從檢測(cè)原理到儀器選型，不溶性微粒檢測(cè)方法的全攻略梳理

• 高速高效：分析速度快，數(shù)分鐘內(nèi)即可完成一個(gè)樣品的檢測(cè)和數(shù)據(jù)分析。
• 精準(zhǔn)計(jì)數(shù)：可提供精確的粒徑分布和顆粒計(jì)數(shù)，滿(mǎn)足藥典的定量要求。
• 自動(dòng)化程度高：易于集成自動(dòng)進(jìn)樣器，實(shí)現(xiàn)大批量樣品的無(wú)人值守檢測(cè)。
• 數(shù)據(jù)完整性好：現(xiàn)代儀器軟件通常符合GMP/GLP規(guī)范，確保數(shù)據(jù)可追溯、不可篡改。

• 對(duì)樣品性狀敏感：對(duì)于乳濁液、脂質(zhì)體等本身對(duì)光有較強(qiáng)散射或吸收的樣品（如乳劑、有色溶液），檢測(cè)背景高，信噪比差，結(jié)果易受干擾。
• 形狀假設(shè)：原理上假設(shè)顆粒為球形，對(duì)于纖維狀、片狀等非球形顆粒，其等效粒徑與真實(shí)尺寸可能存在偏差。
• 重合效應(yīng)：在高濃度樣品中，多個(gè)顆粒可能同時(shí)通過(guò)檢測(cè)區(qū)，被誤判為一個(gè)大顆粒，需要儀器具備自動(dòng)稀釋或重合誤差校正功能。

• 運(yùn)作原理：將一定體積的樣品溶液通過(guò)真空抽濾，使其中的不溶性微粒被截留在特定孔徑的微孔濾膜上。然后將濾膜干燥，置于顯微鏡下，由操作人員人工觀(guān)察、計(jì)數(shù)并測(cè)量微粒的尺寸。

• 直觀(guān)可靠：可直接觀(guān)察到微粒的真實(shí)形貌、顏色和狀態(tài)，有助于進(jìn)行異物來(lái)源的調(diào)查和根因分析。
• 通用性強(qiáng)：幾乎適用于所有類(lèi)型的樣品，尤其適用于光阻法難以檢測(cè)的乳劑、粘稠、有色或不透明的溶液。
• 方法權(quán)威：作為仲裁方法，當(dāng)其他方法結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí)，以顯微法結(jié)果為最終判斷依據(jù)。

• 效率極低：操作流程繁瑣，包括過(guò)濾、干燥、轉(zhuǎn)移、計(jì)數(shù)等多個(gè)步驟，耗時(shí)耗力。
• 主觀(guān)性強(qiáng)：結(jié)果嚴(yán)重依賴(lài)操作人員的經(jīng)驗(yàn)和判斷，不同操作者之間的重現(xiàn)性較差。
• 統(tǒng)計(jì)代表性不足：由于是人工計(jì)數(shù)，通常統(tǒng)計(jì)的微粒數(shù)量有限，可能影響結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

• 運(yùn)作原理：樣品懸浮在電解液中，在負(fù)壓作用下流過(guò)一個(gè)小孔。小孔兩側(cè)各有一個(gè)電極。當(dāng)每個(gè)不導(dǎo)電的微粒通過(guò)小孔時(shí)，會(huì)瞬間排開(kāi)相同體積的電解液，導(dǎo)致小孔兩側(cè)的電阻發(fā)生躍變，產(chǎn)生一個(gè)電脈沖。脈沖的次數(shù)代表顆粒的個(gè)數(shù)，脈沖的幅度與微粒的體積成正比。

• 分辨率極高：能夠清晰區(qū)分粒徑非常接近的顆粒，精度優(yōu)于光阻法。
• 原理直接：測(cè)量結(jié)果直接與顆粒體積相關(guān)，不受顆粒光學(xué)性質(zhì)、顏色、形狀（假設(shè)為球形）的影響。

• 樣品要求苛刻：必須懸浮在導(dǎo)電的電解液中，且電解液需要與樣品相容，不引起變化。
• 易堵塞：小孔非常精細(xì)，樣品中的大顆粒或纖維極易造成堵塞。
• 粒徑范圍受限：小孔尺寸決定了其檢測(cè)的粒徑范圍，更換不同孔徑的小孔可以改變量程，但操作不便。

二、 檢測(cè)方法與藥典需求的匹配 
當(dāng)前藥典（如USP <788>、ChP 0903）的核心要求是針對(duì)注射劑，測(cè)定≥10μm和≥25μm的微粒濃度限度。三種方法與藥典需求的匹配關(guān)系如下：

• 光阻法是主力軍：​ 因其高效、精準(zhǔn)和良好的數(shù)據(jù)完整性，成為絕大多數(shù)透明溶液制劑進(jìn)行常規(guī)質(zhì)控和放行的首選方法。儀器制造商（如美國(guó)PSS、國(guó)內(nèi)的胤煌科技等）的設(shè)備均以確保通過(guò)藥典的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)為核心設(shè)計(jì)目標(biāo)。
• 顯微計(jì)數(shù)法是必要的補(bǔ)充和仲裁者：​ 當(dāng)樣品不適用于光阻法時(shí)，藥典規(guī)定需采用顯微計(jì)數(shù)法。自動(dòng)化顯微系統(tǒng)的出現(xiàn)（如胤煌科技的產(chǎn)品），通過(guò)機(jī)器視覺(jué)技術(shù)部分克服了傳統(tǒng)方法的劣勢(shì)，使其重新成為可靠的選項(xiàng)。
• 庫(kù)爾特法是特定領(lǐng)域的專(zhuān)家：​ 藥典中未將其列為注射劑微粒檢測(cè)的常規(guī)方法，但其高精度特性使其在疫苗、細(xì)胞治療產(chǎn)品等生物制劑的顆粒表征中發(fā)揮重要作用。