瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)及凝膠成像分析系統(tǒng)使用過程中的注意事項(xiàng)

瓊脂糖凝膠電泳分子生物學(xué)常用的實(shí)驗(yàn)方法，那么在凝膠電泳過程中需要注意哪些事項(xiàng)呢？

一、切膠時(shí)的注意事項(xiàng)
1. 盡量保證電泳的buffer和gel都是新制的，切膠的臺(tái)子清理干凈，刀片也要洗凈，確保切下的沒有外源dna污染。
 
2. 為了減少膠的體積，可以用相對(duì)比較薄的膠來做，只要夠點(diǎn)樣即可，也可采用薄而寬的梳子來跑膠。
 
3. 關(guān)于防護(hù)，戴一般有機(jī)玻璃眼罩就足夠了，戴上防護(hù)面具也以保護(hù)眼睛，如果戴樹脂眼鏡就可以了。要是非常害怕紫外照射，或者對(duì)于膠有特殊要求，例如要求不含EB，可以采用點(diǎn)marker和帶刻度的尺子一起照相的方法來確定目的條帶在膠上的位置進(jìn)行切膠。
 
4. 按照正常程序點(diǎn)marker跑膠，然后切下有marker的膠，EB染色，紫外燈下與帶刻度的尺子一起照相。由于要回收的帶與marker間的相對(duì)位置已知，根據(jù)尺子來衡量未染色膠上目的帶的位置即可。如果覺得很難判斷，可以直接在marker邊點(diǎn)少量的樣，這樣位置就容易確定了。
 
二、使用凝膠成像分析系統(tǒng)時(shí)的注意事項(xiàng)
 
凝膠成像分析系統(tǒng)：可以應(yīng)用在蛋白電泳凝膠，DNA凝膠，樣品進(jìn)行圖象采集并進(jìn)行定性和定量分析，樣品包括：EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監(jiān)測(cè)；以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質(zhì)凝膠如考染等。（或UV,EB和有色及可見樣品成像）
 
使用時(shí)需要注意以下幾個(gè)方面：
• 注意開機(jī)順序，先開凝膠成像系統(tǒng)，再打開電腦進(jìn)入軟件。
• 紫外凝膠照相時(shí)要防止EB 污染儀器，凝膠成像系統(tǒng)的門不能用污染的手套接觸，進(jìn)行軟件操作時(shí)同樣不能被污染的手套接觸。
• 在使用紫外光源照相的過程中，不可以打開凝膠成像系統(tǒng)前面板。
• 照相后經(jīng)廢膠取出，并用較軟的紙擦拭干凈。
• 調(diào)焦時(shí)要輕，動(dòng)作不要?jiǎng)×摇?br /> • 環(huán)境電壓不穩(wěn)定時(shí)，請(qǐng)使用穩(wěn)壓電源。使用過程中如遇斷電，請(qǐng)及時(shí)將儀器電源關(guān)閉，直至重新來電。
•  使用時(shí)，請(qǐng)先打開儀器的電源開關(guān)，再打開電腦開關(guān)并打開軟件（ Quantity One ）。
•  保持觀測(cè)室內(nèi)環(huán)境干燥，及時(shí)將遺留在觀測(cè)板上的水或其他液體檫干（可使用軟質(zhì)紙，一般卷紙即可）。
•  觀測(cè)用EB（溴乙錠）染色的凝膠時(shí)，注意不要污染儀器表面。千萬不要用手直接接觸凝膠，或戴著接觸過凝膠的手套去接觸儀器的門和觀測(cè)臺(tái)的把手。
•  使用儀器時(shí)，要將門及觀測(cè)臺(tái)關(guān)緊，否則將無法正常使用紫外燈。
•  盡可能不要將電腦連接到因特網(wǎng)或局域網(wǎng)上，同時(shí)在電腦上安裝殺毒軟件（推薦使用正版軟件），做到專機(jī)專用。
•  較長(zhǎng)時(shí)間不用儀器時(shí)，請(qǐng)將儀器用防塵罩蓋上。
•  為延長(zhǎng)燈管的使用壽命，請(qǐng)觀測(cè)好凝膠后及時(shí)關(guān)閉光源（儀器自身有 15 分鐘的自動(dòng)保護(hù)程序）。
   
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