MycoGuard™支原體檢測試劑盒的應用

孩子感冒咳嗽老不好，吃了抗生素也沒有用，小心是支原體惹的禍。

支原體與人類健康關系最為密切的有4種，即肺炎支原體、人型支原體、解脲支原體與生殖支原體。其中，肺炎支原體對寶寶的危害最大，是引發肺炎的禍首之一（后三者主要引起泌尿生殖道感染），稱為支原體肺炎。支原體一年四季都可侵襲寶寶，春季尤其猖獗，小自嬰兒大到學齡兒童都在其覬覦之中，體弱者大多難以幸免。

培養細胞時，發現細胞增殖變慢、形態漸漸改變，是血清或培養基的問題嗎？小心是支原體惹的禍。

除了危害人類健康，支原體荼毒科研也是臭名昭著。細胞污染可分為細菌、霉菌、酵母菌、支原體污染，其中支原體污染發生的概率>50%。特別是實驗室和細胞工廠在細胞培養過程中，一直受到支原體污染的困惑。今天小艾帶您一起揪出這危害人類健康以及荼毒科學研究的罪魁禍首——支原體。

什么是支原體

支原體又稱霉形體，直徑在0.1-0.3μm，是目前發現的最小的最簡單的原核生物，可以輕松地通過濾膜，混入培養系統中，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分支狀等多種形態。通常依附在細胞膜表面，支原體沒有剛性的細胞壁，因此普通的抗生素對它根本不起作用，實驗室常見的種類有：口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、發酵支原體、人型支原體、唾液支原體、肺支原體和梨支原體等。

支原體污染的后果

支原體污染后導致細胞生長變慢，狀態變差，不會馬上使細胞致死，但會影響細胞內的各種參數，如改變細胞膜抗原性，改變細胞新陳代謝，干擾核酸的合成，改變 DNA 轉染效率，導致染色體畸變等。

怎么知道您的細胞正遭受支原體摧殘呢，推薦以下檢測方法：

• PCR法支原體檢測：

GeneCopoeia PCR支原體檢測試劑盒是一種快速簡便的，以靈敏的PCR為基礎的支原體檢測試劑盒。該試劑盒包含經過優化的MycoGuard master mix、MycoGuard primer mix、超純水和陽性對照。MycoGuard primer mix中含有的的引物可特異擴增支原體基因組中rDNA保守序列，可檢測所有已知的支原體，包括細胞培養過程普遍遇到的種屬，例如M. arginini、M. arthritidis、M. bovis、M. fermentans、M. genitalium、M. hominis、M. hyorhinis、M. neurolyticum、M. orale、M. pirum、M. pneumoniae、M. pulmonis、M. salivarium 和U. urealyticum，本試劑盒能檢測包括以上常見支原體在內的50多種支原體。通過260bp到280bp長的PCR擴增產物，很容易識別被支原體污染的樣品。

支原體檢測試劑盒優勢：

※ 簡便

方便進行PCR反應

無需預處理細胞培養基

※ 快速

2小時即可完成檢測

※ 特異性強

只擴增支原體DNA，真核細胞和細胞DNA不被擴增

G：GeneCopoeia   A：競爭公司    M：100 bp DNA marker    N：陰性對照

• 生物化學發光法

MycoGuard™檢測試劑盒可快速、簡單檢測出細胞培養過程中存在的支原體。支原體被溶解后，釋放到培養基的支原體酶與 MycoGuardTM 底物相互反應，可催化 ADP 轉換為 ATP。ATP 含量的變化可通過生物發光的原理檢測，由 ATP 激發的熒光強度與 ATP 濃度呈線性關系。通過計 算樣本在添加底物前和添加底物后的 ATP 比率，可判斷樣品中是否存在支原體。

※ 操作時間短：半小時內即可完成實驗操作及檢測過程；

※ 靈敏度高：添加底物前，熒光數值穩定；添加底物后，熒光在10分鐘內達到穩定的線性增長；

※ 穩定性強：在不同的孵育時間條件下，底物濃度與熒光讀數的增長關系保持穩定

MycoGuard™支原體檢測試劑盒與某公司同類試劑盒的靈敏度對比   兩家公司的產品分別檢測含支原體污染的L-15培養基以及陰性對照的培養基 (GCI: 紅&綠；某公司: 深藍&淺藍)。添加底物后，兩家公司的檢測試劑盒在支原體污染的樣品中均有較明顯的數值攀升，且數值上升趨勢穩定。GeneCopoeia (GCI)的試劑盒在陰性對照中，添加底物后的數值基本不變，比競爭對手公司的數值更穩定。

GeneCopoeia致力于為國內生命科學工作者提供一流的產品和及時周到的服務，通過豐富的基因、蛋白、抗體、分析試劑盒等產品線，加速您的研究進程。作為GeneCopoeia在中國的區域一級代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的GeneCopoeia產品以及客戶訂制化服務。

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