重組CHO細(xì)胞分離及蛋白收獲技術(shù)介紹

現(xiàn)今，通過(guò)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，新一代生物制藥得到了前所未有的發(fā)展。本文主要介紹通過(guò)中空纖維微孔過(guò)濾，以分離哺乳動(dòng)物分泌蛋白的過(guò)程。起始濃度為2×10⁵ cell/ml，細(xì)胞外蛋白產(chǎn)物是一種與白介素-2相似的10kD淋巴因子，是一種潛在的腫瘤治療藥物。該應(yīng)用需要去除細(xì)胞和顆粒，而不裂解細(xì)胞，同時(shí)達(dá)到較高的蛋白回收率。由于產(chǎn)品為熱不穩(wěn)定，所以處理時(shí)間非常關(guān)鍵。

KrosFlo中空纖維過(guò)濾組件

工藝條件：

鑒于細(xì)胞濃度較低，600L的處理量通常只需要膜表面積為2-3m² 的過(guò)濾器。但該處理要求的時(shí)間較短，所以平行安裝了2個(gè)0.2 µm 截留分子量的KrosFlo組件，每個(gè)膜表面積為3.3 m² 。預(yù)計(jì)循環(huán)速度為70 L/min。過(guò)濾器進(jìn)口壓力固定為5 psig。當(dāng)過(guò)濾量達(dá)到處理量30%時(shí)，在過(guò)濾器出口施加10psig背壓，即將過(guò)濾器進(jìn)口壓力上升為15psig左右。除了小的調(diào)整之外，所有條件在處理過(guò)程中保持不變。