24小時長效培養PBMC保障細胞高活性

一、PBMC細胞簡介
 
外周血單個核細胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有單個核的細胞，來源于骨髓中的造血干細胞（HSC），通常主要包括淋巴細胞和單核細胞。單個核細胞的體積、形態和比重與外周血其他細胞不同，紅細胞和多核白細胞的比重在1.092左右，單個核細胞的比重為1.075-1.090，血小板為1.030-1.035。因此利用一種介于1.075-1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心，使一定密度的細胞按相應密度梯度分布，可將各種血細胞與單個核細胞分離。 淋巴細胞又包括T淋巴細胞，B淋巴細胞和NK細胞。其中T淋巴細胞是比例最多的淋巴細胞類型，在胸腺中發育成熟，主要功能就是執行人體的細胞免疫功能，在人體的免疫監視中發揮著重要的作用。B淋巴細胞屬于人體的執行體液免疫功能的細胞，B淋巴細胞受抗原刺激以后，能夠發育成熟為漿細胞，可以分泌各種抗體，發揮體液免疫功能NK細胞是人體非特異性免疫細胞，也在免疫監視中發揮著重要作用。單核細胞屬于白細胞的一種，從血液中逸出到組織中就變成了吞噬細胞，也稱為巨噬細胞，在人體的非特異性免疫功能中發揮著重要的作用。
二、PBMC細胞應用
 
PBMC是免疫系統的關鍵組成部分，因此在免疫學、傳染病、惡性腫瘤、疫苗研發、移植治療、個性化醫學和毒理學領域均作為最基礎的試驗原料被廣泛應用。例如在腫瘤免疫藥物研發中常用于抗體依賴性細胞毒性（ADCC）、T細胞激活或抑制、CMV Recall、Treg抑制及PBMC構建人源化小鼠等體外試驗，也可用作PBMC-腫瘤細胞共培養，突破免疫體外殺傷研究的壁壘。
 
以ADCC試驗為例，PBMC在其中起主要作用。抗體依賴性細胞毒性試驗，是依靠抗體介導殺傷細胞來殺傷靶細胞。具體過程可理解為：抗體的Fab段結合在靶細胞抗原表位上。抗體的Fc段與NK細胞（因NK細胞是能發揮ADCC作用的主要細胞，故以此舉例）表面的FcR結合，從而NK細胞活化，穿孔素、顆粒酶被釋放。穿孔素、顆粒酶從靶細胞膜上形成的“孔道”進入胞內，通過激活凋亡相關的酶使靶細胞凋亡。在以上過程中，為了使效應細胞釋放的細胞毒物質充分作用于靶細胞，良好的效應細胞（如新鮮的PBMC）供給在ADCC的研究中是必不可少的。另外，ADCC也常用來評估藥物研發中抗體的活性有無及強弱，因此一個高質量的PBMC產品用作效應細胞尤為重要。
 
三、相關評估
 
技術人員以0和24時培養為檢測點，測定不同種屬下的細胞活率，結果表明經長時培養后，細胞活率仍可達到75%以上，極好地滿足客戶需求。
   
多種屬PBMC均經過流式細胞儀利用特定抗體對T細胞和B細胞內細胞組分進行占比評估，方便客戶直觀地了解常見細胞占比。
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