OK-432促進(jìn)NK細(xì)胞的體外擴(kuò)增的原理及優(yōu)勢

OK432（AbMole，M9414）是一種經(jīng)青霉素處理并冷凍干燥制成的溶血性鏈球菌Su株制劑，其主要成分為滅活的鏈球菌菌體及代謝產(chǎn)物，包含蛋白質(zhì)、肽類、多糖等多種活性成分。在NK細(xì)胞培養(yǎng)體系中，OK432主要作為免疫調(diào)節(jié)劑發(fā)揮作用，通過激活固有免疫信號通路，促進(jìn)NK細(xì)胞的活化、增殖及功能成熟。這種源于微生物的生物活性物質(zhì)，為體外NK細(xì)胞的規(guī)模化培養(yǎng)提供了一種高效的刺激方案^[1]。
 
NK細(xì)胞作為天然免疫系統(tǒng)的關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞，可以清除病原體和腫瘤細(xì)胞，以此原理誕生了NK細(xì)胞過繼法（Adoptive NK Cell Therapy）以抑制腫瘤。其中NK細(xì)胞的體外擴(kuò)增效率和功能狀態(tài)直接影響其后繼的研究應(yīng)用。傳統(tǒng)NK細(xì)胞作培養(yǎng)方法依賴飼養(yǎng)層細(xì)胞和多種細(xì)胞因子的組合，存在成本高、操作復(fù)雜等問題。OK432（AbMole，M9414）的獨(dú)特之處在于其能模擬微生物感染信號，通過激活Toll樣受體（TLR）家族成員（主要是TLR4），觸發(fā)下游NF-κB、AMPK等信號通路，從而誘導(dǎo)NK細(xì)胞進(jìn)入激活狀態(tài)^[2]。傳統(tǒng)NK細(xì)胞培養(yǎng)方法如K562飼養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)，是通過基因工程改造表達(dá)4-1BBL和IL-15等膜結(jié)合因子的K562細(xì)胞作為滋養(yǎng)層，為NK細(xì)胞提供持續(xù)刺激信號。這種方法目前存在細(xì)胞污染這一致命缺陷：雖然K562飼養(yǎng)細(xì)胞通常會經(jīng)過輻照處理使其無法增殖，但小部分細(xì)胞仍然具有增殖能力，并且可能帶來飼養(yǎng)細(xì)胞污染；此外，如果起始的外周血單核細(xì)胞中混有T細(xì)胞，K562飼養(yǎng)細(xì)胞還會促進(jìn)T細(xì)胞的增殖，帶來額外的T細(xì)胞污染。OK432相比傳統(tǒng)方法具有顯著優(yōu)勢：首先，無需飼養(yǎng)細(xì)胞即可實(shí)現(xiàn)高效擴(kuò)增，規(guī)避了細(xì)胞共培養(yǎng)的污染隱患；其次，單次刺激即可維持7-10天的增殖活性，減少操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)。OK432（AbMole，M9414）在結(jié)合某些細(xì)胞因子，如IL-2（AbMole，M10296）可以進(jìn)一步促進(jìn)NK細(xì)胞的擴(kuò)增。有研究表明NK細(xì)胞在含有700 U/mL IL-2和0.01 KE/mL OK432的培養(yǎng)基中培養(yǎng)21天后，平均擴(kuò)增了637.5倍，這種擴(kuò)增效率遠(yuǎn)優(yōu)于僅涉及細(xì)胞因子組合的擴(kuò)增系統(tǒng)^[3]。
 
參考文獻(xiàn)及鳴謝
[1] Zhao-Liang Hu, Eiro Kubota, Hideo Imamura, et al., Effective induction of human NK cells with OK-432 and further augmentation of their cytolytic function by rIL-2, 38(3) (1994) 183-190.
[2] Benjamin Bonavida, Jonathan Katz, Takashi %J Cellular immunology Hoshino, Mechanism of NK activation by OK-432 (Streptococcus pyogenes): I. Spontaneous release of NKCF and augmentation of NKCF production following stimulation with NK target cells, 102(1) (1986) 126-135.
[3] H. T. M. Nhung, B. V. Anh, T. L. Huyen, et al., Ex vivo expansion of human peripheral blood natural killer cells and cytotoxic T lymphocytes from lung cancer patients, Oncology letters 15(4) (2018) 5730-5738.