相協調的章節。這些章節是ICHQ4B的一部分，這意味著它們在ICH地區的監管機構內被認為是可以互換的。因此，要及時進行修改比較困難。希望協調當前和未來的rBET章節；請參閱上面有關協調的問題。
Q4：USP如何評估多種產品和材料的研究數據，以證明將第<86>章確立為適用章節是合理的？
USP通用章節微生物學專家委員會的內毒素和熱原小組委員會根據小組委員會的集體專業知識、現有的同行評審文獻、對公開和提交的機密最終用戶數據和驗證的廣泛審查以及政府聯絡人的意見制定了第<86>章。繼續生成rBET數據并提交給全球藥典將能夠確定跨產品的適用性。
Q5：為什么重組級聯試劑（rCR）被納入第<86>章？
USP微生物專家委員會（MEC）內毒素小組委員會在廣泛審查公開和提交的機密最終用戶數據和驗證以及現有的同行評審文獻的基礎上制定了第<86>章。同行評審文獻中存在大量使用rFC和rCR的BET數據，MEC在制定本章時還審查了非公開/保密數據。在考慮這些信息的同時，還認識到重組試劑相當于天然因子C的生物技術，而天然因子C是負責檢測馬蹄蟹內毒素的生物傳感器。
此外，rCR酶級聯始于rFC。綜合所有這些信息和數據，MEC一致認為，納入rCR得到了所審查的科學和數據的支持。推進rBET章節符合USP擴大使用無動物方法和材料的承諾。
Q6：是否需要進行廣泛的可比性/等效性研究，以證明從第<85>章過渡到第<86>章是合理的？
對于大多數內毒素檢測產品來說，不需要進行廣泛的可比性/等效性研究。在大多數情況下，只需證明產品特定方法的適用性即可，這在實踐中與第<85>章類似�？赡芸倳欣馇闆r，這些例外情況應基于最終用戶的經驗和材料特性。在某些情況下，可與相關監管機構一起對方法進行主動審查。
第<86>章采用了與第<85>章相同的內毒素容許限度、測量單位和主要參考標準。這與從兔熱原試驗（RPT）過渡到內毒素檢測時實施的第<85>章形成鮮明對比，后者沒有這些質量控制功能，僅包括動物飼養最佳實踐。
此外，rBET是建立在數十年成熟的生物技術科學基礎之上的，其作用機制相同：rFC是鱟因子C的克隆，細菌內毒素的檢測是通過生物傳感器鱟因子C進行的。
Q7：第<86>章的實施是否會影響USP第<151>章熱原檢測法的使用？
第<86>章的引入是USPMEC開發非動物測試模型的第一步。雖然第<86>章的引入對章節<151>沒有直接影響，但它為引入可替代動物測試模型的新技術提供了一個框架。在MEC利益相關者的支持下，正在探索其他技術（例如單核細胞活化測試，MAT）以供未來引入。增加新的體外技術和/或儀器技術是USP致力于擴大無動物試驗方法和材料使用范圍的一部分。
