多重?zé)晒饷庖呷旧夹g(shù)的原理及實(shí)驗(yàn)步驟（對(duì)話ChatGPT）
最近的網(wǎng)絡(luò)好像被人工智能聊天系統(tǒng)——ChatGPT占領(lǐng)了，聽(tīng)說(shuō)它無(wú)所不知，還能幫寫(xiě)文章，各大高校緊急禁用；還聽(tīng)說(shuō)未來(lái)很多人的工作都會(huì)被它取代，那小編作為技術(shù)支持豈不是很危險(xiǎn)？等不了了，立刻發(fā)起挑戰(zhàn)！
咦！它還真知道點(diǎn)什么！回答得也還不錯(cuò)誒。繼續(xù)試試！
錯(cuò)了錯(cuò)了，它犯了所有懂又不完全懂的人最容易犯的錯(cuò)，跟免疫熒光（IF）混淆了，免疫熒光確實(shí)也能夠?qū)崿F(xiàn)多個(gè)指標(biāo)的共染色，但是因?yàn)樾枰餐跤豢梗悦總�(gè)指標(biāo)對(duì)應(yīng)的一抗都不能是同種來(lái)源，并且熒光素是直接結(jié)合在二抗上，所以還要搭配對(duì)應(yīng)的熒光二抗，目前市面上也就那么幾種一抗來(lái)源，所以直接局限了免疫熒光可以實(shí)現(xiàn)的多標(biāo)數(shù)量，基本就是雙標(biāo)頂多三標(biāo)。算了，還是我來(lái)給它點(diǎn)小小的提示吧！
這回對(duì)了，多重?zé)晒饷庖呓M化的核心是TSA技術(shù)，又是熒光又是組化的，也難怪ChatGPT迷茫了，小編給各位老師展示幾個(gè)原理圖幫助理解吧~
其實(shí)ChatGPT還是有一點(diǎn)回答得不夠準(zhǔn)確，活化的熒光染料不止結(jié)合到抗體周?chē)歉鞍讱埢ɡ野彼帷⑸彼帷⒔M氨酸、苯丙氨酸等芳香族氨基酸）共價(jià)結(jié)合（見(jiàn)下圖反應(yīng)式），并不是蛋白與蛋白之間的結(jié)合，所以它也能夠“直搗黃龍”結(jié)合在抗原周?chē)?/strong>為什么強(qiáng)調(diào)這一點(diǎn)呢？其實(shí)跟我們后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作是密切相關(guān)的。
TSA熒光染料與帶酪氨酸殘基的目標(biāo)蛋白共價(jià)結(jié)合
又錯(cuò)了又錯(cuò)了，又串到免疫熒光去了！
好吧，糾正以后勉強(qiáng)還是回答出來(lái)了，多色實(shí)驗(yàn)每次是只染一個(gè)指標(biāo)的抗體，染完洗掉以后才會(huì)做下一個(gè)，而這個(gè)洗脫步驟為什么不會(huì)洗掉結(jié)合好的熒光素呢？就是因?yàn)樵碚f(shuō)的染料和抗原是共價(jià)結(jié)合，而抗原抗體是蛋白質(zhì)之間的結(jié)合，洗脫的步驟能夠破壞蛋白間作用力，卻不能破壞穩(wěn)定的共價(jià)鍵，也因著每次染色切片上只有一種抗體，所以我們選擇一抗的時(shí)候就不用去搭配一抗種屬，理論上只要我們能找到不同的熒光染料，再有一臺(tái)能拍那么多熒光的儀器就能夠?qū)崿F(xiàn)超多標(biāo)，目前Absin能夠?qū)崿F(xiàn)的染色天花板是9標(biāo)10色。
那大概了解了這個(gè)技術(shù)以后，就是該怎么用的問(wèn)題了~
回答得不錯(cuò)！多色技術(shù)主要是能夠在一張片子上呈現(xiàn)更豐富的信息，只要是多指標(biāo)相關(guān)的研究，這項(xiàng)技術(shù)都是很合適的~
綜合這次會(huì)話來(lái)說(shuō)，人工智能也并沒(méi)有那么全能，不會(huì)就算了，還自信回復(fù)，豈不是容易誤導(dǎo)他人？所以各位老師有多色相關(guān)的技術(shù)問(wèn)題還是來(lái)問(wèn)Absin吧，ChatGPT數(shù)據(jù)庫(kù)僅截止到2021年，但Absin會(huì)一直學(xué)習(xí)一直成長(zhǎng)，歡迎各位老師跟我們一起探討一起進(jìn)步！
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