兔ELISA試劑盒的靈敏度的評(píng)估方法
評(píng)估兔ELISA試劑盒的靈敏度需結(jié)合實(shí)驗(yàn)參數(shù)與質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，具體方法如下：
一、最低檢測限（LLOD）
通過標(biāo)準(zhǔn)曲線確定，通常為空白孔OD均值+2倍標(biāo)準(zhǔn)差對(duì)應(yīng)的濃度。需注意廠商標(biāo)注的靈敏度可能基于理論值，實(shí)際應(yīng)以試劑盒附帶的質(zhì)檢報(bào)告為準(zhǔn)（如R²≥0.99的標(biāo)曲數(shù)據(jù)）。
二、功能靈敏度（FS）
定義為變異系數(shù)（CV）≤20%的最低濃度，反映實(shí)際檢測的可靠性。批內(nèi)CV應(yīng)<10%，批間CV<15%。
三、動(dòng)態(tài)范圍與線性驗(yàn)證
標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍需覆蓋預(yù)期樣本濃度（如0-1000 pg/mL），線性回歸R²≥0.99。
高濃度樣本需驗(yàn)證稀釋線性（回收率80%~120%）。
四、交叉反應(yīng)與特異性
檢測類似蛋白的交叉反應(yīng)率（如兔IL-6試劑盒需驗(yàn)證IL-1β干擾），要求<10%。
五、回收率與天然樣本驗(yàn)證
回收率≥80%表明準(zhǔn)確性良好。
需驗(yàn)證試劑盒對(duì)兔血清、血漿等天然樣本的適用性。
六、穩(wěn)定性與批間一致性
長期存放穩(wěn)定性需符合廠商標(biāo)注（如6個(gè)月有效期）。
批間CV<15%確保結(jié)果重現(xiàn)性。
七、實(shí)操建議
1、關(guān)注標(biāo)準(zhǔn)曲線：選擇時(shí)優(yōu)先看曲線上的最小濃度值，而非說明書標(biāo)注的靈敏度，低于該值結(jié)果可能存在偏差。
2、樣本適配性：若待測樣本中目標(biāo)蛋白濃度低，需選擇高靈敏度試劑盒；高濃度樣本對(duì)靈敏度要求相對(duì)較低。
3、參考說明書：不同試劑盒可能需采用不同方法，具體操作應(yīng)根據(jù)說明書和相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。
一、最低檢測限（LLOD）
通過標(biāo)準(zhǔn)曲線確定，通常為空白孔OD均值+2倍標(biāo)準(zhǔn)差對(duì)應(yīng)的濃度。需注意廠商標(biāo)注的靈敏度可能基于理論值，實(shí)際應(yīng)以試劑盒附帶的質(zhì)檢報(bào)告為準(zhǔn)（如R²≥0.99的標(biāo)曲數(shù)據(jù)）。
二、功能靈敏度（FS）
定義為變異系數(shù)（CV）≤20%的最低濃度，反映實(shí)際檢測的可靠性。批內(nèi)CV應(yīng)<10%，批間CV<15%。
三、動(dòng)態(tài)范圍與線性驗(yàn)證
標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍需覆蓋預(yù)期樣本濃度（如0-1000 pg/mL），線性回歸R²≥0.99。
高濃度樣本需驗(yàn)證稀釋線性（回收率80%~120%）。
四、交叉反應(yīng)與特異性
檢測類似蛋白的交叉反應(yīng)率（如兔IL-6試劑盒需驗(yàn)證IL-1β干擾），要求<10%。
五、回收率與天然樣本驗(yàn)證
回收率≥80%表明準(zhǔn)確性良好。
需驗(yàn)證試劑盒對(duì)兔血清、血漿等天然樣本的適用性。
六、穩(wěn)定性與批間一致性
長期存放穩(wěn)定性需符合廠商標(biāo)注（如6個(gè)月有效期）。
批間CV<15%確保結(jié)果重現(xiàn)性。
七、實(shí)操建議
1、關(guān)注標(biāo)準(zhǔn)曲線：選擇時(shí)優(yōu)先看曲線上的最小濃度值，而非說明書標(biāo)注的靈敏度，低于該值結(jié)果可能存在偏差。
2、樣本適配性：若待測樣本中目標(biāo)蛋白濃度低，需選擇高靈敏度試劑盒；高濃度樣本對(duì)靈敏度要求相對(duì)較低。
3、參考說明書：不同試劑盒可能需采用不同方法，具體操作應(yīng)根據(jù)說明書和相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。
- mIHC技術(shù)在解碼腫瘤微環(huán)境及標(biāo)志物檢測中的應(yīng)用及優(yōu)勢(shì)
- 檢測激素的ELISA試劑盒類型、特點(diǎn)及原理
- 美德聲常規(guī)和全面稀有血型試劑選型指南
- 膜性腎病利妥昔單抗耐藥的原因及對(duì)策
- PRO-C6成為預(yù)測COVID-19重癥患者死亡風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)鍵血清標(biāo)志物
- 前沿速遞 ：PRO-C6或是COL6-RD表型異質(zhì)性難題的破局關(guān)鍵
- 實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型抗原選擇全攻略
- 免疫組化在病理診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值與意義
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com