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          實驗數據說話:不同型號超聲波DNA打斷儀的實際效果對比

          瀏覽次數:1381 發布日期:2025-2-17  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
          實驗目的:將全基因組DNA樣品進行200-500bp區間的均一性片段化處理。

          實驗儀器及材料:
          1.實驗儀器:本次實驗選用三款非接觸打斷儀器如下:小美超聲-高通量聲波基因組剪切儀、bioruptor-非接觸式超聲破碎儀、小美超聲-聚能式超聲波DNA打斷儀。
           
          2.實驗材料:核酸濃度為160 ng/μL的全基因組DNA溶液。

          實驗步驟:  
          1.提前15分鐘將三款儀器的冷水機啟動,設置溫度為4℃。
          2.將每個愛思進品牌的1.5 mL EP管加入100 μL 濃度為160 ng/μL的全基因組DNA溶液。
          3.將2管裝好樣品的1.5 mL EP 管分別放入三款儀器的適配器當中,其他空余的孔位由加同樣體積水的1.5 mL EP 管補齊。
          4.程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長15分鐘和20分鐘,二個梯度對比。
          5.程序結束后,取出樣品使用毛細管電泳進行基因組片段化檢測。

          實驗結果:
          1.小美超聲-高通量聲波基因組剪切儀
          ①程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長15分鐘
          平均片段大。310.0 bp

           

           
          片段范圍 bp 占比 %
          25-100 4
          100-200 21.3
          200-500 64.7
          500-904 10

          ②程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔10s,總時長20分鐘 
          平均片段大。300.1 bp

           
           
          片段范圍 bp 占比 %
          25-100 4.2
          100-200 22.7
          200-500 64.3
          500-904 8.8

          2.bioruptor-非接觸式超聲破碎儀
          ①程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長15分鐘
          平均片段大小:432.9 bp

           

           
          片段范圍 bp 占比 %
          24-100 1.4
          100-200 7.8
          200-500 58.3
          500-891 32.5

          ②程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長20分鐘
          平均片段大。405.8 bp

           
           
           
          片段范圍 bp 占比 %
          24-100 1.5
          100-200 9.5
          200-500 63.2
          500-904 25.8

          3.小美超聲-聚能式超聲波DNA打斷儀
          ①程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長15分鐘
          平均片段大。365.5 bp

           

           
          片段范圍 bp 占比 %
          24-100 2.1
          100-200 13.6
          200-500 65.4
          500-904 18.9

          ②程序設置:溫度4℃,超聲工作時間20s 間隔時間10s,總時長20分鐘
          平均片段大。388.1 bp

           

           
          片段范圍 bp 占比 %
          24-100 1.9
          100-200 12.3
          200-500 62.2
          500-904 23.6

          4.三款儀器實驗結果匯總
           
            總時長15分鐘
          200-500 bp區間占比
          總時長20分鐘
          200-500 bp區間占比
          峰圖趨勢
          小美超聲-高通量聲波基因組剪切儀 64.7% 64.3% 平緩
          bioruptor-非接觸式超聲破碎儀 58.3% 63.2% 陡坡
          小美超聲-聚能式超聲波DNA打斷儀 65.4% 62.2% 陡坡

          注:當基因組片段在200-500 bp區間占比越高,峰圖越平緩狀時,說明基因組片段的均一性更好,反之亦然。

          在樣品、程序設定等條件相同的情況下,bioruptor的非接觸式超聲破碎儀和小美超聲的聚能式超聲波DNA打斷儀在200-500 bp區間占比分別達到58.3%和65.4%,且二者峰圖呈陡坡狀,表明基因組片段化均一性差。

          小美超聲的高通量聲波基因組剪切儀在200-500 bp區間占比達到64.7%,峰圖呈平緩狀,表明基因組片段均一性更好。
          發布者:上海凈信實業發展有限公司
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