人妊娠相關(guān)漿蛋白A(PAPPA)化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒基本原理及操作步驟

產(chǎn)品描述

基本原理

本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Human PAPPA抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的PAPPA會(huì)與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗Human PAPPA抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗Human PAPPA抗體與結(jié)合在包被抗體上的Human PAPPA結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液，發(fā)光底物在辣根過(guò)氧化物酶的催化下發(fā)出熒光，用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測(cè)定化學(xué)發(fā)光值（CL），PAPPA濃度與化學(xué)發(fā)光值之間呈正相關(guān)，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中PAPPA的濃度。

操作步驟

1.在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各 100μL，37℃孵育90分鐘

2. 倒去孔內(nèi)液體，拍干，加入 100μL  生物素化抗體工作液，37℃孵育 60 分鐘

3. 洗滌 3 次

4. 加入 100μL 酶結(jié)合物工作液， 37℃孵育 30 分鐘

5. 洗滌 5 次

6. 加入 100μL 底物溶液， 37℃孵育 5 分鐘左右

7. 讀數(shù)

8. 結(jié)果計(jì)算