熒光染料-CFSE活細胞標記的特點

熒光染料CFSE(CFDA-SE)，是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細胞膜，在活細胞內與胞內蛋白共價結合，水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中，它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半，根據這一特性，它可被用于檢測細胞增殖，細胞周期的估算及細胞分裂等方面。另外，CFSE標記的細胞用于體內觀察可以長達數周之久，它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。熒光探針CFSE進入細胞后定位于細胞膜、細胞質和細胞核，在細胞核的熒光染色最強，并證實CFSE不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患。可以更快速，更準確和更安全的得到想要的實驗數據。
CFSE：羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯(5- or 6-(N-Succinimidyloxycarbonyl)-3',6'-O,O'-diacetylfluorescein)

優點：
1.      活體標記：可以追蹤細胞在體內的分裂增殖過程。
2.      時間長：標記的熒光可以維持長達數周之久。
3.      安全：不需使用放射性同位素。
4.      相關性高：與H3摻入法結果一致，可代替后者。
5.      特定跟蹤：可以與細胞亞群特定抗體結合使用。
6.      簡單：操作簡單，可靠。
7.      穩定：進入細胞后熒光不受內環境影響。
8.      結果客觀：對細胞生理活動沒有任何影響。
9.      經濟實惠：費用經濟，效率高。

用途：
1.       細胞增殖檢測（尤其是淋巴細胞的增殖檢測）。
2.       體內示蹤。
3.       細胞熒光標記。
4.       細胞毒性檢測。

其他：
1.      檢測儀器：熒光電鏡，流式細胞儀，CO2培養箱，移液器等
2.      激發波長：500nm
3.      發射波長：520nm