超敏人活化素A（ACV-A）ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及參數(shù)

 
 
RENJIEBIO超敏C系列ELISA試劑盒通過(guò)嚴(yán)格的性能檢測(cè)，以滿足客戶對(duì)精確性，特異性，準(zhǔn)確度和靈敏度的要求。
 

 
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人ACV-A單克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)孵育，樣本中存在的ACV-A與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中 ADP 的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在 450 nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度值。
 

 
 

 

 

 
1. 96孔讀板儀器。 
2. 自動(dòng)洗板機(jī). 
3. 移液器和槍頭。建議使用多通道移液器/排槍。 
4. Eppendorf 管。 
5. 額外洗板緩沖液 (neutral PBS 。試劑盒內(nèi)提供足量。如需額外緩沖液可參考如下配方)。 
0.01M PBS：氯化鈉(NaCl)，8g 　　氯化鉀(KCl)， 0.2g 　　磷酸氫二鈉(Na2HPO4)，1.44g 　　磷酸二氫鉀(KH2PO4)， 0.24g　 　加800ml ddH2O。　用1M的HCI或NaOH調(diào)pH, 定容1L。　然后高壓蒸汽滅菌，室溫保存。 
*樣品準(zhǔn)備的相關(guān)試劑不含在試劑盒中。
 

 
生物安全
1、檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染，所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按照傳染物進(jìn)行處置。
2、試劑盒的液體組分中，含有proclin-300防腐劑，可能引起皮膚過(guò)敏反應(yīng)，避免吸入煙霧與皮膚接觸。
3、底物液對(duì)皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入煙霧。戴上防護(hù)手套，實(shí)驗(yàn)完成后徹底洗手。
技術(shù)提示
1、混合蛋白溶液時(shí)，避免起泡。
2、加校準(zhǔn)品與樣本時(shí)，每個(gè)校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭，公共組分應(yīng)該懸臂加樣，避免交叉污染。
3、合適的溫育時(shí)間，和充分的洗滌步驟，是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件。
4、底物溶液為無(wú)色液體，保存過(guò)程中變?yōu)樗{(lán)色，代表底物溶液已經(jīng)失效，不得使用。
5、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致，加入終止液后，藍(lán)色底物產(chǎn)物，會(huì)瞬間變?yōu)辄S色。
6、實(shí)驗(yàn)中，用剩的板條，應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
7、所有液體組分，使用前充分搖勻，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)標(biāo)明的時(shí)間、加樣量及加樣順序進(jìn)行溫育操作。
廢物處理
  所有使用或未使用的試劑，所有污染性的一次性材料，應(yīng)當(dāng)遵循傳染性或潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都有責(zé)任根據(jù)其實(shí)驗(yàn)的類(lèi)型和危險(xiǎn)性級(jí)別，進(jìn)行廢物和污物的處理，同時(shí)要嚴(yán)格依照有關(guān)規(guī)定對(duì)待所有的廢物和污物。