PBMC細胞凍存液使用方法及注意事項

細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。目前，細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法，利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態，并保持細胞特性。通過冷凍方式保存細胞，可以在需要時進行復蘇及繼續培養。

最佳的冷凍條件是盡可能地降低細胞內的晶體形成，減少細胞內水凝固所形成的高濃度溶質對細胞造成的低溫損傷。除了我們知道的 緩慢冷凍，液氮低溫保存，快速復蘇外，凍存液的選擇也非常重要。

1    簡介

匯智和源無血清細胞凍存液，優化了其配方組分，能夠更大程度的減少細胞在凍存、復蘇時的損傷。

本品不含血清，降低了DMSO的含量，屬于即用型細胞凍存液，無需配制，直接在細胞中加入適量的凍存液即可。對于PBMC細胞、干細胞或T淋巴細胞等細胞具有較好的保護能力，讓你輕松擁有高活率的細胞。

2    優勢

成分：不含血清，降低了DMSO含量

高效：長期凍存后復蘇的細胞，仍然可以達到滿意的復蘇率

方便：即用型，無需額外配制

安全：無微生物污染風險，批次穩定

3    凍存流程

1、凍存管、梯度凍存盒放進4℃冰箱提前預冷；

2、將要進行凍存的PBMC細胞、干細胞或T淋巴細胞等細胞， 350g 離心 7 分鐘，棄去上清并收集細胞。

3、加入匯智和源無血清細胞凍存液，吸管輕輕吹打，重懸細胞。計數并調整細胞濃度；

4、將細胞懸液分裝于無菌凍存管中，每管加1mL細胞懸液，旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；

5、凍存：細胞放入梯度凍存盒，先在-20℃放1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜，再轉入液氮罐。
4    細胞凍存的注意事項

1、緩慢冷凍，細胞逐步脫水，不會因產生大的冰晶而受到損害

2、細胞在-20C冰箱內放置時間不可超過1小時，以防止冰晶過大而破壞細胞。

3、保存在-80°C冰箱中的時間不要超過24h，放入液氮中保存；

4、凍存管的蓋子一定要擰緊，否則復蘇水浴時會滲水，造成支原體污染；

5、定期檢查液氮儲備，保證細胞全部浸在液面下。

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