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          即用型水凝膠在成人小腸類器官的培養與分化中的應用

          瀏覽次數:2628 發布日期:2020-8-27  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

          VitroGel™是一種即用型、無外源性(Xeno-Free)的多糖水凝膠體系,可模擬天然的細胞外基質(extracellularmatrix,ECM)環境。VitroGel™使用方便操作簡單,只需與細胞培養基混合即可轉變為可調的水凝膠基質。VitroGel™優點眾多,應用廣泛,有效的彌補了體內外研究的鴻溝。本文主要為大家詳細介紹VitroGel™。
           
          ☰ 工作原理  
           
          20分鐘快速成膠(包括10-15分鐘水凝膠穩定時間)。
          VitroGel™與細胞培養基中的離子(如Ga2+或Na+)相互作用,室溫穩定15分鐘即可形成水凝膠。成膠后在水凝膠表面覆蓋一層培養基,可進一步促進水凝膠交聯形成較硬的水凝膠。
           
          ☰ 產品特點  
           
           

          即用型:單瓶體系,只需與細胞混勻即可!

           

          無異源蛋白成分:VitroGel 3D為無動物源性多糖水凝膠體系。

           

          室溫穩定:該水凝膠體系室溫穩定,pH中性。冰盒可以不用啦!

           

          透 明:該水凝膠體系顏色透明,兼容不同的成像系統,便于細胞觀察。

           

          細胞容易收獲:3D細胞培養后,可通過離心從水凝膠中輕松收獲細胞。

           

          可注射:使用恰當的混合比例,該水凝膠可用于注射,適合體內研究。

          ☰ VitroGel™3D培養的優勢  

          與其他3D培養方式相比VitroGel 3D集眾多優點于一身(詳見下表)
           

           
          ☰ 產品應用  

          VitroGel™有兩種類型:VitroGel 3D和VitroGel 3D-RGD;它們的使用方法及產品特點相同,不同點在于VitroGel 3D多用于懸浮細胞的培養,VitroGel 3D-RGD因在水凝膠中添加了整合素的配基RGD肽,因此更有利于貼壁細胞的培養。

          VitroGel™可應用于3D細胞培養、體內注射、細胞侵襲&遷移實驗、細胞成球實驗、藥物篩選、干細胞培養、2D細胞培養等諸多方面,下面來詳細介紹一下。
           

           01/     3D細胞培養

          ● VitroGel 3D
          VitroGel 3D培養的Betalox 5細胞優于普通2D培養,更易粘附形成細胞簇或成球,細胞生存能力增強。

          圖1

          數據來源:The Well

          ● VitroGel 3D長期培養優于Matrigel 

          B35細胞在分化后第3天開始擴散并形成神經元樣網絡結構,從細胞存活、培養擴散和形態學分析來看,第3天在VitroGel 3D和Matrigel 3D中培養的B35細胞效果相當。隨著培養天數的增加,到第七天VitroGel 3D中培養的B35細胞有自組織形成3D細胞簇的傾向,此時Matrigel中培養的B35細胞仍為分散的網絡結構;第14天在Matrigel中培養的細胞存活率急劇下降,大多數細胞分離,神經突回縮, VitroGel 3D中培養的細胞則無此現象。到第21天,Matrigel中培養的絕大多數細胞消失,VitroGel 3D中培養的細胞簇早已嵌入到水凝膠中,雖然細胞簇間的細胞數很少,但細胞無凋亡現象。

          圖2:神經元 (B35) 細胞在VitroGel 3D與Matrigel中長期培養的結果比較 (β- III -微管蛋白(綠色)標染細胞骨架,用DAPI(藍色)標染細胞核。)

          數據來源:The Well

          ● VitroGel 3D-RGD

          在VitroGel RGD中生長的OP9細胞更易形成細胞網絡結構。

          圖3:VitroGel RGD中培養第7天10x (左) 
          圖4:  VitroGel RGD中培養第7天20x (右)

          數據來源:The Well
           
           02/     體內注射

          ● VitroGel-3D-RGD

          VitroGel 3D-RGD形成的軟水凝膠,無任何外源性動物成分的引入,可作為良好的細胞移植支架。


          圖5:VitroGel-3D-RGD與NPMSC(髓核間充質干細胞)混合后,注射入動物體內示意圖

          VitroGel3D-RGD作為移植支架時提供的有利環境,能夠很好的維持移植細胞(NPMSC)的存活能力。移植的NPMSC均用熒光探針標記,使用活體成像技術(IVIS)檢測感興趣區域(ROI)的熒光值,以此分析移植細胞的存活率。移植第一天H-gel+cell組與單獨cell組相比無差異,移植第三十天時H-gel+cell組的存活率明顯高于cell組。
          圖6:移植第1天與第30天,細胞存活率比較

          相關文獻:

          Wang. F, et al. (2019). Injectable Hydrogel Combined with Nucleus Pulposus-Derived Mesenchymal Stem Cells for the Treatment of Degenerative Intervertebral Disc in Rats. Stem Cells International, 2019, 1–17.(點擊查看詳細內容)


           
           03/     體外評估細胞的遷移與生長能力

          ● VitroGel 3D-RGD
          相關文獻:

          Mahauad-Fernandez WD, et al. (2018). BST-2 promotes survival in circulation and pulmonary metastatic seeding of breast cancer cells. Scientific Reports, 8(1).(點擊查看詳細內容)

           

           04/     前列腺癌細胞系成球培養

          ● VitroGel 3D-RGD
          相關文獻:

          Di Donato, M, et al. (2019). Nerve Growth Factor Induces Proliferation and Aggressiveness in Prostate Cancer Cells. Cancers, 11(6), 784.(點擊查看詳細內容)
           

           05/    細胞毒檢測實驗

          ● VitroGel 3D-RGD

          相關文獻:


          Thanindratarn. P, et al.(2019).Establishment and Characterization of a Recurrent Osteosarcoma Cell Line: OSA 1777. Journal of Orthopaedic Research.(點擊查看詳細內容)
           
           06/     牙根尖乳頭干細胞(SCAP)培養
           

          ● VitroGel 3D


          相關文獻:
          Xiao. M, et al. (2019). Synergistic effects of stromal cell-derived factor-1α and bone morphogenetic protein-2 treatment on odontogenic differentiation of human stem cells from apical papilla cultured in the VitroGel 3D system. Cell and Tissue Research, 378(2), 207–220.(點擊查看詳細內容)
           
          VitroGel™相關產品列表
          發布者:美國PeproTech(派普泰克)公司
          聯系電話:40000 53055,0512 6832 5983
          E-mail:peprotech.infochina@thermofisher.com

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