菌落計(jì)數(shù)器操作流程

菌落計(jì)數(shù)器可減輕實(shí)驗(yàn)人員的勞動強(qiáng)度，提高工效，提高工作質(zhì)量，廣泛用于食品、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛(wèi)生用品、飲用水、生活污水、工業(yè)廢水、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗(yàn)。是各級隆重防疫站、環(huán)境監(jiān)測站、食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所、醫(yī)院、生物制品所、藥檢所、商檢局、食品廠、飲料廠、化妝品廠、日化廠及大專院校、科研單位實(shí)驗(yàn)室的儀器。
 

樣品的稀釋

固體和半固體樣品

稱取25 g置盛有225 mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000 r/min～10000 r/min均質(zhì)1min～2 min，或放入盛有225 mL稀釋液的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min～2 min，制成1:10的樣品勻液。

液體樣品

以無菌吸管吸取25mL樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠)中，充分混勻，制成1:10的樣品勻液。

上步完成后，用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL，沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面)，振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻，制成1:100的樣品勻液。

培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

樣品稀釋完成后，就要進(jìn)行培養(yǎng)和菌落計(jì)數(shù)了

待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h。水產(chǎn)品30℃±1℃培養(yǎng)72h±3h。

如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長的菌落時，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基 (約4mL)，凝固后翻轉(zhuǎn)平板，按相同條件進(jìn)行培養(yǎng)。

培養(yǎng)完成后，就要進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)了，計(jì)數(shù)可用肉眼觀察，必要時用放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位表示。

大片菌落

其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個平板后乘以2，代表一個平板菌落數(shù)。

鏈狀生長

當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無明

顯界線的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌落計(jì)數(shù)。