YIJI蛋白樣品樹脂法去內毒素試劑盒使用說明

YIJI蛋白樣品樹脂法去內毒素試劑盒

主要用途

YIJI蛋白樣品樹脂法去內毒素試劑是一種旨在通過脂多糖親和樹脂過濾和吸附，達到去除樣品中細菌內毒素的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細菌蛋白純化樣品的制備。產物可用于各種后續動物和細胞生物學操作。產品即到即用，性能穩定，操作方便，清除效率滿意。

技術背景

內毒素（Endotoxin）是一種脂多糖（Lipopolysaccharides；LPS），革蘭氏陰性細菌細胞膜的組成成分。在細菌蛋白包括融和蛋白純化過程中，細菌裂解釋放出內毒素，伴隨著蛋白，嚴重干擾后續敏感的動物和真核細胞的實驗。YIJI蛋白樣品樹脂法去內毒素技術融入了脂多糖特異親和樹脂，即多聚賴氨酸覆蓋（polylysine coated）和陽離子交換基團官能化（functionalized cation exchange groups）超高交聯聚苯乙烯聚合物（hyper-crosslinked polystyrene polymers），充分有效地使樣品中的內毒素過濾和清除達10微克/毫升，即2500至5000 EU/毫升。避免層析法的非特異性蛋白結合、免疫活性損失、和部分去內毒素失效以及昂貴的缺點。

產品內容

YIJI親和液（Reagent A）   3毫升

產品說明書                  1份

保存方式

保存在4℃冰箱里，有效保證6月

用戶自備

1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器

微型臺式離心機：用于沉淀親和樹脂

渦旋震蕩儀：用于混勻反應物

平式搖蕩儀：用于混勻反應物

實驗步驟

實驗開始前，從－70℃冰箱里取出待測蛋白樣品，置于冰槽里融化。然后進行下列操作。

• 加入1毫升蛋白懸液（1至5毫克蛋白總量）到1.5毫升離心管 
• 小心移取150微升YIJI親和液（Reagent A）到1.5毫升離心管 
• 蓋上蓋子，渦旋震蕩15秒
• 平放在平式搖蕩儀上，在4℃下孵育3小時至16小時，速度為100RPM
• 放進微型臺式離心機離心5分鐘，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf 5415D）
• 小心移取上清液到新的1.5毫升離心管，避免黑色小粒
• 即刻放進－70℃冰箱里保存

注意事項

• 本產品為20次操作
• 本產品采用特殊樹脂法
• 使用1毫升槍頭，將槍頭尖端部分剪去，用于移取YIJI親和液（Reagent A）
• YIJI親和液（Reagent A）不能重復使用
• 100毫升菌液的平均內毒素含量可高達15000 EU（30微克），介于5000至50000 EU
• 去內毒素程度取決于樣品中內毒素含量、樣品性質（細菌來源、融合蛋白特性）和溶液狀況（pH、鹽離子強度等），可以通過多次處理，達到徹底清除的效果；如果效果不甚理想，建議使用YIJI蛋白樣品液相法去內毒素試劑盒-YIJI30046.2
• 經過本產品處理后的產物含有90％的蛋白成分以及100％的免疫源性
• 本公司提供系列內毒素處理試劑產品

質量標準

• 本產品經鑒定性能穩定
• 本產品經鑒定去內毒素顯著