QuickAntibody免疫佐劑使用中已經遇到的問題以及答復
使用中已經出現的問題：
1、有客戶沒有仔細閱讀說明書，使用QuickAntibody佐劑時按照弗式佐劑方法與抗原進行乳化等操作，并在4度冰箱放置過夜，第二日取出直接免疫，結果造成效價不理想。
答復：QuickAntibody佐劑無需乳化，而且無論是佐劑本身還是與抗原混合后，長時間靜置均易產生沉淀，因此均需要搖勻后才能配制和注射。
2、有客戶沒有仔細閱讀說明書，使用QuickAntibody佐劑之前發現佐劑里面有沉淀成分，以為是污染物，離心去除，導致實驗結果效價不理想。
答復：QuickAntibody佐劑產生沉淀為正常現象，只需在用前搖勻即可，若離心去除，必然影響免疫效果。
3、有客戶使用QuickAntibody佐劑免疫小鼠后腿小腿肚肌肉時，誤把踝關節當成膝關節，從而使免疫部位太過偏下，免疫100ul的佐劑與抗原混合液時，大量液體流出。
答復：小鼠后腿大腿一般被腹部皮膚包裹，我們正常見到的后腿肌肉部分為小腿肌肉。另外若免疫至踝關節，由于免疫部位距離發生有效免疫應答部位較遠，抗原在擴散至淋巴結前容易被降解，導致免疫應答效率降低。
4、有客戶使用QuickAntibody佐劑免疫小鼠，因動物較多，免疫時間較長，最后佐劑在針管中沉淀在管壁，導致前面免疫的小鼠抗體效價較高，后面免疫的小鼠抗體效價較低。
答復：QuickAntibody佐劑易產生沉淀，建議在熟練使用之前，每次抽取較少量佐劑與抗原混合物進行免疫（以二、三只小鼠用量為佳）；在操作熟練后，可以適當增加免疫動物的數量（如每抽取一次免疫五只以上小鼠）。
5、有客戶使用QuickAntibody佐劑制備單抗，抗原為多肽偶聯載體蛋白，免疫兩針后針對多肽的ELISA滴度僅為1:200，但是成功融合出4株雜交瘤細胞株，其中兩株產生的單抗可以做免疫組化，完全達到他們的預期結果！
答復：我們說明書中所說的效價為蛋白抗原免疫后的效價，對于多肽和小分子來說，免疫后不可能達到如此高的滴度！原因是多肽和小分子為半抗原，本身只有一個表位或不足一個表位，而蛋白抗原有成百上千個表位。建議客戶檢測針對載體蛋白的ELISA滴度，如果達到說明書滴度范圍，而且檢測到一定水平的多肽或小分子滴度，則表明免疫成功，完全可以繼續后續的融合工作。此時多肽或小分子滴度高低取決于該表位的免疫原性和偶聯效率，基本與佐劑無關！然而，與蛋白抗原相比，多肽或小分子單抗的陽性克隆率則要低得多，因此客戶需要篩選更多的克隆。
