PURELAB flex（配生物過濾器）可以清除內毒素、RNase、DNase和細菌

PURELAB flex（配ELGA生物過濾器）性能規格   • 內毒素 <0.001 EU/ml   • RNase <0.002 ng/ml   • DNase <20 pg/ml (<0.02 pg/μl)   • 細菌 <10 CFU/100ml（<0.1 CFU/ml） PURELAB flex以純水或自來水做進水連續生產超純水。 安裝ELGA LabWater生物過濾器后，即可生產去除了生物活性雜質的超純水。 去除了生物活性雜質的超純水適于細胞培養等生物化學和分子生物學 應用。

內毒素 內毒素是革蘭氏陰性活菌外膜脫落的脂多糖。 細菌細胞死亡時釋放出內毒素。 內毒素與細胞相互作用，造成多種不利影響（參考文獻1Dawson和參考文獻2　Nagano）。 內毒素對試管內受精（參考文獻3　Dumoulin）和細胞培養（參考文獻4　Stacey）等其他應用影響很大。 實驗（細胞分裂、電泳及其他生化工藝等）可靠性的提高得益于內毒素的清除。 在pH >2 時，內毒素帶負電，使用ELGA LabWater生物過濾器等帶正電過濾器可將其有效清除。帶電的過濾器對水流構成的障礙最小，最適合作為純水系統的終端過濾器。

內毒素挑戰實驗
對生物過濾器的挑戰實驗是向帶正電的過濾器進水中不斷注入高含量的內毒素，然后采用鱟變形細胞溶解物試驗（動態濁度法）測量產水中的內毒素濃度。

大多數的內毒素挑戰實驗均要使用凈化的LPS。 ELGA LabWater的科研團隊從純水中已有的細菌中生產出自己的LPS。 這是為了模仿逼真的挑戰實驗環境。

首先從純水中分離出細菌。然后將細菌接種到蛋白胨水中，在27℃的溫度下培養。對樣品反復進行加熱處理，用0.45μm 過濾膜進行過濾，由此得到濃縮的內毒素。

每個挑戰實驗持續5分鐘，得出以下總挑戰實驗結果：即使挑戰實驗超過了90 EU/ml，總挑戰實驗接近800000 EU，在生物過濾器后的產水中也未能檢測出內毒素（<0.001EU/ml）。

實際上，過濾器的進水中內毒素的含量極低（<0.1EU/ml）。為了更逼真地模仿實際情況，以內毒素含量為1EU/ml（標稱）的純水做進水，對生物過濾器做長時間的測試：在流過800升后仍未能檢出內毒素（<0.001EU/ml）。

DNase與RNase
很多人擔心純水中可能存在RNase與DNase等其他生物活性雜質。

純水中存在此類雜質可能會給實驗帶來嚴重的干擾。但是，離子交換樹脂和紫外燈可將其去除。定期殺菌和維護的設計獨特的純水系統，其產水中不含此類雜質。

本檢測使用增強版Ambion® Alert測試程序，該程序基于檢測可裂解熒光標記RNase或DNase基質。 測試結果表明RNase的檢測含量較低，達到 <0.002 ng/ml，DNase的含量為<20 pg/ml。即使此類雜質很高，PURElAB flex（配生物過濾器）也能有效地去除了RNase和DNase（RNase<0.002 ng/ml，DNase<0.02 ng/ml）。PURELAB flex（配生物過濾器）生產的純水可以替換限制使用二乙基焦碳酸（DePc）做水處理的情況（按照ELGA LabWater的建議，其對殺菌與維護有限制）。

TOC與電阻率沖洗
在從設備的產水中清除任何內毒素的同時，該生物過濾器必須不對水造成污染。 新過濾器首次使用時，快速電阻率與TOC沖洗十分方便；同時，也清楚表明其對產水的污染會始終很低。 這一點很重要，因為通過過濾器的產水純度是無法監測的。生物過濾器的TOC與電阻率快速沖洗如下所示：

新的生物過濾器的TOC與電阻率沖洗

細菌挑戰實驗
在PURELAB flex內，純水循環流過紫外燈，接受254和185nm的強紫外線照射，將細菌含量控制在極低水平。采用具有0.2μm細菌過濾能力的生物過濾器將剩余的微量細菌清除掉。在使用內含1 x 107 CFU/ml的料液進行細菌挑戰實驗時，生物過濾器完全清除了細菌：等效于對數減少系數>8。

下圖顯示了在6個月中，純水系統（配有生物過濾器）產水總活菌數（TVC）的典型數值。

總結
PURELAB flex（配生物過濾器）可極其有效地生產無生物活性雜質的超純水，因此，適用于使用無內毒素超純水、無細菌水及無核酸酶超純水等的應用。

參考文獻
文獻1： Dawson Me (1998) lAl update. Associates of cape cod; Vol. 16: 1-4
文獻2： Ref 2: nagano M, Takahashi y, Katagiri S (1999) J. Reprod. Dev.; 45: 239-242
文獻3： Dumoulin Jc, Menheere PP, evers Jl (1991) human Reproduction; 6: 730-734
文獻4： Stacey g (2007) in Medicines from Animal cell culture. Stacey g, Davis J. John Whiley &Sons, chichester, chapter 31

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