Spark®酶標儀增強型模塊應(yīng)用于 AlphaScreen®分析
AlphaScreen 是一種基于微珠的篩選技術(shù)，旨在快速、可靠且經(jīng)濟高效地檢測生物分子相互作用，近年來更是廣泛的應(yīng)用于藥物研發(fā)領(lǐng)域中。同時 AlphaScreen 與 ECL、FMAT技術(shù)相似，也需要高能激光器，同其他技術(shù)相比，AlphaScreen 對于檢測儀器平臺要求更高。
不一樣的Spark酶標儀增強型檢測模塊
高功率激光光源，濾光片優(yōu)化組合
Tecan Spark酶標儀配備了增強型檢測模塊，包括用于優(yōu)化 AlphaScreen 供體微珠激發(fā)的高功率激光光源，以及優(yōu)化濾光片組合，非常適用于AlphaScreen，AlphaLISA®， AlphaPlex™ 和潛在的新 Alpha 技術(shù)應(yīng)用的發(fā)射信號超高靈敏檢測。使Spark 酶標儀的增強型檢測模塊在 96 孔和 384 孔板格式的靈敏度和均一性等基本質(zhì)量參數(shù)方面，均為 AlphaScreen 檢測提供了出色的性能保證。
實時溫度校正功能
Spark酶標儀還擁有 Tecan 久負盛譽的實時溫度校正功能，可改進微孔板上樣品溫度波動帶來的影響。可用于進一步提高分析性能，而無需在檢測前對樣品進行耗時的溫度平衡過程。
易于操作的軟件，優(yōu)化的實驗流程
Spark酶標儀還為 Alpha 技術(shù)集成了易于使用、直觀的軟件解決方案和預(yù)先優(yōu)化的實驗流程，為AlphaScreen, AlphaLISA 和 AlphaPlex 檢測保駕護航，為科學研究、分析方法的開發(fā)以及高通量篩選等提供了卓越的性能。
眼見為實：AlphaScreen 技術(shù)在 Spark多功能酶標儀上的成功應(yīng)用
結(jié)果
靈敏度和線性度
Spark酶標儀能夠檢測低至 1.6 ng/ml 的 Omnibeads 濃度，線性度為 0.9999（R2 值），信號/空白比為 1,154:1（圖 2）。
均一性
將 10,000 ng/ml Omnibeads 稀釋液的 50 多份重復(fù)的樣品移液至 384 孔板中。檢測結(jié)果表明信號均一性非常好， CV 值僅為 2.2% 。這表明 Spark 酶標儀能夠檢測 AlphaScreen 信號，且不會產(chǎn)生顯著的結(jié)果波動（圖 3）。
讀取時間
AlphaScreen 在不同微孔板格式中的總讀取時間包括激發(fā)和積分時間，以及應(yīng)用溫度校正功能所需的時間。通常，我們推薦使用 Alpha檢測的標準設(shè)置，即激發(fā)和積分時間分別為 100 和 300 毫秒，可以在 4 分 28 秒內(nèi)完成整塊 384 孔板的讀取。當溫度校正功能激活后，基于IR 的溫度評估與信號檢測會同時進行，因此檢測時間會稍微延長。這導(dǎo)致絕大多數(shù)特定微孔板格式的讀取時間延長約20%。然而， 我們可以通過使用更短的激發(fā)和發(fā)射周期（激發(fā)和積分時間都低至 10 毫秒）來顯著縮短總讀取時間，同時為個性化應(yīng)用提供優(yōu)化方案。
表2 顯示了 96 孔板和 384 孔板的 AlphaScreen 讀取時間概覽。
參考文獻
1) Using the AlphaScreen Omnibeads. www.perkinelmer.com/CMSResources/Images/ 44-73451MAN_AlphaScreenOmniBeads.pdf
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